Name: Extração de saliva, hemolinfa, glândulas salivares e intestino médio de carrapatos individuais (Acari: Ixodidae) (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-10-31T13:20:00.000+00:00
Duration: 3 min 22 s
Description: Aprenda a extrair saliva, hemolinfa, glândulas salivares e intestino médio de carrapatos para estudar a localização tecidual de patógenos transmitidos por vetores. Este protocolo avança a compreensão da competência vetorial.

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<ol><li>de la Fuente, J., Villar, M., Cabezas-Cruz, A., Estrada-Peña, A., Ayllón, N., Alberdi, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tick-host-pathogen+interactions%3A+Conflict+and+cooperation%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Pathog%22%5BJournal%5D)">Tick-host-pathogen interactions: Conflict and cooperation.</a> PLoS Pathog. 12 (4), e1005488(2016).</li>
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<li>Scholl, D. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunomodulatory+effects+of+tick+saliva+on+dermal+cells+exposed+to+Borrelia+burgdorferi%2C+the+agent+of+Lyme+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Parasit+Vectors%22%5BJournal%5D)">Immunomodulatory effects of tick saliva on dermal cells exposed to Borrelia burgdorferi, the agent of Lyme disease.</a> Parasit Vectors. 9 (1), 394(2016).</li>
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<li>Gudderra, N. P., Sonenshine, D. E., Apperson, C. S., Roe, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tissue+distribution+and+characterization+of+predominant+hemolymph+carrier+proteins+from+Dermacentor+variabilis+and+Ornithodoros+parkeri%5BTitle%5D)+AND+%22J+Insect+Physiol%22%5BJournal%5D)">Tissue distribution and characterization of predominant hemolymph carrier proteins from Dermacentor variabilis and Ornithodoros parkeri.</a> J Insect Physiol. 48 (2), 161-170 (2002).</li>
<li>Liu, L., Yan, F., Zhang, L., Wu, Z. F., Duan, D. Y., Cheng, T. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protein+profiling+of+hemolymph+in+Haemaphysalis+flava+ticks%5BTitle%5D)+AND+%22Parasit+Vectors%22%5BJournal%5D)">Protein profiling of hemolymph in Haemaphysalis flava ticks.</a> Parasit Vectors. 15 (1), 179(2022).</li>
<li>Moreira, H. N. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+deep+insight+into+the+whole+transcriptome+of+midguts%2C+ovaries+and+salivary+glands+of+the+Amblyomma+sculptum+tick%5BTitle%5D)+AND+%22Parasitol+Int%22%5BJournal%5D)">A deep insight into the whole transcriptome of midguts, ovaries and salivary glands of the Amblyomma sculptum tick.</a> Parasitol Int. 66 (2), 64-73 (2017).</li>
<li>Šimo, L., Kazimirova, M., Richardson, J., Bonnet, S. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+essential+role+of+tick+salivary+glands+and+saliva+in+tick+feeding+and+pathogen+transmission%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Cell+Infect+Microbiol%22%5BJournal%5D)">The essential role of tick salivary glands and saliva in tick feeding and pathogen transmission.</a> Front Cell Infect Microbiol. 7, 281(2017).</li>
<li>Khanal, S., Taank, V., Anderson, J. F., Sultana, H., Neelakanta, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rickettsial+pathogen+perturbs+tick+circadian+gene+to+infect+the+vertebrate+host%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Rickettsial pathogen perturbs tick circadian gene to infect the vertebrate host.</a> Int J Mol Sci. 23 (7), 3545(2022).</li>
<li>Khogali, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tissue-specific+localization+of+tick-borne+pathogens+in+ticks+collected+from+camels+in+Kenya%3A+Insights+into+vector+competence%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Cell+Infect+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Tissue-specific localization of tick-borne pathogens in ticks collected from camels in Kenya: Insights into vector competence.</a> Front Cell Infect Microbiol. 14, 1382228(2024).</li>
<li>Patton, T. G., Dietrich, G., Brandt, K., Dolan, M. C., Piesman, J., Gilmore, R. D. Jr <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Saliva%2C+salivary+gland%2C+and+hemolymph+collection+from+Ixodes+scapularis+ticks%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Saliva, salivary gland, and hemolymph collection from Ixodes scapularis ticks.</a> J Vis Exp. (60), e3894(2012).</li>
