Name: Transplante Intramuscular de Células Endócrinas Pancreáticas Derivadas de Células-Tronco Humanas Pluripotentes em Camundongos (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-04-10T12:40:00.000+00:00
Duration: 6 min 57 s
Description: Aprenda o transplante intramuscular de ilhotas pancreáticas derivadas de células-tronco pluripotentes humanas em camundongos imunodeficientes. Este método minimamente invasivo permite avaliar a função das ilhotas in vivo e recuperar os enxertos para análise histológica detalhada.

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<ol><li>Ong, K. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((regional%2C+and+national+burden+of+diabetes+from+1990+to+2021%2C+with+projections+of+prevalence+to+2050%3A+A+systematic+analysis+for+the+Global+Burden+of+Disease+Study+2021%5BTitle%5D)+AND+%22The+Lancet%22%5BJournal%5D)">regional, and national burden of diabetes from 1990 to 2021, with projections of prevalence to 2050: A systematic analysis for the Global Burden of Disease Study 2021.</a> The Lancet. 402 (10397), 203-234 (2021).</li>
<li>Ismail, L., Materwala, H., Al Kaabi, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Association+of+risk+factors+with+type+2+diabetes%3A+A+systematic+review%5BTitle%5D)+AND+%22Comput+Struct+Biotechnol+J%22%5BJournal%5D)">Association of risk factors with type 2 diabetes: A systematic review.</a> Comput Struct Biotechnol J. 19, 1759-1785 (2021).</li>
<li>Prasad, M. K., Mohandas, S., Ramkumar, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dysfunctions%2C+molecular+mechanisms%2C+and+therapeutic+strategies+of+pancreatic+%CE%B2-cells+in+diabetes%5BTitle%5D)+AND+%22Apoptosis%22%5BJournal%5D)">Dysfunctions, molecular mechanisms, and therapeutic strategies of pancreatic β-cells in diabetes.</a> Apoptosis. 28 (7-8), 958-976 (2023).</li>
<li>Xue, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional+interrogation+of+twenty+type+2+diabetes-associated+genes+using+isogenic+human+embryonic+stem+cell-derived+%CE%B2-like+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Metab%22%5BJournal%5D)">Functional interrogation of twenty type 2 diabetes-associated genes using isogenic human embryonic stem cell-derived β-like cells.</a> Cell Metab. 35 (11), 1897-1914.e11 (2023).</li>
<li>Bartolomé, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stem+cell-derived+%CE%B2+cells%3A+A+versatile+research+platform+to+interrogate+the+genetic+basis+of+%CE%B2+cell+dysfunction%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Stem cell-derived β cells: A versatile research platform to interrogate the genetic basis of β cell dysfunction.</a> Int J Mol Sci. 23 (1), 501(2022).</li>
<li>Balboa, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional%2C+metabolic+and+transcriptional+maturation+of+human+pancreatic+islets+derived+from+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Functional, metabolic and transcriptional maturation of human pancreatic islets derived from stem cells.</a> Nat Biotechnol. 40 (7), 1042-1055 (2022).</li>
<li>Barsby, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differentiating+functional+human+islet-like+aggregates+from+pluripotent+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22STAR+Protoc%22%5BJournal%5D)">Differentiating functional human islet-like aggregates from pluripotent stem cells.</a> STAR Protoc. 3 (4), 101711(2022).</li>
<li>Shi, Z. -D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genome+editing+in+hPSCs+reveals+GATA6+haploinsufficiency+and+a+genetic+interaction+with+GATA4+in+human+pancreatic+development%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Stem+Cell%22%5BJournal%5D)">Genome editing in hPSCs reveals GATA6 haploinsufficiency and a genetic interaction with GATA4 in human pancreatic development.</a> Cell Stem Cell. 20 (5), 675-688.e6 (2017).</li>
<li>Fantuzzi, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+depth+functional+characterization+of+human+induced+pluripotent+stem+cell-derived+beta+cells+in+vitro+and+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Cell+Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">In depth functional characterization of human induced pluripotent stem cell-derived beta cells in vitro and in vivo.</a> Front Cell Dev Biol. 10, e967765(2022).</li>
<li>Augsornworawat, P., Maxwell, K. G., Velazco-Cruz, L., Millman, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single-cell+transcriptome+profiling+reveals+%CE%B2+cell+maturation+in+stem+cell-derived+islets+after+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Rep%22%5BJournal%5D)">Single-cell transcriptome profiling reveals β cell maturation in stem cell-derived islets after transplantation.</a> Cell Rep. 32 (8), 108850(2020).</li>
