Name: Ensaio de Perfil de Trombo: Uma Plataforma Baseada em Microfluídica para Caracterização Abrangente da Trombogênese Biomecânica (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-01-09T12:40:00.000+00:00
Duration: 8 min 50 s
Description: Aprenda a caracterizar a trombogênese biomecânica usando um ensaio de perfil de trombo baseado em microfluídica com imagem por fluorescência multicolorida. Este método permite avaliar tendências pró-trombóticas em amostras de sangue humano.

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<ol><li>Lindstrom, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Global+burden+of+cardiovascular+diseases+and+risks+collaboration%2C+1990-2021%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Coll+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Global burden of cardiovascular diseases and risks collaboration, 1990-2021.</a> J Am Coll Cardiol. 80 (25), 2372-2425 (2022).</li>
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<li>Colace, T. V., Diamond, S. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Direct+observation+of+von+Willebrand+factor+elongation+and+fiber+formation+on+collagen+during+acute+whole+blood+exposure+to+pathological+flow%5BTitle%5D)+AND+%22Arterioscler+Thromb+Vasc+Biol%22%5BJournal%5D)">Direct observation of von Willebrand factor elongation and fiber formation on collagen during acute whole blood exposure to pathological flow.</a> Arterioscler Thromb Vasc Biol. 33 (1), 105-113 (2013).</li>
<li>Westein, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Atherosclerotic+geometries+exacerbate+pathological+thrombus+formation+poststenosis+in+a+von+Willebrand+factor-dependent+manner%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+USA%22%5BJournal%5D)">Atherosclerotic geometries exacerbate pathological thrombus formation poststenosis in a von Willebrand factor-dependent manner.</a> Proc Natl Acad Sci USA. 110 (4), 1357-1362 (2013).</li>
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<li>Kim, D. A., Ku, D. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Structure+of+shear-induced+platelet+aggregated+clot+formed+in+an+in+vitro+arterial+thrombosis+model%5BTitle%5D)+AND+%22Blood+Adv%22%5BJournal%5D)">Structure of shear-induced platelet aggregated clot formed in an in vitro arterial thrombosis model.</a> Blood Adv. 6 (9), 2872-2883 (2022).</li>
<li>Receveur, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Shear+rate+gradients+promote+a+bi-phasic+thrombus+formation+on+weak+adhesive+proteins%2C+such+as+fibrinogen%2C+in+a+vwf-dependent+manner%5BTitle%5D)+AND+%22Haematologica%22%5BJournal%5D)">Shear rate gradients promote a bi-phasic thrombus formation on weak adhesive proteins, such as fibrinogen, in a vwf-dependent manner.</a> Haematologica. 105 (10), 2471-2483 (2020).</li>
<li>Din, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multi-parametric+thrombus+profiling+microfluidics+detects+intensified+biomechanical+thrombogenesis+associated+with+hypertension+and+aging%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Multi-parametric thrombus profiling microfluidics detects intensified biomechanical thrombogenesis associated with hypertension and aging.</a> Nat Commun. 15, 9067(2024).</li>
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<li>Mahalingam, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Numerical+analysis+of+the+effect+of+turbulence+transition+on+the+hemodynamic+parameters+in+human+coronary+arteries%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovasc+Diagn+Ther%22%5BJournal%5D)">Numerical analysis of the effect of turbulence transition on the hemodynamic parameters in human coronary arteries.</a> Cardiovasc Diagn Ther. 6 (3), 208-220 (2016).</li>
<li>Thomson, E. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gigapixel+imaging+with+a+novel+multi-camera+array+microscope%5BTitle%5D)+AND+%22Elife%22%5BJournal%5D)">Gigapixel imaging with a novel multi-camera array microscope.</a> Elife. 11, e74988(2022).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Seringas de 10 mL</td><td>Henke Sass Wolf</td><td>5100-X00V0</td><td>Coleta de amostras de sangue</td></tr><tr><td>Tubos Falcon de 15 mL</td><td>Genesee Scientific</td><td>28-101</td><td>Armazenamento de amostras de sangue</td></tr><tr><td>Seringa de vidro estanque de 1 mL</td><td>Hamilton</td><td>81331</td><td>Montagem de hardware</td></tr><tr><td>2.2.9</td><td>MERU VasImmune</td><td></td><td>Coloração por trombo</td></tr><tr><td>Agulhas de sonda 20 X1/2</td><td>McMaster-Carr</td><td>M919</td><td>Fabricando dispositivos PDMS</td></tr><tr><td>Seringas de 20 mL</td><td>Henke Sass Wolf</td><td>5200-X00V0</td><td>Coleta de amostras de sangue</td></tr><tr><td>70% etanol</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>EX0281-1</td><td>Desinfecção de seringas herméticas e limpeza de lâminas de