<li>Tirloni, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Saliva+from+nymph+and+adult+females+of+Haemaphysalis+longicornis%3A+A+proteomic+study%5BTitle%5D)+AND+%22Parasit+Vectors%22%5BJournal%5D)">Saliva from nymph and adult females of Haemaphysalis longicornis: A proteomic study.</a> Parasit Vectors. 8, 338(2015).</li>
<li>Binetruy, F., Dupraz, M., Buysse, M., Duron, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Surface+sterilization+methods+impact+measures+of+internal+microbial+diversity+in+ticks%5BTitle%5D)+AND+%22Parasit+Vectors%22%5BJournal%5D)">Surface sterilization methods impact measures of internal microbial diversity in ticks.</a> Parasit Vectors. 12 (1), 268(2019).</li>
<li>Oliveira, C. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Proteome+of+Rhipicephalus+sanguineus+tick+saliva+induced+by+the+secretagogues+pilocarpine+and+dopamine%5BTitle%5D)+AND+%22Ticks+Tick+Borne+Dis%22%5BJournal%5D)">Proteome of Rhipicephalus sanguineus tick saliva induced by the secretagogues pilocarpine and dopamine.</a> Ticks Tick Borne Dis. 4 (6), 469-477 (2013).</li>
<li>Edwards, K. T., Goddard, J., Varela-Stokes, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Examination+of+the+internal+morphology+of+the+ixodid+tick%2C+Amblyomma+maculatum+Koch+%28Acari%3A+Ixodidae%29%3A+A+%26%2334%3Bhow-to%26%2334%3B+pictorial+dissection+guide%5BTitle%5D)+AND+%22Midsouth+Entomol%22%5BJournal%5D)">Examination of the internal morphology of the ixodid tick, Amblyomma maculatum Koch (Acari: Ixodidae): A &#34;how-to&#34; pictorial dissection guide.</a> Midsouth Entomol. 2 (1), 28-39 (2009).</li>
<li>Khogali, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exploring+the+microbiomes+of+camel+ticks+to+infer+vector+competence%3A+Insights+from+tissue-level+symbiont-pathogen+relationships%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Exploring the microbiomes of camel ticks to infer vector competence: Insights from tissue-level symbiont-pathogen relationships.</a> Sci Rep. 15 (1), 5574(2025).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>0,5&ntraço; 10 & micro; Pipeta L&nbsp;</td><td>Eppendorf&nbsp;</td><td>3123000020</td><td></td></tr><tr><td>10-& micro; L tips</td><td>Biologix</td><td>23-0010A</td><td></td></tr><tr><td>Agulha ultrafina BD 1,0 mL 31 G, 12,7 mm</td><td>Becton Dickinson (BD) Licenciatura em Biociências</td><td>328411</td><td></td></tr><tr><td>Software BioRender</td><td>BioRender</td><td>https://biorender.com</td><td></td></tr><tr><td>Etanol Absoluto (AR)</td><td>Sigma-Aldrich Chemie GmbH&nbsp;</td><td>107017</td><td></td></tr><tr><td>Pinça fina estilo #5</td><td>Sigma Aldrich & nbsp;</td><td>T4537</td><td></td></tr><tr><td>Software GraphPad Prism 8</td><td>GraphPad Software</td><td>https://www.graphpad.com</td><td></td></tr><tr><td>JIK Bleach Regular&nbsp;</td><td>Reckitt Benckiser Ltd</td><td>Kikuubo Online</td><td></td></tr><tr><td>Lâminas de microscópio</td><td>Sigma Aldrich & nbsp;</td><td>CLS294875X25</td><td></td></tr><tr><td>Espectrofotômetro de microvolume</td><td>Espectrofotômetro UV-Vis de Microvolume</td><td>Espectrofotômetro Microvolume UV-Vis NanoDrop One/OneC Thermo Scientific | Fisher Scientific</td><td></td></tr><tr><td>Paraplast Plus Cera de Parafina &nbsp;</td><td>LEICA BIOSYSTEMS&nbsp;</td><td>39602004</td><td></td></tr><tr><td>Água PCR Ambion & nbsp;</td><td>Ambion</td><td>AM9935</td><td></td></tr><tr><td>placa de Petri, vidro, 100 mm e agudo; 15 mm</td><td>Duran</td><td>237554608</td><td></td></tr><tr><td>Soro salino tamponado com fosfato (PBS)</td><td>Sigma Aldrich & nbsp;</td><td>79378</td><td></td></tr><tr><td>Plasticina (argila de modelagem não tóxica) & nbsp;</td><td>O Armazém do Laboratório & nbsp;</td><td>SE180-45</td><td></td></tr><tr><td>Lâminas de bisturi, nº 11</td><td>Sigma Aldrich & nbsp;</td><td>S2771</td><td></td></tr><tr><td>Cabo de bisturi</td><td>Sigma Aldrich & nbsp;</td><td>S2896</td><td></td></tr><tr><td>MICROSCÓPIO ESTÈREO STEMI 2000-C</td><td>Zeiss, Oberkochen, Alemanha</td><td>455053-0000-000</td><td></td></tr><tr><td>Fita transperant</td><td>Magia Escocesa</td><td>MID 70005189280</td><td></td></tr></tbody></table>

