Name: Avaliação das Respostas Foliares a Metabólitos Secundários Microbianos Usando um Formato de Alta Produção (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-12-05T13:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 51 s
Description: Aprenda a avaliar respostas de estresse em plantas usando um ensaio de alta produção que mede vazamento de íons, atividade de peroxidase e produção de calose simultaneamente. Este método otimiza o uso de metabólitos secundários microbianos limitados.

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<ol><li>Yu, X., Feng, B., He, P., Shan, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((From+chaos+to+harmony%3A+responses+and+signaling+upon+microbial+pattern+recognition%5BTitle%5D)+AND+%22Annu+Rev+Phytopathol%22%5BJournal%5D)">From chaos to harmony: responses and signaling upon microbial pattern recognition.</a> Annu Rev Phytopathol. 55 (1), 109-137 (2017).</li>
<li>Brauer, E. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+cyclic+lipopeptide+from+Fusarium+graminearum+targets+plant+membranes+to+promote+virulence%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Rep%22%5BJournal%5D)">A cyclic lipopeptide from Fusarium graminearum targets plant membranes to promote virulence.</a> Cell Rep. 43 (7), 114384(2024).</li>
<li>Thoms, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Innate+immunity+can+distinguish+beneficial+from+pathogenic+rhizosphere+microbiota%5BTitle%5D)+AND+%22bioRxiv%22%5BJournal%5D)">Innate immunity can distinguish beneficial from pathogenic rhizosphere microbiota.</a> bioRxiv. , (2023).</li>
<li>Nishiuchi, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fusarium+phytotoxin+trichothecenes+have+an+elicitor-like+activity+in+Arabidopsis+thaliana%2C+but+the+activity+differed+significantly+among+their+molecular+species%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Plant+Microbe+Interact%22%5BJournal%5D)">Fusarium phytotoxin trichothecenes have an elicitor-like activity in Arabidopsis thaliana, but the activity differed significantly among their molecular species.</a> Mol Plant Microbe Interact. 19 (5), 512-520 (2006).</li>
<li>Schellenberger, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Apoplastic+invasion+patterns+triggering+plant+immunity%3A+plasma+membrane+sensing+at+the+frontline%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Plant+Pathol%22%5BJournal%5D)">Apoplastic invasion patterns triggering plant immunity: plasma membrane sensing at the frontline.</a> Mol Plant Pathol. 20 (11), 1602-1616 (2019).</li>
<li>Henry, G., Deleu, M., Jourdan, E., Thonart, P., Ongena, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+bacterial+lipopeptide+surfactin+targets+the+lipid+fraction+of+the+plant+plasma+membrane+to+trigger+immune-related+defence+responses%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Microbiol%22%5BJournal%5D)">The bacterial lipopeptide surfactin targets the lipid fraction of the plant plasma membrane to trigger immune-related defence responses.</a> Cell Microbiol. 13 (11), 1824-1837 (2011).</li>
<li>Pršić, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanosensing+and+sphingolipid-docking+mediate+lipopeptide-induced+immunity+in+Arabidopsis%5BTitle%5D)+AND+%22bioRxiv%22%5BJournal%5D)">Mechanosensing and sphingolipid-docking mediate lipopeptide-induced immunity in Arabidopsis.</a> bioRxiv. , (2023).</li>
<li>Crouzet, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biosurfactants+in+plant+protection+against+diseases%3A+rhamnolipids+and+lipopeptides+case+study%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Bioeng+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Biosurfactants in plant protection against diseases: rhamnolipids and lipopeptides case study.</a> Front Bioeng Biotechnol. 8, 1014(2020).</li>
<li>Khan, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Luminol-based+chemiluminescent+signals%3A+clinical+and+non-clinical+application+and+future+uses%5BTitle%5D)+AND+%22Appl+Biochem+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Luminol-based chemiluminescent signals: clinical and non-clinical application and future uses.</a> Appl Biochem Biotechnol. 173, 333-355 (2014).</li>
