Name: Medindo o Envelhecimento de Célula Única com um Biomarcador Baseado em Imagem de Cromatina e Envelhecimento Epigenético (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-01-30T13:15:00.000+00:00
Duration: 9 min 10 s
Description: Aprenda a técnica ImAge baseada em imagem para quantificar envelhecimento e rejuvenescimento em resolução de célula única. Este método computacional não destrutivo oferece alternativa eficiente aos relógios de metilação de DNA tradicionais.

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<ol><li>Alvarez-Kuglen, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ImAge+quantitates+aging+and+rejuvenation%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Aging%22%5BJournal%5D)">ImAge quantitates aging and rejuvenation.</a> Nat Aging. 4, 1308-1327 (2024).</li>
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<li>Moqri, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biomarkers+of+aging+for+the+identification+and+evaluation+of+longevity+interventions%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Biomarkers of aging for the identification and evaluation of longevity interventions.</a> Cell. 186 (18), 3758-3775 (2023).</li>
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<li>Horvath, S., Raj, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((DNA+methylation-based+biomarkers+and+the+epigenetic+clock+theory+of+ageing%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Genet%22%5BJournal%5D)">DNA methylation-based biomarkers and the epigenetic clock theory of ageing.</a> Nat Rev Genet. 19 (6), 371-384 (2018).</li>
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<li>Ninomiya, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ImAge%3A+quantifying+epigenetic+ageing+with+single-cell+images%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Cancer%22%5BJournal%5D)">ImAge: quantifying epigenetic ageing with single-cell images.</a> Nat Rev Cancer. 25, 755(2025).</li>
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<li>ImAge_workflow. , 
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<li>Chondronasiou, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multi-omic+rejuvenation+of+naturally+aged+tissues+by+a+single+cycle+of+transient+reprogramming%5BTitle%5D)+AND+%22Aging+Cell%22%5BJournal%5D)">Multi-omic rejuvenation of naturally aged tissues by a single cycle of transient reprogramming.</a> Aging Cell. 21 (3), e13578(2022).</li>
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<li>González-Ramírez, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differential+contribution+to+gene+expression+prediction+of+histone+modifications+at+enhancers+or+promoters%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Comput+Biol%22%5BJournal%5D)">Differential contribution to gene expression prediction of histone modifications at enhancers or promoters.</a> PLoS Comput Biol. 17 (9), e1009368(2021).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Albumina Sérica Bovina</td><td>Sigma-Aldrich&nbsp;</td><td>A9647</td><td></td></tr><tr><td>Anticorpo secundário anti-rato Donkey IgG (H+L) altamente adsorvido cruzadamente, Alexa 488&nbsp;</td><td>Invitrogen</td><td>A-21202</td><td></td></tr><tr><td>Anti-Coelho IgG (H+L) Anticorpo Secundário Altamente Adsorvido Cruzado, Alexa 555</td><td>Invitrogen</td><td>A-31572</td><td></td></tr><tr><td>Glicina</td><td>Bio-Rad</td><td>161-0718</td><td></td></tr><tr><td>Histona H3K27ac anticorpo (mAb)&nbsp;</td><td>Motivo Ativo</td><td>39685</td><td></td></tr><tr><td>Anticorpo H3K27me3 (pAb)&nbsp;</td><td>Motivo Ativo</td><td>39155</td><td></td></tr><tr><td>Hoechst 33342</td><td>Invitrogen</td><td>H3570</td><td></td></tr><tr><td>Kit de Isolamento de Núcleos: Preparação EZ de Núcleos</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>NUC101</td><td></td></tr><tr><td>Opereta CLS High Content Imager</td><td>Revvity</td><td>https://www.revvity.com/au-en/product/operetta-cls-system-hh16000020</td><td></td></tr><tr><td>Paraformaldeído 16% Solução Aquosa Grau EM</td><td>Ciências da Microscopia Eletrônica</td><td>15710-S</td><td></td></tr><tr><td>PBS</td><td>Thermo Fisher</td><td>AM9624</td><td></td></tr><tr><td>Microplaca PhenoPlate de 384 poços</td><td>Revvity</td><td>6057302</td><td></td></tr><tr><td>Triton-X</td><td>Sigma</td><td>T8787</td><td></td></tr><tr><td>Solução Trippan Blue, 0,4%&nbsp;</td><td>Gibco&nbsp;</td><td>15250061&nbsp;</td><td></td></tr></tbody></table>

medindo o envelhecimento de célula Única com um biomarcador baseado em imagem de cromatina e envelhecimento epigenético

Measuring Single-Cell Aging with an Imaging-based Biomarker of Chromatin and Epigenetic Aging

Medindo o Envelhecimento de Célula Única com um Biomarcador Baseado em Imagem de Cromatina e Envelhecimento Epigenético

To advance personalized healthcare and assess potential rejuvenation strategies, biomarkers reflecting biological age are crucial. We have introduced ...

measuring-single-cell-aging-with-an-imaging-based-biomarker-chromatin

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JoVE Journal

Biology

Biologia

Descrevemos os métodos fotobranqueamento inclusive Recuperação de Fluorescência Após Fotodegradação (FRAP) e perda de fluorescência em Fotodegradação (FLIP) para monitorar a dinâmica de proteínas da cromatina no tronco embrionárias (ES) células. Proteínas da cromatina dinâmica, que é considerado um dos meios para estudar a plasticidade da cromatina, é reforçada em células pluripotentes.