extração de saliva, hemolinfa, glândulas salivares e intestino médio de carrapatos individuais (acari: ixodidae)

Extraction of Saliva, Haemolymph, Salivary Glands, and Midgut from Individual Ticks (Acari: Ixodidae)

Este protocolo facilitou a coleta bem-sucedida de amostras de carrapatos e tecidos biológicos necessários para a triagem de patógenos e outras análises a jusante. A Figura 1, a Figura 2 e a Figura 3 ilustram a coleta de saliva, hemolinfa, glândulas salivares e intestino médio de fêmeas Hy . rufipes parcial e totalmente ingurgitadas. Esses carrapatos foram obtidos de uma colônia de carrapatos criada sob condições controladas...

Extração de saliva, hemolinfa, glândulas salivares e intestino médio de carrapatos individuais (Acari: Ixodidae)

Ticks are blood-feeding ectoparasites recognised for their ability to transmit several infectious pathogens to humans and animals. Tick-borne pathogen ...

extraction-saliva-haemolymph-salivary-glands-midgut-from-individual

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Imunologia e Infecção

O intestino médio do mosquito e glândulas salivares são entrada de chave e pontos de saída para patógenos como vector Plasmodium falciparum e do vírus da dengue. Este vídeo demonstra as técnicas de dissecção para a remoção das glândulas salivares e intestino médio de Aedes aegypti.

Dissecção das glândulas salivares e intestino médio de Ae. aegypti mosquitos

Estudos de pesquisa a doença de Lyme muitas vezes exigem a geração de carrapatos infectados com o patógeno Borrelia burgdorferi, um processo que normalmente leva várias semanas. Aqui nós demonstramos uma microinjeção baseado procedimento de infecção do carrapato que pode ser realizado em poucas horas. Nós também demonstramos um método de imunofluorescência para na localização in situ de B. burgdorferi dentro de carrapatos.

Métodos para a transferência rápida e localização de Patógenos Doença de Lyme no intestino Tick

A coleta de hemolinfa do carrapato infectado, glândulas salivares e saliva é importante estudar como a transmitida por carrapatos patógenos causam doenças. Neste protocolo, demonstramos como coletar glândulas salivares e hemolinfa de...