<li>Schenk, S. T., Schikora, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Staining+of+callose+depositions+in+root+and+leaf+tissues%5BTitle%5D)+AND+%22Bio-protoc%22%5BJournal%5D)">Staining of callose depositions in root and leaf tissues.</a> Bio-protoc. 5 (6), e1429(2015).</li>
<li>Mott, G. A., Desveaux, D., Guttman, D. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+high-sensitivity%2C+microtiter-based+plate+assay+for+plant+pattern-triggered+immunity%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Plant+Microbe+Interact%22%5BJournal%5D)">A high-sensitivity, microtiter-based plate assay for plant pattern-triggered immunity.</a> Mol Plant Microbe Interact. 31 (5), 499-504 (2018).</li>
<li>Hatsugai, N., Katagiri, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantification+of+plant+cell+death+by+electrolyte+leakage+assay%5BTitle%5D)+AND+%22Bio-protoc%22%5BJournal%5D)">Quantification of plant cell death by electrolyte leakage assay.</a> Bio-protoc. 8 (5), e2758(2018).</li>
<li>Zhang, X. H., Yu, X. Z., Yue, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phytotoxicity+of+dimethyl+sulfoxide+%28DMSO%29+to+rice+seedlings%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Environ+Sci+Technol%22%5BJournal%5D)">Phytotoxicity of dimethyl sulfoxide (DMSO) to rice seedlings.</a> Int J Environ Sci Technol. 13, 607-614 (2016).</li>
<li>Mannan, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((DMSO+triggers+the+generation+of+ROS+leading+to+an+increase+in+artemisinin+and+dihydroartemisinic+acid+in+Artemisia+annua+shoot+cultures%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Cell+Rep%22%5BJournal%5D)">DMSO triggers the generation of ROS leading to an increase in artemisinin and dihydroartemisinic acid in Artemisia annua shoot cultures.</a> Plant Cell Rep. 29, 143-152 (2010).</li>
<li>Felix, G., Duran, J. D., Volko, S., Boller, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Plants+have+a+sensitive+perception+system+for+the+most+conserved+domain+of+bacterial+flagellin%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+J%22%5BJournal%5D)">Plants have a sensitive perception system for the most conserved domain of bacterial flagellin.</a> Plant J. 18 (3), 265-276 (1999).</li>
<li>Jourdan, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Insights+into+the+defense-related+events+occurring+in+plant+cells+following+perception+of+surfactin-type+lipopeptide+from+Bacillus+subtilis%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Plant+Microbe+Interact%22%5BJournal%5D)">Insights into the defense-related events occurring in plant cells following perception of surfactin-type lipopeptide from Bacillus subtilis.</a> Mol Plant Microbe Interact. 22 (4), 456-468 (2009).</li>
<li>Raaijmakers, J. M., De Bruijn, I., Nybroe, O., Ongena, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Natural+functions+of+lipopeptides+from+Bacillus+and+Pseudomonas%3A+more+than+surfactants+and+antibiotics%5BTitle%5D)+AND+%22FEMS+Microbiol+Rev%22%5BJournal%5D)">Natural functions of lipopeptides from Bacillus and Pseudomonas: more than surfactants and antibiotics.</a> FEMS Microbiol Rev. 34 (6), 1037-1062 (2010).</li>
<li>vábová, L., Lebeda, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vitro+selection+for+improved+plant+resistance+to+toxin-producing+pathogens%5BTitle%5D)+AND+%22J+Phytopathol%22%5BJournal%5D)">In vitro selection for improved plant resistance to toxin-producing pathogens.</a> J Phytopathol. 153 (1), 52-64 (2005).</li>
<li>Mousa, W. K., Raizada, M. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+diversity+of+antimicrobial+secondary+metabolites+produced+by+fungal+endophytes%3A+an+interdisciplinary+perspective%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Microbiol%22%5BJournal%5D)">The diversity of antimicrobial secondary metabolites produced by fungal endophytes: an interdisciplinary perspective.</a> Front Microbiol. 4, 65(2013).</li>
