Name: Métodos dinâmicos de grampo para investigar a excitabilidade neuronal prejudicada associada ao autismo (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-10-17T14:20:00.000+00:00
Duration: 8 min 44 s
Description: Aprenda técnicas de grampo dinâmico para investigar déficits de disparo neuronal em neurônios de Purkinje cerebelares de camundongo. Este método permite resgatar a excitabilidade prejudicada em modelos mutantes Tsc1 -/-.

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<table><tbody><tr><td>CaCl2</td><td>Fisher Chemical</td><td>C79-500&nbsp;</td><td>Reagente</td></tr><tr><td>Tubo de vidro capilar boroscilicata, parede padrão de 1,5 mm DI, 0,86 mm de comprimento 10 cm</td><td>Warner Instruments</td><td>64-0793</td><td>Equipamento</td></tr><tr><td>CleanBench</td><td>TMC</td><td>63-9090E</td><td>Equipamento</td></tr><tr><td>Compresstome VF-500-Z vibratome&nbsp;</td><td>Instrumentos Precissionários</td><td>https://precisionary.com/product-category/compresstome-parts/parts-by-model/vf-500-0z/</td><td>Equipamento</td></tr><tr><td>Dell OptiPlex 7080</td><td>Vale</td><td>https://www.dell.com/en-us/shop/desktop-computers/optiplex-7080-tower-and-small-form-factor/spd/optiplex-7080-desktop/s005o7080sffus</td><td>Equipamento</td></tr><tr><td>Dextrose</td><td>Fisher Chemical</td><td>D16-500&nbsp;</td><td>Reagente</td></tr><tr><td>Sistema amplificador dPatch</td><td>Instrumento Sutter</td><td>FG-PATCH</td><td>Equipamento</td></tr><tr><td>EGTA</td><td>EMD Millipore</td><td>324626-25GM</td><td>Reagente</td></tr><tr><td>HEPES</td><td>Fisher Chemical</td><td>7365-45-9</td><td>Reagente</td></tr><tr><td>Aquecedor em linha</td><td>Warner Instruments</td><td>64-0102</td><td>Equipamento</td></tr><tr><td>Kcl</td><td>Fisher Chemical</td><td>P330-500&nbsp;</td><td>Reagente</td></tr><tr><td>Ketamina</td><td>Produtos Veterinários Dechra</td><td>193.40620.3&nbsp;</td><td>Reagente</td></tr><tr><td>K-gluconato</td><td>TCI Chemicals</td><td>G0040</td><td>Reagente</td></tr><tr><td>Software LinLab</td><td>Scientifica</td><td>https://www.scientifica.uk.com/products/scientifica-linlab-2</td><td>Equipamento</td></tr><tr><td>Banho-maria LSE 6L</td><td>Corning</td><td>6783</td><td>Equipamento</td></tr><tr><td>Mg-ATP</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>74804-12-9</td><td>Reagente</td></tr><tr><td>MgCl2</td><td>Fisher Chemical</td><td>012288.A9</td><td>Reagente</td></tr><tr><td>Puxador de pipetas modelo P-1000</td><td>Instrumento Sutter</td><td>FG-P1000</td><td>Equipamento</td></tr><tr><td>NaCl</td><td>Fisher Chemical</td><td>S271-500&nbsp;</td><td>Reagente</td></tr><tr><td>Na-GTP</td><td>MP Biomédicos</td><td>56001-37-7</td><td>Reagente</td></tr><tr><td>NaH2PO4</td><td>J.T. Baker</td><td>02-004-220&nbsp;</td><td>Reagente</td></tr><tr><td>NaHCO3</td><td>Fisher Chemical</td><td>S233-500&nbsp;</td><td>Reagente</td></tr><tr><td>Software ocular</td><td>Digital Optics Limited</td><td>https://www.scientifica.uk.com/products/qimaging-ocular-software</td><td>Equipamento</td></tr><tr><td>Lâmina</td><td>Personna</td><td>60-0139-CTN</td><td>Equipamento</td></tr><tr><td>Harpa de corte</td><td>Warner Instruments</td><td>64-0255</td><td>Equipamento</td></tr><tr><td>SliceScope Pro 3000</td><td>Scientifica</td><td>https://www.scientifica.uk.com/products/slicescope-pro-3000</td><td>Equipamento</td></tr><tr><td>Supercola</td><td>Loctite</td><td>8040-00-142-9193</td><td>Equipamento</td></tr><tr><td>Software SutterPatch</td><td>Instrumento Sutter</td><td>https://www.sutter.com/amplifiers/sutterpatch</td><td>Equipamento</td></tr><tr><td>Controlador de temperatura</td><td>Warner Instruments</td><td>64-2400</td><td>Equipamento</td></tr><tr><td>Xilazina</td><td>MP Biomédicos</td><td>158307</td><td>Reagente</td></tr></tbody></table>

métodos dinâmicos de grampo para investigar a excitabilidade neuronal prejudicada associada ao autismo

