Estabelecimento de uma trombose do seio sagital superior induzida por cloreto férrico modificado

Em nossa área, são utilizados vários métodos de modelagem para trombose do seio sagital superior. No entanto, o método de indução por cloreto férrico é amplamente utilizado devido à sua simplicidade e baixo custo. Nosso objetivo é refinar o modelo de trombose do seio sagital superior induzido por cloreto férrico, reduzindo a lesão cortical e visualizando o trombo sinusal.

Para começar, aplique pomada oftálmica em ambos os olhos de um rato anestesiado e raspe cuidadosamente os pelos do couro cabeludo. Depois, prenda o rato em posição deitada em uma plataforma de operação de roedores usando fita médica. Mantenha a temperatura corporal em torno de 37 graus Celsius com uma bolsa térmica.

Desinfete bem o couro cabeludo raspado usando iodo de povidona a 5%, seguido de álcool a 75%, e repita três vezes cada um. Após confirmar a profundidade anestésica pelo reflexo de beliscão do dedo, faça uma incisão peri-mediana de 15 milímetros no couro cabeludo. Usando dissecação romba, separe a fáscia subjacente e o periósteo para expor totalmente o crânio.

Afine o crânio usando uma broca craniana até que o seio sagital superior fique claramente exposto, começando pelo lambda e estendendo-se 10 milímetros para frente ao longo da sutura sagital. Utilize uma técnica de perfuração intermitente para evitar danos à dura-máter subjacente e ao seio sagital superior, e irrige repetidamente a broca com soro fisiológico normal para evitar danos térmicos ao córtex. Após a imagem das condições de base, aplique um segmento de 10 milímetros de sutura de seda 2-0 embebida em solução de cloreto férrico a 40% sobre a superfície exposta do seio sagital superior por cinco minutos.

Substitua o ponto por um segmento recém-encharcado e aplique por mais cinco minutos. Depois, enxágue o campo cirúrgico com 0,5 mililitros de soro fisiológico normal três vezes para remover o cloreto férrico residual. Feche a pele usando pontos interrompidos com sutura de seda 4-0 e desinfete a área com povidona-iodo.

Observe o rato até que ele esteja totalmente acordado, então o coloque de volta para a gaiola. Ligue o sistema de imagem de contraste de speckles a laser e o software correspondente, RF LSI versão cinco. Pressione o botão do modo online para ativar imagens ao vivo.

Ajuste a altura e a posição do instrumento até que o laser indicador fique centralizado dentro do campo de visão. Coloque o rato sobre uma plataforma de espuma e ajuste sua posição até que o seio sagital superior se alinhe com o laser indicador. Ajuste a ampliação e o foco até que a imagem fique exibida claramente.

Defina os limites inferior e superior do limiar de pseudocor para otimizar a aparência visual da imagem pseudocolorida. Defina um ROI circular sobre o seio sagital superior, registre o fluxo venoso e salve as imagens originais e pseudocoloridas. Prepare isoflurano, gel de ultrassom, lâminas descartáveis, fitas médicas e verifique todos os instrumentos necessários.

Instale o motor de aquisição tridimensional no sistema de imagem. Depois, instale o transdutor UHF 57X e inicialize o motor. Após anestesiar o rato, coloque-o em posição prona na placa de imagem termostática ajustada a 37 graus Celsius e prenda delicadamente a cabeça e os membros usando fitas médicas.

Aplique gel de ultrassom uniformemente sobre o couro cabeludo exposto. Ajuste a posição e orientação do rato em relação ao transdutor até que o seio sagital superior e o trombo intraluminal fiquem claramente visualizados. Adquira imagens tomográficas sequenciais do seio sagital superior no plano sagital usando imagens tridimensionais em modo B com passo de 0,04 milímetros, seguidas por imagens tomográficas no plano coronal usando as mesmas configurações.

Use o modo Doppler colorido para observar o fluxo sanguíneo no seio sagital superior e aplique o modo Doppler de onda pulsada para medir a velocidade do fluxo sanguíneo. Interrompa a anestesia e observe o rato até que ele esteja totalmente acordado. Depois, devolva o rato para a gaiola.

Por fim, exporte as imagens adquiridas e analise-as usando o software Vevo LAB. Registre as áreas transversais sagital e coronal máximas e o volume do trombo no seio sagital superior, juntamente com a velocidade máxima do fluxo sanguíneo do sei. Após a aplicação local de cloreto férrico, a imagem de contraste de speckles a laser detectou uma redução significativa no fluxo sanguíneo local no seio sagital superior em comparação com o valor inicial.

No sétimo dia pós-operatório, o ultrassom de pequenos animais confirmou a formação de trombo no seio sagital superior com recanalização luminal parcial. O ultrassom Doppler de onda pulsada demonstrou velocidade mensurável do fluxo sanguíneo dentro do lúmen residual do seio sagital superior. A imagem por ultrassom tridimensional permitiu a medição volumétrica do trombo do seio sagital superior usando fatias de imagem serial com espessura de 0,04 milímetros.

Nosso modelo refinado é menos invasivo e mais compatível com a imagem por ultrassom, permitindo um desenvolvimento e avaliação terapêutica mais confiáveis e diretas. Certifique-se de que a imagem interoperatória de contraste de manchas a laser confirme o sucesso do modelo e que o ultrassom pós-operatório de alta resolução monitore dinamicamente a formação do trombo, a lise e a recanalização do lúmen.