<li>Bektas, Y., Eulgem, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Synthetic+plant+defense+elicitors%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Plant+Sci%22%5BJournal%5D)">Synthetic plant defense elicitors.</a> Front Plant Sci. 5, 804(2015).</li>
<li>Saeed, B., Trujillo, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analysis+of+immunity-related+oxidative+bursts+by+a+luminol-based+assay%5BTitle%5D)+AND+%22Environ+Responses+Plants%3A+Methods+Protoc%22%5BJournal%5D)">Analysis of immunity-related oxidative bursts by a luminol-based assay.</a> Environ Responses Plants: Methods Protoc. , 339-346 (2022).</li>
<li>Brauer, E. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transcriptional+and+hormonal+profiling+of+Fusarium+graminearum-infected+wheat+reveals+an+association+between+auxin+and+susceptibility%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Mol+Plant+Pathol%22%5BJournal%5D)">Transcriptional and hormonal profiling of Fusarium graminearum-infected wheat reveals an association between auxin and susceptibility.</a> Physiol Mol Plant Pathol. 107, 33-39 (2019).</li>
<li>Taylor, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+wetting+of+leaf+surfaces%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Colloid+Interface+Sci%22%5BJournal%5D)">The wetting of leaf surfaces.</a> Curr Opin Colloid Interface Sci. 16 (4), 326-334 (2011).</li>
<li>Mika, A., Boenisch, M. J., Hopff, D., Lüthje, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Membrane-bound+guaiacol+peroxidases+from+maize+%28Zea+mays+L.%29+roots+are+regulated+by+methyl+jasmonate%2C+salicylic+acid%2C+and+pathogen+elicitors%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Bot%22%5BJournal%5D)">Membrane-bound guaiacol peroxidases from maize (Zea mays L.) roots are regulated by methyl jasmonate, salicylic acid, and pathogen elicitors.</a> J Exp Bot. 61 (3), 831-841 (2010).</li>
<li>Brauer, E. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transcriptional+profiling+and+genetic+mapping+of+barley+responses+to+bacterial+flagellin%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Plant+Microbe+Interact%22%5BJournal%5D)">Transcriptional profiling and genetic mapping of barley responses to bacterial flagellin.</a> Mol Plant Microbe Interact. 38 (2), 344-352 (2025).</li>
<li>Takáč, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((TALEN-based+HvMPK3+knock-out+attenuates+proteome+and+root+hair+phenotypic+responses+to+flg22+in+barley%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Plant+Sci%22%5BJournal%5D)">TALEN-based HvMPK3 knock-out attenuates proteome and root hair phenotypic responses to flg22 in barley.</a> Front Plant Sci. 12, 666229(2021).</li>
<li>Kim, M. G., Macoy, D. M., Lee, J. Y., Cha, J. Y., Kim, W. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interactions+between+plant+immunity%2C+temperature%2C+light%2C+and+circadian+rhythm%5BTitle%5D)+AND+%22J+Plant+Biochem+Physiol%22%5BJournal%5D)">Interactions between plant immunity, temperature, light, and circadian rhythm.</a> J Plant Biochem Physiol. 9, 260(2021).</li>
<li>Bahadoor, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gramillin+A+and+B%3A+cyclic+lipopeptides+identified+as+the+nonribosomal+biosynthetic+products+of+Fusarium+graminearum%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Chem+Soc%22%5BJournal%5D)">Gramillin A and B: cyclic lipopeptides identified as the nonribosomal biosynthetic products of Fusarium graminearum.</a> J Am Chem Soc. 140 (48), 16783-16791 (2018).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Ácido 5-aminosalicílico</td><td>Millipore Sigma&nbsp;</td><td>A79809</td><td></td></tr><tr><td>Bomba de vácuo Barnart</td><td>Grupo de Tecnologia Artesanal</td><td>400-3910</td><td></td></tr><tr><td>Sonda de microcondutividade COND-905</td><td>Lazar Research Laboratories Inc.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Peptídeo FLG22</td><td>AnaSpec</td><td>AS-62633</td><td></td></tr><tr><td>Infinite 200PRO F</td><td>TeCan Group Ltd.</td><td>30190086</td><td></td></tr><tr><td>Surfactina</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S3523</td><td></td></tr><tr><td>Toxina T-2</td><td>Cayman Chemical Company Inc</td><td>20433</td><td></td></tr></tbody></table>