Fotobranqueamento Ensaios (FRAP &amp; FLIP) a Medida Dynamics Protein Chromatin em Viver Células-Tronco Embrionárias

Este artigo apresenta um protocolo optimizado para a produção de batatas fritas de microfluidos e a configuração de experiências de microfluidos para medir o tempo de vida e fenótipos celulares de células de levedura individuais.

Usando dispositivos microfluídicos medir Longevidade e Celular fenótipos em células individuais levedura de brotamento

A senescência celular, o estado irreversível de paragem do ciclo celular, pode ser induzida por vários stresses celulares. Aqui, descrevemos os protocolos para induzir a senescência e métodos celular para avaliar marcadores de senescência.

Técnicas para induzir e quantificar Cellular Senescence

Este protocolo descreve um método para determinar a proteína meia-vida em vida única células aderentes, usando pulso rotulagem e imagem latente de lapso de tempo de fluorescência de proteínas da fusão SNAP-marca.

Célula única quantificação das taxas de degradação de proteínas por microscopia de fluorescência de lapso de tempo em cultura de células aderentes

Aqui, vamos discutir uma série de protocolos para indução e validação da senescência celular em culturas de células. Podemos focar diferentes estímulos indutores senescência e descrever a quantificação de marcadores comuns associadas a senescência. Nós fornecemos detalhes técnicos utilizando fibroblastos como modelo, mas os protocolos podem ser adaptados para vários modelos de celulares.

Indução e validação da senescência celular em células humanas primárias

A senescência celular é o fator-chave no desenvolvimento de patologias crônicas relacionadas à idade. A identificação da terapêutica que visam as células senescentes mostra a promessa de estender o envelhecimento saudável. Aqui, nós apresentamos um ensaio novo à tela para a identificação do senotherapeutics baseado na medida da atividade associada da senescência β-galactosidase em únicas pilhas.

Ensaio de triagem à base de SA-β-galactosidase para a identificação de medicamentos Senoterapêuticos

Aqui nós apresentamos um protocolo para avaliar a dinâmica da formação do eixo e da progressão mitotic. Nossa aplicação da imagem latente do lapso de tempo permite que o usuário identifique pilhas em vários estágios do mitosis, controle e identifique defeitos mitotic, e analise a dinâmica do eixo e o Fate mitotic da pilha em cima da exposição às drogas antimitotic.

Imagem latente viva da pilha para avaliar a dinâmica do sincronismo da metafase e do Fate da pilha depois das perturbações mitotic do eixo

O presente protocolo descreve um método de célula única para análises epigenômicas iterativas usando uma única célula reutilizável. A célula única reutilizável permite a análise de múltiplas marcas epigenéticas em uma mesma célula e a validação estatística dos resultados.

Célula única reutilizável para análises epigenômicas iterativas

Aqui apresentamos um método baseado em citometria de fluxo para visualização e quantificação de marcadores associados à senescência múltipla em células únicas.

Detecção simultânea baseada em imagens e flutometria de marcadores de senescência fluorescentes múltiplas em células cancerígenas senescentes induzidas por terapia

A imunofluorescência multiplexada permite a marcação sequencial de múltiplos marcadores de anticorpos dentro de uma única seção de tecido para apoiar a análise espacial da arquitetura do tecido e das populações celulares. Aqui, é apresentado um fluxo de trabalho para a detecção multiplex de marcadores estruturais, estruturais e imunológicos associados à senescência, incluindo preparação manual e automatizada de lâminas, imagens iterativas e análise de células únicas usando software digital de...

Ensaio de Imunofluorescência Multiplexada para Avaliação Espacial de Marcadores de Senescência in vivo

Este artigo apresenta um protocolo LysoTracker de células vivas para medir a remodelação lisossômica durante a senescência em fibroblastos humanos IMR-90.

Perfil Lisossômico com LysoTracker para avaliação quantitativa da senescência celular em fibroblastos humanos

Aprenda a técnica ImAge baseada em imagem para quantificar envelhecimento e rejuvenescimento em resolução de célula única. Este método computacional não destrutivo oferece alternativa eficiente aos relógios de metilação de DNA tradicionais.

Medindo o Envelhecimento de Célula Única com um Biomarcador Baseado em Imagem de Cromatina e Envelhecimento Epigenético

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