Name: Imagem Intravital de Dois Fótons da Morfologia do Axônio Sensorial de Toque em Pele de Camundongos (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-12-30T13:50:00.000+00:00
Duration: 7 min 51 s
Description: Aprenda a realizar imagem intravital de dois fótons para visualizar terminais axonais de mecanorreceptores de baixo limiar na pele do antebraço de camundongos. Este método permite estudar o desenvolvimento e a função dos circuitos sensoriais cutâneos in vivo.

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<ol><li>Abraira, V. E., Ginty, D. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+sensory+neurons+of+touch%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">The sensory neurons of touch.</a> Neuron. 79 (4), 618-639 (2013).</li>
<li>Handler, A., Ginty, D. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+mechanosensory+neurons+of+touch+and+their+mechanisms+of+activation%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Neurosci%22%5BJournal%5D)">The mechanosensory neurons of touch and their mechanisms of activation.</a> Nat Rev Neurosci. 22 (9), 521-537 (2021).</li>
<li>Meltzer, S., Santiago, C., Sharma, N., Ginty, D. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+cellular+and+molecular+basis+of+somatosensory+neuron+development%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">The cellular and molecular basis of somatosensory neuron development.</a> Neuron. 109 (23), 3736-3757 (2021).</li>
<li>Burgess, P. R., Petit, D., Warren, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Receptor+types+in+cat+hairy+skin+supplied+by+myelinated+fibers%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurophysiol%22%5BJournal%5D)">Receptor types in cat hairy skin supplied by myelinated fibers.</a> J Neurophysiol. 31 (6), 833-848 (1968).</li>
<li>Iggo, A., Muir, A. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+structure+and+function+of+a+slowly+adapting+touch+corpuscle+in+hairy+skin%5BTitle%5D)+AND+%22J+Physiol%22%5BJournal%5D)">The structure and function of a slowly adapting touch corpuscle in hairy skin.</a> J Physiol. 200 (3), 763-796 (1969).</li>
<li>Li, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+functional+organization+of+cutaneous+low-threshold+mechanosensory+neurons%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">The functional organization of cutaneous low-threshold mechanosensory neurons.</a> Cell. 147 (7), 1615-1627 (2011).</li>
<li>Rutlin, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+cellular+and+molecular+basis+of+direction+selectivity+of+A%CE%B4-LTMRs%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">The cellular and molecular basis of direction selectivity of Aδ-LTMRs.</a> Cell. 159 (7), 1640-1651 (2014).</li>
<li>Zimmerman, A., Bai, L., Ginty, D. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+gentle+touch+receptors+of+mammalian+skin%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">The gentle touch receptors of mammalian skin.</a> Science. 346 (6212), 950-954 (2014).</li>
<li>Handler, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Three-dimensional+reconstructions+of+mechanosensory+end+organs+suggest+a+unifying+mechanism+underlying+dynamic%2C+light+touch%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Three-dimensional reconstructions of mechanosensory end organs suggest a unifying mechanism underlying dynamic, light touch.</a> Neuron. 111 (20), 3211-3229 (2023).</li>
<li>Yamamoto, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+fine+structure+of+the+palisade-type+sensory+endings+in+relation+to+hair+follicles%5BTitle%5D)+AND+%22J+Electron+Microsc+%28Tokyo%29%22%5BJournal%5D)">The fine structure of the palisade-type sensory endings in relation to hair follicles.</a> J Electron Microsc (Tokyo). 15 (3), 158-166 (1966).</li>
<li>Cauna, N., Ross, L. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+fine+structure+of+Meissner%27s+touch+corpuscles+of+human+fingers%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biophys+Biochem+Cytol%22%5BJournal%5D)">The fine structure of Meissner's touch corpuscles of human fingers.</a> J Biophys Biochem Cytol. 8 (2), 467-482 (1960).</li>
<li>Olson, W., Dong, P., Fleming, M., Luo, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+specification+and+wiring+of+mammalian+cutaneous+low-threshold+mechanoreceptors%5BTitle%5D)+AND+%22Wiley+Interdiscip+Rev+Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">The specification and wiring of mammalian cutaneous low-threshold mechanoreceptors.</a> Wiley Interdiscip Rev Dev Biol. 5 (3), 389-404 (2016).</li>
<li>Koutsioumpa, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Skin-type-dependent+development+of+murine+mechanosensory+neurons%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Cell%22%5BJournal%5D)">Skin-type-dependent development of murine mechanosensory neurons.</a> Dev Cell. 58 (20), 2032-2047 (2023).</li>
