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DOI: 10.3791/69079-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This study investigates the separation of mouse lens epithelial cells and fiber cells to analyze their distinct transcriptomes. By employing a novel protocol for RNA isolation, the research reveals significant differences in gene expression between the two lens cell types, shedding light on their unique biological processes.
Este protocolo detalha a separação do epitélio da lente ocular do camundongo e da massa em massa da célula da fibra, seguida pelo isolamento de RNA e análise de qPCR. Este método permite separar os compartimentos das células do cristalino para uma análise mais detalhada do transcriptoma e dos processos biológicos em células epiteliais versus células de fibra diferenciadas.
Nossa pesquisa se concentra no cristalino, um tecido transparente especializado na câmara anterior do olho. O cristalino é composto por dois tipos de células, células epiteliais e células fibrosas que possuem funções diferentes e transcriptomas diversos. Existem dificuldades em extrair uma concentração suficiente de RNA das células epiteliais na monocamada do cristalino, o que tem impedido o estudo de transcriptomas em células epiteliais versus células fibrosas.
A capacidade de separar de forma limpa os principais tipos de células da lente permite uma investigação mais profunda da manutenção e desregulação da lente. Isso permite a caracterização de interrupções específicas do tipo de célula que levam a patologias do cristalino relacionadas à idade. Para começar, microdisecte a lente dos olhos recém-enucleados de um camundongo sacrificado.
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