A saliva, glândula salivar, e Coleta de hemolinfa de carrapatos Ixodes scapularis

A doença de Lyme é a doença mais comumente relatados transmitidas por vetores na América do Norte. O agente causador, a Borrelia burgdorferi é uma bactéria espiroqueta transmitida por carrapatos ixodídeos. A transmissão e a detecção de infecção em modelos animais é optimizada pela utilização de alimentação de carraça, que aqui descrita.

Alimentação dos Carrapatos em Animais de Transmissão e Xenodiagnóstico em Lyme Disease Research

A produção de carrapatos criadas em laboratório saudáveis ​​é essencial para estudos sobre a biologia carrapato, e carrapato-patógeno interações. Aqui demonstramos um protocolo simples para a alimentação carrapato imaturo que é rentável e menos stressante para ratinhos.

Criação<em&gt; Ixodes scapularis,</em&gt; O Ticked Black-legged: Alimentando estágios imaturos em ratos

Utilizou-se uma metodologia baseada em gradiente de centrifugação por densidade modificada para isolar células epiteliais do tecido intestinal de Rhipicephalus microplus . As proteínas ligadas à superfície foram biotiniladas e purificadas através de esferas magnéticas de estreptavidina para utilização em aplicações a jusante.

Purificação de proteínas de superfície de células biotiniladas de<em&gt; Rhipicephalus microplus</em&gt; Células intestinais epiteliais

Aqui, apresentamos um protocolo para espacial e temporalmente, avaliar a presença de microbiota viável nas entranhas de carrapato usando uma abordagem de hibridação in situ de montagem todo modificado.

Visualização da Microbiota nas entranhas do carrapato por toda a montagem In Situ da hibridação

A análise da hemolinfa de carrapato representa uma importante fonte de informações sobre como alguns patógenos causam doenças e como os carrapatos respondem imunologicamente a essa infecção. O presente estudo demonstra como inocular propágulos fúngicos e coletar hemolinfas de fêmeas de Rhipicephalus MICROPLUS ingurgizadas.

Divulgando a coleta de Hemolinfas e a inoculação de blastósporos de Metarhizium em carrapatos de Rhipicephalus MICROPLUS para estudos de patologia de invertebrados

O presente protocolo descreve o isolamento de microRNAs de glândulas salivares de carrapatos e vesículas extracelulares purificadas. Este é um procedimento universal que combina reagentes e suprimentos comumente usados. O método também permite o uso de um pequeno número de carrapatos, resultando em microRNAs de qualidade que podem ser facilmente sequenciadas.

Isolamento de microRNAs de Tick Ex Vivo Culturas de Glândulas Salivares e Vesículos Extracelulares

Este artigo apresenta a metodologia para exposição humana a larvas de Ixodes scapularis para pesquisa clínica. A técnica é relativamente simples, tolerável pelos voluntários da pesquisa, podendo ser modificada de acordo com as necessidades experimentais. Essa pesquisa envolvendo seres humanos deve ser conduzida de acordo com protocolos de estudos clínicos aprovados pelas autoridades reguladoras apropriadas.

Um modelo para exposição experimental de humanos a larvas de carrapatos Ixodes scapularis

Este método descreve o desenvolvimento de um sistema de alimentação sanguínea de carrapatos in vitro , incorporando uma câmara impressa em 3D e uma membrana de silicone fabricada em laboratório. O sistema permite a alimentação artificial de carrapatos, facilitando a amostragem em vários estágios de alimentação e utilizando baixos volumes de sangue, fornecendo uma ferramenta inestimável para estudar carrapatos ixódidas.

Sangue de carrapato se alimentando através de uma membrana artificial em uma câmara impressa em 3D em pesquisa de carrapatos Ixodid

Aprenda a extrair saliva, hemolinfa, glândulas salivares e intestino médio de carrapatos para estudar a localização tecidual de patógenos transmitidos por vetores. Este protocolo avança a compreensão da competência vetorial.

Extração de saliva, hemolinfa, glândulas salivares e intestino médio de carrapatos individuais (Acari: Ixodidae)

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