Dynamic Clamp Methods to Investigate Impaired Neuronal Excitability Associated with Autism

Métodos dinâmicos de grampo para investigar a excitabilidade neuronal prejudicada associada ao autismo

Autism spectrum disorder (ASD) arises from a wide range of genetic and environmental factors. While numerous ASD-linked mutations disrupt synapse ...

dynamic-clamp-methods-to-investigate-impaired-neuronal-excitability

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Neurociência

Neste vídeo, demonstramos como aplicar uma condutância em um neurônio dopaminérgico gravada na configuração da célula inteira em fatias de cérebro de rato. Esta técnica é chamada a braçadeira dinâmico.

Aplicação de uma condutância do receptor NMDA em neurônios dopaminérgicos Rat Midbrain Usando a Técnica Clamp dinâmico

A preparação de fatias cerebrais agudas de isolado hipocampo, assim como as gravações simultâneas electrofisiológicas de astrócitos e neurónios...

Dois registros eletrofisiológicos de sinapticamente evocadas Respostas astroglial e neuronal em fatias hipocampais agudas

O vídeo demonstra a análise eletrofisiológica de neurônios derivados de células-tronco embrionárias após exposição a neurotoxinas. O tratamento desses neurônios com neurotoxinas botulínicas reduz a frequência de correntes pós-sinápticas excitatórias espontâneas em miniatura, confirmando a inibição da transmissão sináptica.

Uma técnica para avaliar o efeito inibitório da exposição a toxinas em correntes pós-sinápticas excitatórias em miniatura (mEPSCs)

Este artigo vídeo ilustra os set-up, os procedimentos para consertar os corpos celulares e como implementar as gravações braçadeira dinâmicas a partir de células ganglionares em todo o monte do mouse retina. Esta técnica permite a investigação da contribuição precisa de inputs sinápticos excitatórios e inibitórios, e sua magnitude relativa e tempo para spiking neuronal.

Implementação da braçadeira dinâmico com Condutâncias Synaptic e Artificial em células ganglionares da retina do rato

Multi-eletrodo gravações de patch-clamp constitui uma tarefa complexa. Aqui nós mostramos como, através da automatização de muitas das etapas experimentais, é possível acelerar o processo conducente à melhoria qualitativa no desempenho e número de gravações.

A Multi-eletrodo Sistema patch-clamp assistida por computador

Os protocolos de circuito fechado estão se tornando cada vez mais difundidos na eletrofisiologia moderna. Apresentamos uma maneira simples, versátil e barata de realizar protocolos eletrofisiológicos complexos em neurônios piramidais corticais in vitro, usando um computador desktop e uma placa de aquisição digital.

Eletrofisiologia em tempo real: Usando protocolos de circuito fechado para sondar Neuronal Dynamics and Beyond

Um protocolo personalizado é descrito para diferenciar células ES de camundongos em populações definidas de neurônios altamente puros exibindo sinapses funcionais e comportamento de rede emergente. A análise eletrofisiológica demonstra a perda da transmissão sináptica após a exposição aos sorotipos de neurotoxina botulínica / A- / G e neurotoxina tetânica.

Avaliação Funcional de neurotoxinas Biológica em Culturas em Rede de Células-Tronco derivadas do Sistema Nervoso Central Neurônios

Este protocolo descreve passos processuais básicas para a realização de célula inteira gravações de patch-clamp. Esta técnica permite o estudo do comportamento eléctrico de neurónios, e quando realizados em fatias do cérebro, permite a avaliação de várias funções neuronais a partir de neurónios que ainda estão integrados nos circuitos do cérebro relativamente bem conservadas.

Gravações de células inteiras de patch-clamp em Brain Slices

A técnica de braçadeira do remendo de fatia é um método eficaz para a análise de aprendizagem induzido por alterações nas propriedades intrínsecas e plasticidade de sinapses excitatórias ou inibitórias.

Fatia Patch Clamp técnica para análise de plasticidade induzida pela aprendizagem

O protocolo descrito neste artigo usa o músculo levator auris longus (LAL) de rato para gravar espontânea e nervo-evocou potenciais pós-sinápticos (corrente-braçadeira) e correntes (tensão-braçadeira) na junção neuromuscular. Uso desta técnica pode fornecer insights-chave nos mecanismos de transmissão sináptica sob condições normais e doença.

Músculo levantador Auris Longus Preparação para exame da transmissão Neuromuscular mamíferos sob condições de grampo de tensão

Aprenda técnicas de grampo dinâmico para investigar déficits de disparo neuronal em neurônios de Purkinje cerebelares de camundongo. Este método permite resgatar a excitabilidade prejudicada em modelos mutantes Tsc1 -/-.

Métodos dinâmicos de grampo para investigar a excitabilidade neuronal prejudicada associada ao autismo

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