<li>Duan, B., Cheng, L., Ma, Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spinal+circuits+transmitting+mechanical+pain+and+itch%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci+Bull%22%5BJournal%5D)">Spinal circuits transmitting mechanical pain and itch.</a> Neurosci Bull. 34 (1), 186-193 (2018).</li>
<li>Botchkarev, V. A., Eichmüller, S., Johansson, O., Paus, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hair+cycle-dependent+plasticity+of+skin+and+hair+follicle+innervation+in+normal+murine+skin%5BTitle%5D)+AND+%22J+Comp+Neurol%22%5BJournal%5D)">Hair cycle-dependent plasticity of skin and hair follicle innervation in normal murine skin.</a> J Comp Neurol. 386 (3), 379-395 (1997).</li>
<li>Peters, E. M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Developmental+timing+of+hair+follicle+and+dorsal+skin+innervation+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Comp+Neurol%22%5BJournal%5D)">Developmental timing of hair follicle and dorsal skin innervation in mice.</a> J Comp Neurol. 448 (1), 28-52 (2002).</li>
<li>Lumpkin, E. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Math1-driven+GFP+expression+in+the+developing+nervous+system+of+transgenic+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Gene+Expr+Patterns%22%5BJournal%5D)">Math1-driven GFP expression in the developing nervous system of transgenic mice.</a> Gene Expr Patterns. 3 (4), 389-395 (2003).</li>
<li>Liu, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+genetic+visualization+of+a+rare+subset+of+unmyelinated+sensory+neurons+that+may+detect+gentle+touch%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Molecular genetic visualization of a rare subset of unmyelinated sensory neurons that may detect gentle touch.</a> Nat Neurosci. 10 (8), 946-948 (2007).</li>
<li>Meltzer, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+role+for+axon-glial+interactions+and+Netrin-G1+signaling+in+the+formation+of+low-threshold+mechanoreceptor+end+organs%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">A role for axon-glial interactions and Netrin-G1 signaling in the formation of low-threshold mechanoreceptor end organs.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 119 (43), e2210421119(2022).</li>
<li>Helmchen, F., Denk, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Deep+tissue+two-photon+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">Deep tissue two-photon microscopy.</a> Nat Methods. 2 (12), 932-940 (2005).</li>
<li>Svoboda, K., Yasuda, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Principles+of+two-photon+excitation+microscopy+and+its+applications+to+neuroscience%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Principles of two-photon excitation microscopy and its applications to neuroscience.</a> Neuron. 50 (6), 823-839 (2006).</li>
<li>Denk, W., Strickler, J. H., Webb, W. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Two-photon+laser+scanning+fluorescence+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Two-photon laser scanning fluorescence microscopy.</a> Science. 248 (4951), 73-76 (1990).</li>
<li>Pineda, C. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intravital+imaging+of+hair+follicle+regeneration+in+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">Intravital imaging of hair follicle regeneration in the mouse.</a> Nat Protoc. 10 (7), 1116-1130 (2015).</li>
<li>Kamei, R., Urata, S., Maruoka, H., Okabe, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+chronic+two-photon+imaging+of+microglia+in+the+mouse+hippocampus%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">In vivo chronic two-photon imaging of microglia in the mouse hippocampus.</a> J Vis Exp. (185), e64104(2022).</li>
<li>Rompolas, P., Mesa, K. R., Greco, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spatial+organization+within+a+niche+as+a+determinant+of+stem-cell+fate%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Spatial organization within a niche as a determinant of stem-cell fate.</a> Nature. 502 (7472), 513-518 (2013).</li>
<li>Theer, P., Denk, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((On+the+fundamental+imaging-depth+limit+in+two-photon+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22J+Opt+Soc+Am+A+Opt+Image+Sci+Vis%22%5BJournal%5D)">On the fundamental imaging-depth limit in two-photon microscopy.</a> J Opt Soc Am A Opt Image Sci Vis. 23 (12), 3139-3149 (2006).</li>
<li>Ahanonu, B., Crowther, A., Kania, A., Rosa-Casillas, M., Basbaum, A. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+optical+imaging+of+the+spinal+cord+in+awake+behaving+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">Long-term optical imaging of the spinal cord in awake behaving mice.</a> Nat Methods. 21 (12), 2363-2375 (2024).</li>