<li>Lin, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glucose+metabolism+and+regulation+in+establishing+human+stem+cell-derived+%CE%B2+cell+maturation%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Rep%22%5BJournal%5D)">Glucose metabolism and regulation in establishing human stem cell-derived β cell maturation.</a> Cell Rep. 44 (7), 115892(2025).</li>
<li>Maxwell, K. G., Kim, M. H., Gale, S. E., Millman, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differential+function+and+maturation+of+human+stem+cell-derived+islets+after+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells+Transl+Med%22%5BJournal%5D)">Differential function and maturation of human stem cell-derived islets after transplantation.</a> Stem Cells Transl Med. 11 (3), 322-331 (2022).</li>
<li>Thévenet, J., Gmyr, V., Delalleau, N., Pattou, F., Kerr-Conte, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pancreatic+islet+transplantation+under+the+kidney+capsule+of+mice%3A+Model+of+refinement+for+molecular+and+ex-vivo+graft+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Anim%22%5BJournal%5D)">Pancreatic islet transplantation under the kidney capsule of mice: Model of refinement for molecular and ex-vivo graft analysis.</a> Lab Anim. 55 (5), 408-416 (2021).</li>
<li>Scholl, V. G. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessing+implantation+sites+for+pancreatic+islet+cell+transplantation%3A+Implications+for+type+1+diabetes+mellitus+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22Bioengineering%22%5BJournal%5D)">Assessing implantation sites for pancreatic islet cell transplantation: Implications for type 1 diabetes mellitus treatment.</a> Bioengineering. 12 (5), 499(2025).</li>
<li>Sui, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reduced+replication+fork+speed+promotes+pancreatic+endocrine+differentiation+and+controls+graft+size%5BTitle%5D)+AND+%22JCI+Insight%22%5BJournal%5D)">Reduced replication fork speed promotes pancreatic endocrine differentiation and controls graft size.</a> JCI Insight. 6 (5), e141553(2021).</li>
<li>Lithovius, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Non-invasive+quantification+of+stem+cell-derived+islet+graft+size+and+composition%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetologia%22%5BJournal%5D)">Non-invasive quantification of stem cell-derived islet graft size and composition.</a> Diabetologia. 67 (9), 1912-1929 (2024).</li>
<li>Lyra-Leite, D. M., Fonoudi, H., Gharib, M., Burridge, P. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+updated+protocol+for+the+cost-effective+and+weekend-free+culture+of+human+induced+pluripotent+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22STAR+Protoc%22%5BJournal%5D)">An updated protocol for the cost-effective and weekend-free culture of human induced pluripotent stem cells.</a> STAR Protoc. 2 (1), 100213(2021).</li>
<li>Chen, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+versatile+polypharmacology+platform+promotes+cytoprotection+and+viability+of+human+pluripotent+and+differentiated+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">A versatile polypharmacology platform promotes cytoprotection and viability of human pluripotent and differentiated cells.</a> Nat Methods. 18 (5), 528-541 (2021).</li>
<li>Wells, S. A., Ellis, G. J., Gunnells, J. C., Schneider, A. B., Sherwood, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Parathyroid+autotransplantation+in+primary+parathyroid+hyperplasia%5BTitle%5D)+AND+%22N+Engl+J+Med%22%5BJournal%5D)">Parathyroid autotransplantation in primary parathyroid hyperplasia.</a> N Engl J Med. 295 (2), 57-62 (1976).</li>
<li>Kim, H. -I., Yu, J. E., Park, C. -G., Kim, S. -J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+four+pancreatic+islet+implantation+sites%5BTitle%5D)+AND+%22J+Korean+Med+Sci%22%5BJournal%5D)">Comparison of four pancreatic islet implantation sites.</a> J Korean Med Sci. 25 (2), 203(2010).</li>
<li>Axen, K. V., Pi-Sunyer, F. X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+reversal+of+streptozotocin-induced+diabetes+in+rats+by+intramuscular+islet+implantation%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Long-term reversal of streptozotocin-induced diabetes in rats by intramuscular islet implantation.</a> Transplantation. 31 (6), 439-441 (1981).</li>
