Name: Análise específica do subtipo celular do proteassoma da membrana neuronal em neurônios somatossensoriais (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-10-10T13:20:00.000+00:00
Duration: 9 min 27 s
Description: Aprenda a analisar o proteassoma da membrana neuronal em neurônios somatossensoriais usando triagem celular e imunofluorescência. Este método permite estudar a função do NMP na modulação do tato, coceira e dor.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Cartelli, D., Cavaletti, G., Lauria, G., Meregalli, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ubiquitin+proteasome+system+and+microtubules+are+master+regulators+of+central+and+peripheral+nervous+system+axon+degeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Cells%22%5BJournal%5D)">Ubiquitin proteasome system and microtubules are master regulators of central and peripheral nervous system axon degeneration.</a> Cells. 11 (8), 1358(2022).</li>
<li>Fortun, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impaired+proteasome+activity+and+accumulation+of+ubiquitinated+substrates+in+a+hereditary+neuropathy+model%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurochem%22%5BJournal%5D)">Impaired proteasome activity and accumulation of ubiquitinated substrates in a hereditary neuropathy model.</a> J Neurochem. 92 (6), 1531-1541 (2005).</li>
<li>Thibaudeau, T. A., Smith, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+practical+review+of+proteasome+pharmacology%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacol+Rev%22%5BJournal%5D)">A practical review of proteasome pharmacology.</a> Pharmacol Rev. 71 (2), 170-197 (2019).</li>
<li>Türker, F., Cook, E. K., Margolis, S. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+proteasome+and+its+role+in+the+nervous+system%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Chem+Biol%22%5BJournal%5D)">The proteasome and its role in the nervous system.</a> Cell Chem Biol. 28 (7), 903-917 (2021).</li>
<li>VerPlank, J. J. S., Lokireddy, S., Feltri, M. L., Goldberg, A. L., Wrabetz, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impairment+of+protein+degradation+and+proteasome+function+in+hereditary+neuropathies%5BTitle%5D)+AND+%22Glia%22%5BJournal%5D)">Impairment of protein degradation and proteasome function in hereditary neuropathies.</a> Glia. 66 (2), 379-395 (2018).</li>
<li>Moss, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+role+of+the+ubiquitin-proteasome+system+in+neuropathic+pain%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">A role of the ubiquitin-proteasome system in neuropathic pain.</a> J Neurosci. 22 (4), 1363-1372 (2002).</li>
<li>Meregalli, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bortezomib-induced+painful+neuropathy+in+rats%3A+a+behavioral%2C+neurophysiological+and+pathological+study%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Pain%22%5BJournal%5D)">Bortezomib-induced painful neuropathy in rats: a behavioral, neurophysiological and pathological study.</a> Eur J Pain. 14 (4), 343-350 (2010).</li>
<li>Meregalli, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+overview+of+bortezomib-induced+neurotoxicity%5BTitle%5D)+AND+%22Toxics%22%5BJournal%5D)">An overview of bortezomib-induced neurotoxicity.</a> Toxics. 3 (3), 294-303 (2015).</li>
<li>Velasco, R., Alberti, P., Bruna, J., Psimaras, D., Argyriou, A. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bortezomib+and+other+proteosome+inhibitors-induced+peripheral+neurotoxicity%3A+from+pathogenesis+to+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22J+Peripher+Nerv+Syst%22%5BJournal%5D)">Bortezomib and other proteosome inhibitors-induced peripheral neurotoxicity: from pathogenesis to treatment.</a> J Peripher Nerv Syst. 24 (Suppl 2), S52-S62 (2019).</li>