<li>Davalos, D., Akassoglou, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+imaging+of+the+mouse+spinal+cord+using+two-photon+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">In vivo imaging of the mouse spinal cord using two-photon microscopy.</a> J Vis Exp. (59), e2760(2012).</li>
<li>Matsumura, S., Taniguchi, W., Nishida, K., Nakatsuka, T., Ito, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+two-photon+imaging+of+structural+dynamics+in+the+spinal+dorsal+horn+in+an+inflammatory+pain+model%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">In vivo two-photon imaging of structural dynamics in the spinal dorsal horn in an inflammatory pain model.</a> Eur J Neurosci. 41 (7), 989-997 (2015).</li>
<li>Feng, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Imaging+neuronal+subsets+in+transgenic+mice+expressing+multiple+spectral+variants+of+GFP%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Imaging neuronal subsets in transgenic mice expressing multiple spectral variants of GFP.</a> Neuron. 28 (1), 41-51 (2000).</li>
<li>Suzuki, M., Ebara, S., Koike, T., Tonomura, S., Kumamoto, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((How+many+hair+follicles+are+innervated+by+one+afferent+axon%3F+A+confocal+microscopic+analysis+of+palisade+endings+in+the+auricular+skin+of+thy1-YFP+transgenic+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Jpn+Acad+Ser+B+Phys+Biol+Sci%22%5BJournal%5D)">How many hair follicles are innervated by one afferent axon? A confocal microscopic analysis of palisade endings in the auricular skin of thy1-YFP transgenic mouse.</a> Proc Jpn Acad Ser B Phys Biol Sci. 88 (10), 582-595 (2012).</li>
<li>Luo, W., Enomoto, H., Rice, F. L., Milbrandt, J., Ginty, D. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+identification+of+rapidly+adapting+mechanoreceptors+and+their+developmental+dependence+on+Ret+signaling%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Molecular identification of rapidly adapting mechanoreceptors and their developmental dependence on Ret signaling.</a> Neuron. 64 (6), 841-856 (2009).</li>
<li>Neubarth, N. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Meissner+corpuscles+and+their+spatially+intermingled+afferents+underlie+gentle+touch+perception%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Meissner corpuscles and their spatially intermingled afferents underlie gentle touch perception.</a> Science. 368 (6497), eabb2751(2020).</li>
<li>Bai, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+Identification+of+an+Expansive+Mechanoreceptor+Sensitive+to+Skin+Stroking%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Genetic Identification of an Expansive Mechanoreceptor Sensitive to Skin Stroking.</a> Cell. 163 (7), 1783-1795 (2015).</li>
<li>Griffin, J. W., Thompson, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biology+and+pathology+of+nonmyelinating+Schwann+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Glia%22%5BJournal%5D)">Biology and pathology of nonmyelinating Schwann cells.</a> Glia. 56 (14), 1518-1531 (2008).</li>
<li>Tsai, P. F., Chou, F. P., Yu, T. S., Lee, H. J., Chiu, C. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Depilatory+creams+increase+the+number+of+hair+follicles%2C+and+dermal+fibroblasts+expressing+interleukin-6%2C+tumor+necrosis+factor-%CE%B1%2C+and+tumor+necrosis+factor-%CE%B2+in+mouse+skin%5BTitle%5D)+AND+%22Korean+J+Physiol+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Depilatory creams increase the number of hair follicles, and dermal fibroblasts expressing interleukin-6, tumor necrosis factor-α, and tumor necrosis factor-β in mouse skin.</a> Korean J Physiol Pharmacol. 25 (6), 497-506 (2021).</li>
<li>Bourane, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Low-threshold+mechanoreceptor+subtypes+selectively+express+MafA+and+are+specified+by+Ret+signaling%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Low-threshold mechanoreceptor subtypes selectively express MafA and are specified by Ret signaling.</a> Neuron. 64 (6), 857-870 (2009).</li>
<li>Jung, Y., Ng, J. H., Keating, C. P., Senthil-Kumar, P., Zhao, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comprehensive+evaluation+of+peripheral+nerve+regeneration+in+the+acute+healing+phase+using+tissue+clearing+and+optical+microscopy+in+a+rodent+model%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Comprehensive evaluation of peripheral nerve regeneration in the acute healing phase using tissue clearing and optical microscopy in a rodent model.</a> PLoS One. 9 (4), e94054(2014).</li>
<li>Gangadharan, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuropathic+pain+caused+by+miswiring+and+abnormal+end+organ+targeting%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Neuropathic pain caused by miswiring and abnormal end organ targeting.</a> Nature. 606 (7912), 137-145 (2022).</li>