<li>Prokhorova, T. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Teratoma+formation+by+human+embryonic+stem+cells+is+site+dependent+and+enhanced+by+the+presence+of+Matrigel%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells+Dev%22%5BJournal%5D)">Teratoma formation by human embryonic stem cells is site dependent and enhanced by the presence of Matrigel.</a> Stem Cells Dev. 18 (1), 47-54 (2009).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>2-Phospho-L-ascorbic acid trisodium salt</td><td>Sigma Aldrich</td><td>49752</td><td></td></tr><tr><td>Activin A</td><td>Qkine</td><td>Qk001</td><td></td></tr><tr><td>AggreWell 400 24-well (microwell plate)</td><td>Stemcell</td><td>34415</td><td></td></tr><tr><td>Betacellulin</td><td>GenScript</td><td>Z03102</td><td></td></tr><tr><td>Bovine Serum Albumin, Fraction V, Fatty Acid Free</td><td>Goldbio</td><td>A-421</td><td></td></tr><tr><td>CHIR 99021</td><td>LC labs</td><td>C-6556&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Chroman-1</td><td>Medchem Express</td><td>HY-15392</td><td>CEPT cocktail</td></tr><tr><td>CMRL-1066</td><td>Pan Biotech</td><td>P04-84600</td><td></td></tr><tr><td>D-(+)-Glucose</td><td>Sigma Aldrich</td><td>G7021</td><td></td></tr><tr><td>Dibenzazepine (DBZ)</td><td>Syncom</td><td>Custom product</td><td>Gamma-secretase inhibitor</td></tr><tr><td>Dulbecco's Modified Eagle Medium and Ham&rsquo;s F12 media (DMEM/F12)</td><td>Corning</td><td>15383541</td><td></td></tr><tr><td>EGF</td><td>Qkine</td><td>Qk011</td><td></td></tr><tr><td>Emricasan</td><td>Medchem Express</td><td>HY-10396</td><td>CEPT cocktail</td></tr><tr><td>Ethanolamine</td><td>Sigma Aldrich</td><td>E9508</td><td></td></tr><tr><td>FGF2-G3</td><td>GenScript</td><td>Custom product</td><td></td></tr><tr><td>FGF7</td><td>GenScript</td><td>Z03047</td><td></td></tr><tr><td>Heparin</td><td>Sigma Aldrich</td><td>H3149</td><td></td></tr><tr><td>Insulin</td><td>Gibco</td><td>30284510</td><td></td></tr><tr><td>L-Alanyl-L-Glutamine</td><td>Linus</td><td>X0551-100</td><td></td></tr><tr><td>L-Ascorbic Acid</td><td>Santa Cruz</td><td>sc-202686</td><td></td></tr><tr><td>LDN-193189&nbsp;</td><td>Sigma Aldrich</td><td>SML0559</td><td></td></tr><tr><td>Lipid Concentrate</td><td>Gibco</td><td>11548846</td><td></td></tr><tr><td>Matrigel (basement membrane-derived extracellular matrix)</td><td>Falcon</td><td>354230</td><td></td></tr><tr><td>MCDB 131</td><td>Corning</td><td>15-100-CV</td><td></td></tr><tr><td>N-acetylcysteine</td><td>Thermo Scientific</td><td>10521221</td><td></td></tr><tr><td>NaHCO3</td><td>Fisher Scientific</td><td>10553325</td><td></td></tr><tr><td>Nicotinamide</td><td>Sigma Aldrich</td><td>N0636</td><td></td></tr><tr><td>NRG-1</td><td>Qkine</td><td>Qk045</td><td></td></tr><tr><td>Pluronic F-127 (anti-adherence solution)</td><td>Sigma Aldrich</td><td>82184</td><td>Used at 5% (w/v)</td></tr><tr><td>Polyamine Supplement (1000&times;)</td><td>Sigma Aldrich</td><td>P8483</td><td>CEPT cocktail</td></tr><tr><td>RepSox</td><td>MedChemExpress</td><td>HY-13012</td><td>Alk5 Inhibitor</td></tr><tr><td>Retinoic Acid</td><td>Sigma Aldrich</td><td>R2625</td><td></td></tr><tr><td>SANT-1</td><td>Selleckchem</td><td>S7092</td><td></td></tr><tr><td>Sobetirome (GC1)</td><td>Sigma Aldrich</td><td>SML1900-5MG</td><td>Cell-permeable T3 analog</td></tr><tr><td>Sodium Pyruvate</td><td>Corning</td><td>25-000-CI</td><td></td></tr><tr><td>Sodium Selenite</td><td>Sigma Aldrich</td><td>S5261</td><td></td></tr><tr><td>T3 (3,3&prime;,5-Triiodo-L-thyronine sodium salt)</td><td>Sigma Aldrich</td><td>T6397</td><td></td></tr><tr><td>TGF-&beta;1&nbsp;</td><td>Qkine</td><td>Qk010</td><td></td></tr><tr><td>TPB</td><td>Tocris</td><td>5343</td><td></td></tr><tr><td>Trace Elements A</td><td>Corning</td><td>15333641</td><td></td></tr><tr><td>Trace Elements B</td><td>Corning</td><td>15343641</td><td></td></tr><tr><td>Trans-ISRIB</td><td>Medchem Express</td><td>HY-12495</td><td>CEPT cocktail</td></tr><tr><td>Transferrin</td><td>InVitria</td><td>777TRF029</td><td></td></tr><tr><td>Triton X-100 (nonionic surfactant)</td><td>Thermo Scientific</td><td>11488696</td><td></td></tr><tr><td>TrypLE</td><td>Gibco</td><td>11538856</td><td></td></tr><tr><td>Y-27632</td><td>LC Laboratories</td><td>Y-5301</td><td>ROCK inhibitor</td></tr><tr><td>ZM-447439&nbsp;</td><td>MedChemExpress</td><td>HY-10128</td><td></td></tr><tr><td>ZnSO4</td><td>Sigma Aldrich</td><td>Z0251</td><td></td></tr><tr><td>Antibodies</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Rat anti-Human C-peptide (insulin)</td><td>DSHB</td><td>GN-ID4-s</td><td>Used at 150 ng/mL</td></tr><tr><td>Mouse anti-glucagon</td><td>Proteintech</td><td>67286-1-Ig</td><td>1:2000</td></tr><tr><td>Rabbit anti-somatostatin</td><td>Millipore</td><td>AB5494</td><td>1:500</td></tr><tr><td>Goat anti-rat AF488</td><td>Invitrogen</td><td>A-11006</td><td>1:500</td></tr><tr><td>Donkey anti-mouse AF488</td><td>Invitrogen</td><td>A-21202</td><td>1:500</td></tr><tr><td>Donkey anti-rabbit AF488</td><td>Invitrogen</td><td>A-21206</td><td>1:500</td></tr></tbody></table>