<li>Cavaletti, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bortezomib-induced+peripheral+neurotoxicity%3A+a+neurophysiological+and+pathological+study+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Neurol%22%5BJournal%5D)">Bortezomib-induced peripheral neurotoxicity: a neurophysiological and pathological study in the rat.</a> Exp Neurol. 204 (1), 317-325 (2007).</li>
<li>Cata, J. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+sensory+findings+in+patients+with+bortezomib-induced+pain%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pain%22%5BJournal%5D)">Quantitative sensory findings in patients with bortezomib-induced pain.</a> J Pain. 8 (4), 296-306 (2007).</li>
<li>Meng, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Peripheral+neuropathy+during+concomitant+administration+of+proteasome+inhibitors+and+factor+Xa+inhibitors%3A+identifying+the+likelihood+of+drug-drug+interactions%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Peripheral neuropathy during concomitant administration of proteasome inhibitors and factor Xa inhibitors: identifying the likelihood of drug-drug interactions.</a> Front Pharmacol. 13, 757415(2022).</li>
<li>Mina, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Post-marketing+analysis+of+peripheral+neuropathy+burden+with+new-generation+proteasome+inhibitors+using+the+FDA+adverse+event+reporting+system%5BTitle%5D)+AND+%22Turk+J+Hematol%22%5BJournal%5D)">Post-marketing analysis of peripheral neuropathy burden with new-generation proteasome inhibitors using the FDA adverse event reporting system.</a> Turk J Hematol. 38 (3), 218-221 (2021).</li>
<li>Holzer, A. -K., Suciu, I., Karreman, C., Goj, T., Leist, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Specific+attenuation+of+purinergic+signaling+during+bortezomib-induced+peripheral+neuropathy+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Specific attenuation of purinergic signaling during bortezomib-induced peripheral neuropathy in vitro.</a> Int J Mol Sci. 23 (7), 3734(2022).</li>
<li>Meng, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((a+potent+and+selective+proteasome+inhibitor%2C+exhibits+in+vivo+antiinflammatory+activity%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">a potent and selective proteasome inhibitor, exhibits in vivo antiinflammatory activity.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 96 (18), 10403-10408 (1999).</li>
<li>Maupin-Furlow, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Proteasomes+and+protein+conjugation+across+domains+of+life%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Proteasomes and protein conjugation across domains of life.</a> Nat Rev Microbiol. 10 (2), 73-82 (2012).</li>
<li>Coux, O., Tanaka, K., Goldberg, A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Structure+and+functions+of+the+20S+and+26S+proteasomes%5BTitle%5D)+AND+%22Annu+Rev+Biochem%22%5BJournal%5D)">Structure and functions of the 20S and 26S proteasomes.</a> Annu Rev Biochem. 65 (1), 801-847 (1996).</li>
<li>Groll, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Structure+of+20S+proteasome+from+yeast+at+2.4+%C3%85+resolution%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Structure of 20S proteasome from yeast at 2.4 Å resolution.</a> Nature. 386 (6624), 463-471 (1997).</li>
<li>Pines, J., Lindon, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Proteolysis%3A+anytime%2C+any+place%2C+anywhere%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Proteolysis: anytime, any place, anywhere.</a> Nat Cell Biol. 7 (8), 731-735 (2005).</li>
<li>Landeros, E. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+nociceptive+activity+of+peripheral+sensory+neurons+is+modulated+by+the+neuronal+membrane+proteasome%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Rep%22%5BJournal%5D)">The nociceptive activity of peripheral sensory neurons is modulated by the neuronal membrane proteasome.</a> Cell Rep. 43 (4), 114058(2024).</li>