vidro</td></tr><tr><td>AK4-Alexa Fluor 647</td><td>BioLegend</td><td>304918</td><td>Coloração por trombo</td></tr><tr><td>Alexa Fluor 405 NHS Ester</td><td>Invitrogen</td><td>A30000</td><td>Marcagem de fibrinogênio</td></tr><tr><td>Kit de marcação de anticorpos Alexa fluor 555</td><td>Invitrogen</td><td>A88065</td><td>Rotulagem MBC 370.2 e 2.2.9</td></tr><tr><td>Anexin V-Pacific Blue</td><td>Invitrogen</td><td>501121505</td><td>Coloração por trombo</td></tr><tr><td>Espanador de Limpeza</td><td>Depósito de Escritórios</td><td>911245</td><td>Fabricando dispositivos PDMS</td></tr><tr><td>Conjunto de facas de hobby para artesanato com caixa de madeira</td><td>Excel Blades</td><td>44282</td><td>Fabricando dispositivos PDMS</td></tr><tr><td>Água desionizada &nbsp;</td><td>ThermoFisher Scientific&nbsp;</td><td>751-628</td><td>Lavagem de seringas gasíferas</td></tr><tr><td>Dessecador</td><td>Bel Art</td><td>F420270000</td><td>Desgasificação de PDMS</td></tr><tr><td>Espátula de Laboratório Multipropósito Descartável</td><td>LevGo</td><td>17211</td><td>Misturando a base de elastomer de silicone e o agente de cura &nbsp;</td></tr><tr><td>Coluna de Spin para Remoção de Corantes e Biotina</td><td>Zeba</td><td>A44296S</td><td>Marcagem de fibrinogênio</td></tr><tr><td>Fibrinogênio</td><td>Pesquisa Inovadora</td><td>IHUFBG25MG</td><td>Coloração por trombo</td></tr><tr><td>Bomba de seringa Fusion 200-X</td><td>Chemyx Inc.</td><td>0720X</td><td>Montagem de hardware</td></tr><tr><td>Heparina & nbsp;</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>H3149</td><td>Anticoagulação por amostra de sangue</td></tr><tr><td>Gerador de Alta Frequência</td><td>Electro-technic product Inc.</td><td>BD-20</td><td>Fabricando dispositivos PDMS</td></tr><tr><td>Monômero VWF humano</td><td>Sino Biological Inc.</td><td>10973-H08C</td><td>Revestimento de dispositivos microfuídicos</td></tr><tr><td>Software Image J v1.53</td><td>Fiji, Instituto Nacional de Saúde</td><td></td><td>Análise de dados</td></tr><tr><td>Microscópio invertido</td><td>Leica</td><td>DM IL LIDEROU; cubo de filtro: Leica DFT51010; Farol: LED5</td><td>Montagem de hardware</td></tr><tr><td>Kimwipes</td><td>Kimberly-Clark Profissional</td><td>34120</td><td>Limpeza de lâminas de vidro</td></tr><tr><td>Tampas Luer lock</td><td>International Medical Industries, Inc.</td><td>57100B</td><td>Coleta de amostras de sangue</td></tr><tr><td>MBC 370.2</td><td>Kerafast</td><td>EBW104</td><td>Coloração por trombo</td></tr><tr><td>Óculos de cobertura de microscópio</td><td>Paul Marienfeld GmbH & Co. KG</td><td>ES0107222</td><td>Fabricando dispositivos PDMS</td></tr><tr><td>Raspador de Mini-Lâmina de Barbear</td><td>Stanley</td><td>28-100</td><td>Fabricando dispositivos PDMS</td></tr><tr><td>Espectrofotômetro UV-Vis NanoDrop 2000</td><td>Termo Científica</td><td>ND-2000</td><td>Medição da concentração de proteínas e da razão F/P</td></tr><tr><td>Forno</td><td>Instrumentos de Linha de Laboratório</td><td>3512</td><td>Fabricando dispositivos PDMS</td></tr><tr><td>PAC-1-Alexa Fluor 647</td><td>BioLegend</td><td>362806</td><td>Coloração por trombo</td></tr><tr><td>Copo plástico</td><td>ThermoFisher Scientific&nbsp;</td><td>S04589</td><td>Misturando a base de elastomer de silicone e o agente de cura &nbsp;</td></tr><tr><td>Mestre de fotorresiste SU-8 &nbsp; Mofo</td><td>Instalação de Sala Limpa de Nano3 Nanofabricação da UC San Diego</td><td></td><td>Fabricando dispositivos PDMS</td></tr><tr><td>Sylgard 184 Silicone Elastomer Kit</td><td>Krayden Dow</td><td>DC4019862</td><td>PDMS</td></tr><tr><td>SZ22-FITC&nbsp;</td><td>Beckman Coulter</td><td>IM 1756U</td><td>Coloração por trombo</td></tr><tr><td>Tubulação</td><td>Cole - Palmer Instrument Co.</td><td>06422-01</td><td>Montagem de hardware</td></tr></tbody></table>

ensaio de perfil de trombo: uma plataforma baseada em microfluídica para caracterização abrangente da trombogênese biomecânica

Thrombus Profiling Assay: A Microfluidics-Based Platform for Comprehensively Characterizing Biomechanical Thrombogenesis

Ensaio de Perfil de Trombo: Uma Plataforma Baseada em Microfluídica para Caracterização Abrangente da Trombogênese Biomecânica

Thrombosis is a pathological condition describing the abnormal accumulation of platelets and clotting factors in a blood vessel. While many works focused ...

thrombus-profiling-assay-microfluidics-based-platform-for

Research

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Bioengineering

Bioengenharia

Este estudo descreve um ensaio que mede a microplaca novel FV actividade de coagulação, durante a formação de coágulos de fibrina no plasma humano, que não havia sido descrita anteriormente. O método utiliza um leitor de microplacas cinético para medir continuamente a variação da absorvância a 405 nm durante a formação de coágulos de fibrina no plasma humano.