transplante intramuscular de células endócrinas pancreáticas derivadas de células-tronco humanas pluripotentes em camundongos

Intramuscular Transplantation of Human Pluripotent Stem Cell-derived Pancreatic Endocrine Cells in Mice

Transplante Intramuscular de Células Endócrinas Pancreáticas Derivadas de Células-Tronco Humanas Pluripotentes em Camundongos

Human pluripotent stem cell (hPSC)-derived pancreatic endocrine cells constitute a promising source for diabetes cell therapy and disease modeling. ...

intramuscular-transplantation-human-pluripotent-stem-cell-derived

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Biologia do Desenvolvimento

Nosso protocolo foi desenvolvido para fornecer precisão e facilidade ilhotas ou células sob a cápsula renal de camundongos. Células estão concentradas em pelotas na tubulação final utilizada para o transplante de células sob a cápsula renal. A facilidade desta técnica reduz o estresse nas células e mouse.

Transplante de ilhotas pancreáticas para a cápsula renal de ratos diabéticos

Este vídeo descreve o protocolo de enxerto de ilhotas pancreáticas humanas na câmara anterior do olho do camundongo para monitorar a revascularização de enxertos de ilhotas humanas in vivo. Também ajuda a entender a contribuição das células receptoras versus doadoras na promoção do encapsulamento e vascularização do enxerto.

Enxertia de ilhotas pancreáticas: um método para implantar ilhotas pancreáticas na câmara anterior do olho do camundongo para imagens in vivo

Este protocolo demonstra isolamento de manchas murinas e semeadura em um andaime decelularizado. As ilhotas suportadas em andaimes foram transplantadas para a almofada de gordura epididimática de ratos diabéticos induzidos por estreptozotocina (STZ). As ilhotas sobreviveram no local do transplante e revertearam a condição hiperglicêmica.