<li>Qi, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+mouse+DRG+genetic+toolkit+reveals+morphological+and+physiological+diversity+of+somatosensory+neuron+subtypes%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">A mouse DRG genetic toolkit reveals morphological and physiological diversity of somatosensory neuron subtypes.</a> Cell. 187 (6), 1508-1526.e16 (2024).</li>
<li>Sharif, B., Ase, A. R., Ribeiro-da-Silva, A., Séguéla, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differential+coding+of+itch+and+pain+by+a+subpopulation+of+primary+afferent+neurons%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Differential coding of itch and pain by a subpopulation of primary afferent neurons.</a> Neuron. 106 (6), 940-951.e4 (2020).</li>
<li>Krueger, E. R., Church, T. R., Brennan, A., Türker, F., Landeros, E. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protocol+to+study+neuronal+membrane+proteasome+function+in+mouse+peripheral+sensory+neurons%5BTitle%5D)+AND+%22STAR+Protoc%22%5BJournal%5D)">Protocol to study neuronal membrane proteasome function in mouse peripheral sensory neurons.</a> STAR Protoc. 6 (1), 103552(2025).</li>
<li>Chiu, M. L., Goulet, D. R., Teplyakov, A., Gilliland, G. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antibody+structure+and+function%3A+the+basis+for+engineering+therapeutics%5BTitle%5D)+AND+%22Antibodies%22%5BJournal%5D)">Antibody structure and function: the basis for engineering therapeutics.</a> Antibodies. 8 (4), 55(2019).</li>
<li>Ramachandran, K. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Activity-dependent+degradation+of+the+nascentome+by+the+neuronal+membrane+proteasome%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Cell%22%5BJournal%5D)">Activity-dependent degradation of the nascentome by the neuronal membrane proteasome.</a> Mol Cell. 71 (1), 169-177.e6 (2018).</li>
<li>He, H. -Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuronal+membrane+proteasomes+regulate+neuronal+circuit+activity+in+vivo+and+are+required+for+learning-induced+behavioral+plasticity%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Neuronal membrane proteasomes regulate neuronal circuit activity in vivo and are required for learning-induced behavioral plasticity.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 120 (3), e2216537120(2023).</li>
<li>Paradise, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ApoE+isoforms+differentially+regulate+neuronal+membrane+proteasomes+to+shift+the+threshold+for+pathological+aggregation+of+endogenous+tau%5BTitle%5D)+AND+%22bioRxiv%22%5BJournal%5D)">ApoE isoforms differentially regulate neuronal membrane proteasomes to shift the threshold for pathological aggregation of endogenous tau.</a> bioRxiv. , (2022).</li>
<li>Banker, G., Goslin, K. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBanker%2C+G+%22Culturing+nerve+cells%22">Culturing nerve cells</a>. , 2nd edn, MIT Press. (1998).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Solução tampão HEPES 1 M, pH 7,3</td><td>Qualidade Biológica</td><td>118-089-721</td><td>Buffer FACS</td></tr><tr><td>10x PBS</td><td>Thermo Fisher Científico</td><td>70011-044</td><td>Buffer FACS</td></tr><tr><td>solução estoque de paraformaldeído (PFA) a 16%; Grau EM</td><td>EMS</td><td>15710</td><td>solução fixadora</td></tr><tr><td>1x solução salina tamponada com fosfato (PBS)</td><td>Fisher Científico</td><td>10-010-023</td><td>Lavagens FACS</td></tr><tr><td>Tubo de fundo redondo de poliestireno de 5 mL</td><td>Fisher Científico</td><td>14-959-6</td><td>Tubos FACS</td></tr><tr><td>7-Aminoactinomicina D (7-AAD)</td><td>Invitrogen</td><td>A1310</td><td>Rotula células mortas</td></tr><tr><td>Suplemento B27</td><td>Thermo Fisher Científico</td><td>17504044</td><td>meio de cultura</td></tr><tr><td>Albumina de soro bovino</td><td>MilliporeSigma</td><td>A9647; CAS: 9048-46-8</td><td>BSA/TI/DMEM</td></tr><tr><td>Cloreto de cálcio di-hidratado (CaCl?