avaliação das respostas foliares a metabólitos secundários microbianos usando um formato de alta produção

Evaluating Leaf Responses to Microbial Secondary Metabolites Using A High-Throughput Format

Avaliação das Respostas Foliares a Metabólitos Secundários Microbianos Usando um Formato de Alta Produção

Microbes secrete structurally diverse secondary metabolites during plant infection, some of which are detected by plant cells, which trigger stress ...

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Biology

Biologia

Nós desenvolvemos um protocolo simples e reprodutível para acessar a resposta estomática ao bactérias vivas. Este método minimiza ferimento e manipulação da folha, em comparação com o uso de peelings epidérmicos relatado anteriormente.

Avaliar a resposta estomática ao vivo células bacterianas usando imagens Folha Inteira

Fonte: Ali, I., et al. Triagem de Alto Débito de Isolados Microbianos com Impacto na Saúde de Caenorhabditis elegans . J. Vis. Exp. (2022)Este vídeo demonstra um ensaio fluorescente de alto rendimento para avaliar como as bactérias intestinais afetam a resiliência ao estresse em Caenorhabditis elegans. Ao rastrear a fluorescência azul dos grânulos intestinais rompidos, o ensaio revela sinais de morte mais antigos em vermes expostos a bactérias testadas.

Ensaio fluorescente de alta capacidade para estudar interações microrganismo-verme

A estrutura da parede celular vegetal e as características químicas são avaliadas para identificar matérias-primas ideais para biocombustíveis e biomateriais. Os métodos padrão têm limitações quando aplicados a grandes conjuntos de dados. Esses métodos de pré-tratamento de alto rendimento, sacarificação enzimática e espectrometria de massa de feixe molecular de pirólise comparam um grande número de amostras de biomassa com tempo e custo experimentais reduzidos.

Rastreio de alto rendimento de Variações recalcitrância da biomassa lignocelulósica em: Total lignina, a lignina monómeros, e enzimática Sugar lançamento

Este manuscrito descreve como as taxas de metabolismo do herbicida podem ser efetivamente quantificadas com folhas excisadas de uma erva daninha dicotiledônea, reduzindo assim a variabilidade e removendo quaisquer possíveis efeitos de confusão da absorção ou translocação do herbicida normalmente observados em ensaios de plantas inteiras.

Medindo Taxas de Herbicida Metabolismo em Dicot Weeds com um ensaio extirpado Folha

Aqui, descrevemos um protocolo para a extracção de metabolitos a partir de Staphylococcus aureus e a sua subsequente análise por meio de cromatografia líquida e espectrometria de massa.

Uma abordagem baseada em Espectrometria Tandem Cromatografia Líquida de Massachusetts para análise de metabolitos de<em&gt; Staphylococcus aureus</em

Um sistema hidropónico simples, versátil e baixo custo em vitro foi otimizado com sucesso, possibilitando experiências em grande escala, sob condições estéreis. Este sistema facilita a aplicação de produtos químicos em uma solução e sua eficiente absorção pelas raízes para estudos moleculares, bioquímicas e fisiológicas.

Um flexível baixo custo sistema hidropônico para avaliar as respostas de planta para pequenas moléculas em condições estéreis

Espectrometria de massa de pulverizador de folha é uma técnica de análise química direta que minimiza a preparação da amostra e elimina a cromatografia, permitindo a detecção rápida de pequenas moléculas de tecidos vegetais.

Espectrometria de massa folha Spray: Uma técnica de ionização ambiente rápida para avaliar diretamente a metabolitos de tecidos vegetais

Este protocolo descreve uma única taxa de transferência de técnicas complementares, analíticas e omics, culminando em uma caracterização-pareado de matéria orgânica natural e proteomics microbiana nos diferentes ecossistemas. Esta abordagem permite comparações robustas para a identificação de vias metabólicas e transformações importantes para descrever a produção de gás de efeito estufa e prevendo respostas a mudanças ambientais.

Single-produção complementares técnicas analíticas de alta resolução para caracterização de misturas complexas de matéria orgânica Natural

O método apresentado cria tecido vegetal danificado herbívoro natural através da aplicação de larvas de Manduca sexta a folhas destacadas de batata. O tecido vegetal é analisado para a expressão de seis homólogos do fator de transcrição envolvidos em respostas adiantadas ao herbivory do inseto.

Ensaios foliares destacados para simplificar estudos de expressão gênica em batata durante a infestação por mastigação de insetos Manduca sexta

Os ensaios de interação cocultura apresentados neste protocolo são de baixo custo, alta taxa de transferência e simples. Esses ensaios podem ser usados para observar interações microbianas na cocultura, identificar padrões de interação e caracterizar o potencial inibitório de uma cepa microbiana de interesse contra patógenos humanos e ambientais.

Ensaios de co-cultura de alta produtividade para a investigação de interações microbianas

Um protocolo de mineração de genoma guiado por espectrometria em massa é estabelecido e descrito aqui. Baseia-se em informações de seqüência de genomas e análise sustal e tem como objetivo facilitar a identificação de moléculas de extratos microbianos e vegetais complexos.

Mineração de genoma guiada por espectrometria em massa como ferramenta para descobrir novos produtos naturais

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