Medição da actividade de factor V no plasma humano, utilizando um ensaio de coagulação de Microplacas

A transfusão de plaquetas e hemostasia foi modelada usando reconstituição sanguínea e câmaras de fluxo microfluídico para investigar a função dos bancos de plaquetas de sangue. Os dados demonstram as consequências da lesão de armazenamento plaquetário na hemostasia, in vitro.

Microfluídico Fluxo Chambers utilizando sangue reconstituído ao Modelo Hemostasia e transfusão de plaquetas<em&gt; In Vitro</em

Este trabalho descreve um modelo experimental de hemostasia que mede simultaneamente a função plaquetária e coagulação. Plaquetas e fibrina de fluorescência é medida em tempo real, e taxa de adesão de plaquetas, taxa de coagulação, e o início da coagulação são determinados. O modelo é usado para determinar as propriedades pró-coagulantes de plaquetas sob fluxo em concentrados para transfusão.

Um Modelo de Câmara Microfluidic Fluxo de transfusão de plaquetas e Hemostasia Medidas deposição de plaquetas e formação de fibrina em tempo real

Apresentamos um modelo de doença vascular in vitro para investigar interações sanguíneas inteiras com o endotélio derivado do paciente. Este sistema permite o estudo de propriedades trombogênicas das células endoteliais primárias em várias circunstâncias. O método é especialmente adequado para avaliar em trombogenicidade situ e terapia anticoagulação durante diferentes fases de coagulação.

Modelo de doença microfluida in vitro para estudar interações endoteliais de sangue inteiro e dinâmica do coágulo sanguíneo em tempo real

A fibrina é responsável pela formação de coágulos durante a hemostasia e trombose. Ensaios de turbidez e tromboelastograhy (TEG) podem ser utilizados como ferramentas sinérgicas que fornecem avaliação complementar de um coágulo. Essas duas técnicas juntas podem dar mais informações sobre como as condições de coagulação afetam a formação de coágulos fibrinas.

Alavancando a Turbidez e a Tromboelastografia para Caracterização Complementar do Coágulo

Os ensaios de trombólise in vitro muitas vezes têm lutado para replicar as condições in vivo, seja no trombo modelo que está sendo digerido ou no ambiente em que a trombólise está ocorrendo. Aqui, exploramos como o acoplamento do loop de Chandler e do ensaio de fibrinólise de fluxo fluorométrico em tempo real (RT-FluFF) é usado para monitoramento de lise de coágulo de alta fidelidade, ex-vivo.

Rastreamento da fibrinólise de coágulos sanguíneos totais formados por alça de Chandler sob fluxo de cisalhamento em um modelo de trombólise in vitro

A função plaquetária sob fluxo pode ser avaliada e a ressuscitação hemostática simulada pode ser modelada usando um dispositivo microfluídico, que tem aplicações em trauma e medicina transfusional.

Microfluídica na avaliação da função plaquetária

Este protocolo descreve o Ensaio de Hemostase de Nijmegen, que permite a medição simultânea e resolvida no tempo da geração de trombina e plasmina para fornecer uma avaliação integrada da coagulação e fibrinólise. O ensaio visa melhorar a caracterização do equilíbrio hemostático em ambientes de pesquisa e clínicos além do escopo dos testes hemostáticos convencionais.

O ensaio de hemostase de Nijmegen: Medição Simultânea de Geração de Trombina e Plasmina em um Único Poço

É descrito um método para a preparação de uma matriz de 3-dimensional constituído por colagénio do tipo I e fibroblastos humanos primários. Este gel organotípica serve como um substrato útil para avaliar a migração celular invasiva porque imita características básicas de estroma de tecido e é susceptível de muitas formas de microscopia.

Organotípica Colágeno Ensaio I: Uma Plataforma maleável para Avaliar Comportamento celular em um contexto de 3-Dimensional

Este artigo descreve um método versátil para criar anéis de células derivadas do tecido celular por auto-montagem. Células musculares lisas semeadas em forma de anel-agarose agregado poços e contrato de forma robusta em três dimensões (3D) tecidos dentro de 7 dias. Anéis milímetro escala de tecido são conducentes a testes mecânicos e servem como blocos de construção para a montagem dos tecidos.

Dirigido Cellular Automontagem para Fabricar Anéis Cell-Derived Tecido para Análise Biomecânica e Engenharia de Tecidos

Aprenda a caracterizar a trombogênese biomecânica usando um ensaio de perfil de trombo baseado em microfluídica com imagem por fluorescência multicolorida. Este método permite avaliar tendências pró-trombóticas em amostras de sangue humano.

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