<li>Huang, S., Rompolas, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Two-photon+microscopy+for+intracutaneous+imaging+of+stem+cell+activity+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Dermatol%22%5BJournal%5D)">Two-photon microscopy for intracutaneous imaging of stem cell activity in mice.</a> Exp Dermatol. 26 (5), 379-383 (2017).</li>
<li>Meleshina, A. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multimodal+label-free+imaging+of+living+dermal+equivalents+including+dermal+papilla+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cell+Res+Ther%22%5BJournal%5D)">Multimodal label-free imaging of living dermal equivalents including dermal papilla cells.</a> Stem Cell Res Ther. 9 (1), 84(2018).</li>
<li>Farrelly, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Two-photon+live+imaging+of+single+corneal+stem+cells+reveals+compartmentalized+organization+of+the+limbal+niche%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Stem+Cell%22%5BJournal%5D)">Two-photon live imaging of single corneal stem cells reveals compartmentalized organization of the limbal niche.</a> Cell Stem Cell. 28 (7), 1233-1247 (2021).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Lente Objetiva 20x & ndash; Super NA 1.0</td><td>Olympus</td><td>1-U2B965</td><td>Configuração do Microscópio de Dois Fótons</td></tr><tr><td>Cobertura 22x60</td><td>VWR</td><td>16004-330</td><td>Configuração do Microscópio de Dois Fótons</td></tr><tr><td>Argila de modelar com endurecimento ao ar</td><td>DAS</td><td></td><td>Configuração do Microscópio de Dois Fótons</td></tr><tr><td>Bomba de Ar para Anestesia (HF), 110V</td><td>RWD Life Science Inc.</td><td>R510-30</td><td>Sistema Isoflurano</td></tr><tr><td>Máscara Concêntrica de Anestesia</td><td>RWD Life Science Inc.</td><td>R510-M</td><td>Sistema Isoflurano</td></tr><tr><td>Câmara de Indução de Anestesia &ndash; Rato e Rato</td><td>RWD Life Science Inc.</td><td>V105</td><td>Sistema Isoflurano</td></tr><tr><td>Bruker Ultima Investigator Plus Microscópio de Varredura a Laser</td><td>Bruker Nano, Inc.&nbsp;</td><td></td><td>Configuração do Microscópio de Dois Fótons</td></tr><tr><td>Agulhas Borboleta</td><td>Fisher Scientific</td><td>1484041</td><td>Configuração do Microscópio de Dois Fótons</td></tr><tr><td>Chameleon Discovery NX com TPC: Dual</td><td>Coerente</td><td>1385777</td><td>Configuração do Microscópio de Dois Fótons</td></tr><tr><td>Máscara Cone com Tubo para Camundongos Neonatais</td><td>RWD Life Science Inc.</td><td>68680</td><td>Sistema Isoflurano</td></tr><tr><td>Filtros de emissão duplos (et525/70m e et595/50m) e t565lpxr&nbsp; Divisor de feixe dicróico</td><td>Nikon</td><td>INVP-01</td><td>Configuração do Microscópio de Dois Fótons</td></tr><tr><td>Conjunto de Filtros de Epi-Fluorescência ET-GFP ET470/40x e ET252/50m; Dicroico T495LPXR&nbsp;</td><td>Nikon</td><td>518065</td><td>Configuração do Microscópio de Dois Fótons</td></tr><tr><td>Etanol</td><td>Decon Laboratories Inc.</td><td></td><td>Configuração do Microscópio de Dois Fótons</td></tr><tr><td>Base de aquecimento infravermelha distante com controlador (AC)</td><td>Kent Scientific</td><td>RT-0515</td><td>Configuração do Microscópio de Dois Fótons</td></tr><tr><td>Detectores GaAsp (2)&nbsp;</td><td>Fotônica Hamamatsu&nbsp;</td><td>HED-UP-2&nbsp;</td><td>Configuração do Microscópio de Dois Fótons</td></tr><tr><td>Cilindros de filtro de gás</td><td>RWD Life Science Inc.</td><td>R510-31-6</td><td>Sistema Isoflurano</td></tr><tr><td>Graxa de alto vácuo</td><td>Sigma Aldrich</td><td>Z273554</td><td>Sistema de Imagem</td></tr><tr><td>Isoflurano, USP (250 mL)</td><td>Piramal Cuidados Críticos</td><td>6679-017-25</td><td>Sistema Isoflurano</td></tr><tr><td>Caixa de Cobertura a Laser &nbsp;</td><td>Teco Technology</td><td></td><td>Sistema de Imagem</td></tr><tr><td>Ratos: B6.129S6(Cg)-Ntrk2tm3.1(cre/ERT2)Ddg/J</td><td>JAX</td><td>27214</td><td></td></tr><tr><td>Ratos: B6. Cg-Igs7tm140.1(tetO-EGFP, CAG-tTA2)Hze/J</td><td>JAX</td><td>30220</td><td></td></tr><tr><td>Ratos: B6. Cg-Tg(Thy1-YFP)16Jrs/J</td><td>Rio Charles</td><td>3709</td><td></td></tr><tr><td>Creme Depilatório Nair</td><td>Amazon</td><td>28001</td><td>Configuração do Microscópio de Dois Fótons</td></tr><tr><td>Arquivos de Dados Brutos</td><td>Zenodo</td><td></td><td>10.5281/zenodo.17370834</td></tr><tr><td>Suporte rígido com grande suporte retangular para inserção</td><td>Thorlabs</td><td>MP15M</td><td>Configuração do Microscópio de Dois Fótons</td></tr><tr><td>Plataforma de Operação de Anestesia de Pequenos Animais</td><td>RWD Life Science Inc.</td><td>R510-PGL</td><td>Sistema Isoflurano</td></tr><tr><td>Pomada Lubricante Relaxante para Olhos</td><td>Bausch + Lomb</td><td></td><td>Configuração do Microscópio de Dois Fótons</td></tr><tr><td>Lâminas de Microscópio Superfrost Plus</td><td>Fisher Scientific</td><td>12-550-15</td><td>Configuração do Microscópio de Dois Fótons</td></tr></tbody></table>