Transplante de islotes apoiado em andaimes na almofada de gordura epidídmica de ratos diabéticos

É apresentado um método para o omental transplante de ilhotas em um rato. As ilhotas isoladas são misturadas com hidrogel e a mistura é colocada em bolsa omental de um rato diabético. Então, a glicose no sangue é monitorada, e é realizada a análise imuno-histoquímico.

Um método de transplante de ilhotas para o omento no Mouse

Transplante de ilhotas pancreáticas é uma maneira de conseguir normoglycemia no diabetes tipo 1. Este artigo centra-se na técnica de transplante através da rota intraportal para manter os níveis normais de glicose em ratos diabéticos.

Intraportal transplante de ilhotas pancreáticas no modelo de Mouse

Descrevemos um protocolo para a implantação guiada por ultrassom de linhas de células de adenocarcinoma ductal pancreática derivada de urina diretamente no local do tumor nativo. Esta aproximação conduziu aos tumores pancreatic detectáveis pela exploração do ultra-som dentro de 2-4 semanas da injeção, e reduziu significativamente a semeadura da pilha do tumor da proporção na parede peritoneal em comparação à implantação ortotópica cirúrgica.

Implantação ortotópica guiada por ultrassom do Adenocarcinoma Ductal Pancreático murine

Apresentamos um protocolo para gerar um modelo de câncer de pâncreas ortotópico minimamente invasivo por injeção guiada por ultrassom de células cancerígenas pancreáticas humanas e o subsequente monitoramento do crescimento tumoral in vivo por ultrassonografia.

Geração de um xenoenxerto ortotópico de células cancerígenas pancreáticas por injeção guiada por ultrassom

O presente protocolo descreve um método aprimorado para aumentar a co-expressão dos fatores de transcrição PDX1 e NKX6.1 em progenitores pancreáticos derivados de células-tronco pluripotentes humanas (hPSCs) em monocamadas planares. Isto é conseguido reabastecendo a matriz fresca, manipulando a densidade celular e dissociando as células endodérmicas.

Diferenciação de células-tronco pluripotentes humanas em precursores de células beta pancreáticas em um sistema de cultura 2D

Aloenxertos ortotópicos singênicos de adenocarcinoma ductal pancreático (ADP) de camundongos recapitulam a biologia, os fenótipos e as respostas terapêuticas dos subtipos da doença. Devido à sua rápida e reprodutível progressão tumoral, são amplamente utilizados em estudos pré-clínicos. Aqui, mostramos práticas comuns para gerar esses modelos, injetando culturas de PDAC murino singênico no pâncreas.

Aloenxertos Ortotópicos Singênicos de Camundongos para Modelo de Câncer de Pâncreas

A diferenciação de células-tronco em ilhotas fornece uma solução alternativa ao tratamento convencional do diabetes e à modelagem da doença. Descrevemos um protocolo detalhado de cultura de células-tronco que combina um kit de diferenciação comercial com um método previamente validado para auxiliar na produção de ilhotas derivadas de células-tronco secretoras de insulina em um prato.

Diferenciação de Células-Tronco Pluripotentes Humanas em Aglomerados de Ilhotas Produtoras de Insulina

Este artigo apresenta um protocolo para diferenciação dirigida e análise funcional de células semelhantes a células β. Descrevemos as condições e passagens ideais de cultura para células-tronco pluripotentes humanas antes de gerar células pancreáticas produtoras de insulina. A diferenciação em seis estágios progride desde a formação definitiva da endoderme até células funcionais semelhantes às células β que secretam insulina em resposta à glicose.

Protocolo Otimizado para Geração de Células Funcionais Secretoras de Insulina Pancreáticas a partir de Células-Tronco Pluripotentes Humanas

Aprenda o transplante intramuscular de ilhotas pancreáticas derivadas de células-tronco pluripotentes humanas em camundongos imunodeficientes. Este método minimamente invasivo permite avaliar a função das ilhotas in vivo e recuperar os enxertos para análise histológica detalhada.

Transplante Intramuscular de Células Endócrinas Pancreáticas Derivadas de Células-Tronco Humanas Pluripotentes em Camundongos

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