-2H? O)</td><td>MilliporeSigma</td><td>C7902</td><td>Solução salina completa</td></tr><tr><td>Cadeia pesada anti-neurofilamento de frango (NF-H)</td><td>MilliporeSigma</td><td>AB5539</td><td>anticorpo</td></tr><tr><td>DMEM/F12 1:1</td><td>Thermo Fisher Científico</td><td>11320033</td><td>meio de cultura; BSA/TI/DMEM</td></tr><tr><td>Burro anti-cabra IgG (H+L) Alexa Fluor Plus 555</td><td>Thermo Fisher Científico</td><td>Rolamento A32816</td><td>anticorpo</td></tr><tr><td>Burro anti-coelho IgG (H+L) Alexa Fluor Plus 488</td><td>Thermo Fisher Científico</td><td>Rolamento A32790</td><td>anticorpo</td></tr><tr><td>DyLight 405 burro anti-frango</td><td>Jackson ImmunoResearch</td><td>703-475-155</td><td>anticorpo</td></tr><tr><td>EDTA</td><td>MilliporeSigma</td><td>E5134; CAS: 6381-92-6</td><td>Soluções de trabalho Liberase TM / Liberase TL-papaína</td></tr><tr><td>Soro fetal bovino (FBS)</td><td>MilliporeSigma</td><td>Rolamento A9647</td><td>meio de cultura/tampão FACS/solução de bloqueio</td></tr><tr><td>Pipeta pasteur de vidro, 9 polegadas</td><td>Fisher Científico</td><td>1367820D</td><td>titulação</td></tr><tr><td>Cabra anti-PSMA2</td><td>Feito em casa</td><td>NA</td><td>anticorpo</td></tr><tr><td>HEPES em pó</td><td>MilliporeSigma</td><td>H4034</td><td>Solução salina completa</td></tr><tr><td>Hoechst</td><td>Thermo Fisher Científico</td><td>H21492</td><td>mancha nuclear</td></tr><tr><td>Soro de cavalo</td><td>Thermo Fisher Científico</td><td>26050070</td><td>solução de bloqueio</td></tr><tr><td>IB4, conjugado de biotina</td><td>MilliporeSigma</td><td>L2140</td><td>anticorpo</td></tr><tr><td>Laminina</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>L2020-1MG</td><td>prato de cultura</td></tr><tr><td>L-glutamina</td><td>Thermo Fisher Científico</td><td>25030081</td><td>meio de cultura</td></tr><tr><td>Trituração da liberase baixa (TL)</td><td>MilliporeSigma</td><td>54010200001</td><td>Solução-mãe Liberase TL</td></tr><tr><td>Trituração da liberase moderada (MT)</td><td>MilliporeSigma</td><td>5401119001</td><td>Solução de estoque Liberase TM</td></tr><tr><td>Cloreto de magnésio hexahidratado (MgCl?-6H? O)</td><td>MilliporeSigma</td><td>M2393</td><td>Solução salina completa</td></tr><tr><td>Mídia de montagem</td><td>Biotecnologia do Sul</td><td>0100-01</td><td>Fluoromount-G</td></tr><tr><td>Papaína</td><td>Worthington</td><td>Gato #: 9001-73-4</td><td>Solução de trabalho Liberase TL-papaína</td></tr><tr><td>Penicilina/estreptomicina</td><td>MilliporeSigma</td><td>15140122</td><td>meio de cultura/tampão FACS</td></tr><tr><td>Bromidrato de poli-L-lisina (PLL)</td><td>MilliporeSigma</td><td>Pág. 4707</td><td>prato de cultura</td></tr><tr><td>Cloreto de potássio (KCl)</td><td>MilliporeSigma</td><td>Pág. 5405</td><td>Solução salina completa</td></tr><tr><td>Coelho anti-CGRP</td><td>Imunoestrela</td><td>24112</td><td>anticorpo</td></tr><tr><td>cloreto de sódio (NaCl)</td><td>MilliporeSigma</td><td>S9888; CAS: 7647-14-5</td><td>Solução salina completa</td></tr><tr><td>Sorbitol</td><td>MilliporeSigma</td><td>56755-M</td><td>Solução salina completa</td></tr><tr><td>Conjugado estreptavidina Alexa Fluor 647</td><td>Thermo Fisher Científico</td><td>S21374</td><td>anticorpo</td></tr><tr><td>Sacarose</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S0389-500G</td><td>solução fixadora</td></tr><tr><td>Inibidor de tripsina</td><td>MilliporeSigma</td><td>T9253; CAS: 9035-91-8</td><td>BSA/TI/DMEM</td></tr></tbody></table>

análise específica do subtipo celular do proteassoma da membrana neuronal em neurônios somatossensoriais

Cell Subtype-specific Analysis of Neuronal Membrane Proteasome in Somatosensory Neurons

A capacidade de distinguir entre o NMP e os proteassomas intracelulares depende de abordagens de marcação impermeáveis à membrana. A alimentação de anticorpos permite o uso de anticorpos específicos da subunidade do proteassoma em neurônios vivos para rotular proteassomas acessíveis apenas do lado de fora da célula. Devido ao seu tamanho e hidrofilicidade, os anticorpos são incapazes de atravessar as membranas celulares intactas24. Os neurônios vivos mantêm a integ...

Análise específica do subtipo celular do proteassoma da membrana neuronal em neurônios somatossensoriais

Sensory neuron signaling depends on functional proteasomes, and their subcellular localization influences function. A specialized proteasome complex, the ...

cell-subtype-specific-analysis-neuronal-membrane-proteasome

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Neurociência

Um método para preparar traducionalmente ativa, synaptoneurosomes intacta (SNs) de córtex cerebral de rato é descrito. O método utiliza um gradiente de densidade descontínua Percoll-sacarose permitindo a preparação rápida de ativos SNs.

Preparação de Synaptoneurosomes de rato Cortex usando um gradiente de densidade Percoll descontínuo Sacarose-

Descreve-se um método para marcar a proteína na superfície de neurónios vivos utilizando um anticorpo policlonal específico para epitopos extracelulares. A proteína ligada pelo anticorpo na superfície da célula e subsequentemente internalizados através de endocitose podem ser distinguidas a partir de proteína restante na, ou vendidas para, a superfície durante a incubação.

Rotulagem diferencial de superfície celular e internalizado Proteínas após Anticorpo Alimentação da Vivo Cultivadas neurônios

Este artigo fornece detalhes sobre o enriquecimento de proteínas associadas com a membrana de plasma sináptico por ultracentrifugação num gradiente de sacarose descontínuo. A elaboração definitiva de proteínas de densidade pós-sináptica é também descrito. Preparações de proteínas são adequados para western blot ou análise 2D DIGE.

Preparação do Synaptic Plasma Membrane e Proteínas de densidade pós-sinápticos Usando um gradiente de sacarose descontínuo

Técnicas de microscopia de luz acopladas a ensaios bioquímicos elucidam o envolvimento da exocitose mediada por SNARE na ramificação do axônio dependente de netrina. Essa combinação de técnicas permite a identificação de mecanismos moleculares que controlam a ramificação do axônio e a mudança da forma celular.

Utilizando metodologias combinadas para definir o papel do Plasma Membrane entrega durante Axon Ramificação e Neuronal morfogênese

Aqui, apresentamos um protocolo de fracionamento de membrana cerebral que representa um procedimento robusto para isolar proteínas pertencentes a diferentes compartimentos sinápticos.

Fracionamento de Membranas Cerebrais: Um<em&gt; Ex Vivo</em&gt; Abordagem para Avaliar a Localização de Proteínas Subinápticas

Este protocolo descreve os passos críticos e as precauções necessárias para executar a única célula multiplex transcrição reversa reação em cadeia da polimerase após remendo-braçadeira. Esta técnica é um método simples e eficaz para analisar o perfil de expressão de um conjunto predeterminado de genes de uma única célula caracterizada por gravações de remendo-braçadeira.

Única célula transcrição reversa Multiplex cadeia da polimerase após Patch-clamp

Este protocolo é projetado para quantificar eficientemente a atividade do sistema de ubiquitina-proteasome (UPS) em diferentes compartimentos celulares do cérebro de roedores. Os usuários podem examinar o funcionamento da UPS em frações nucleares, citoplasmáticas e sinápticas no mesmo animal, reduzindo a quantidade de tempo e o número de animais necessários para realizar essas análises complexas.

Quantificando a ubiquitina subcelular-atividade de proteasome no cérebro de roedores

A dissecção crio-seção permite a preparação fresca e congelada do maior nicho neurogênico do cérebro murino para análise profunda de proteome quantitativo. O método é preciso, eficiente e causa perturbação mínima do tecido. Portanto, é ideal para estudar o microambiente molecular desse nicho, bem como outros órgãos, regiões e espécies.

Dissecção crio-seção da zona subependímal adulta para análise proteome quantitativa precisa e profunda

Um protocolo proteômico de marcação de proximidade de lisossomos neuronais é descrito aqui para caracterizar o microambiente lisossômico dinâmico em neurônios derivados de células-tronco pluripotentes induzidas por humanos. Proteínas de membrana lisossômica e proteínas que interagem com lisossomos (estável ou transitoriamente) podem ser quantificadas com precisão neste método com excelente resolução espacial intracelular em neurônios humanos vivos.

Caracterização do Interactome do Lisossomo Neuronal com Proteômica de Marcação de Proximidade

Este protocolo apresenta um método robusto e detalhado para obter sinaptossomos, vesículas sinápticas e outras frações sinápticas altamente puras do cérebro de camundongos. Este método permite a avaliação de processos sinápticos, incluindo a análise bioquímica da localização e função de proteínas com resolução compartimental.

Fracionamento subcelular para o isolamento de componentes sinápticos do cérebro murino

Aprenda a analisar o proteassoma da membrana neuronal em neurônios somatossensoriais usando triagem celular e imunofluorescência. Este método permite estudar a função do NMP na modulação do tato, coceira e dor.

Análise específica do subtipo celular do proteassoma da membrana neuronal em neurônios somatossensoriais

Explorar mais vídeos