imagem intravital de dois fótons da morfologia do axônio sensorial de toque em pele de camundongos

Intravital Two-Photon Imaging of Touch Sensory Axon Morphology in Mouse Skin

Neste trabalho, a microscopia de dois fótons foi usada para visualizar as estruturas axonais Aβ, RA-LTMR e Aδ-LTMR na pele durante o desenvolvimento e em adultos. Terminações lanceoladas maduras, ocorrendo em camundongos por volta do dia 20 pós-natal, estão totalmentedesenvolvidas 19,32. A organização geral dos terminais axônicos na pele peluda de camundongos adultos foi registrada, como mostrado na projeção de intensidade máxima (Figura 2A</...

Imagem Intravital de Dois Fótons da Morfologia do Axônio Sensorial de Toque em Pele de Camundongos

Low-threshold mechanoreceptors (LTMRs) are somatosensory neurons that detect innocuous light touch stimuli such as vibration, hair deflection, and ...

intravital-two-photon-imaging-touch-sensory-axon-morphology-mouse

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Neurociência

Imagens ao vivo de axônios da raiz dorsal após rizotomia

Source: Mizuno, H., et al. In Vivo Imagem de dois fótons de neurônios corticais em camundongos neonatais. J. Vis. Exp. (2018)Este vídeo mostra a microscopia de dois fótons sendo usada para obter imagens de neurônios no cérebro de um filhote de camundongo transgênico anestesiado. O laser de dois fótons permite imagens mais profundas com alta resolução espacial e dispersão mínima de luz, permitindo a captura detalhada da morfologia neuronal, incluindo projeções dendríticas.

Microscopia de dois fótons para imagem da morfologia neuronal em um filhote de camundongo

A fim de estudar as alterações de fibras nervosas intra-epidérmica nociceptivos (IENFs) em neuropatias dolorosas (PN), protocolos que nós desenvolvemos pode examinar directamente as alterações morfológicas observadas tridimensionais em IENFs nociceptivos. Análise tridimensional de IENFs tem o potencial de avaliar as alterações morfológicas de IENF na PN.

Imagem tridimensional de nociceptivos Fibras Nervosas intraepidérmicos em biópsias de pele humana

O protocolo para a imagem latente longitudinal dinâmico e lesão seletiva a laser de terminações nervosas em repórter camundongos transgênicos é apresentado.

In Vivo Two-Photon Microscopia de terminações nervosas individuais em Pele

A imagem de lapso de tempo no animal vivo fornece informações valiosas sobre a reorganização estrutural no cérebro intacto. Aqui, apresentamos uma preparação de crânio afinado que permite imagens transcranianas de estruturas sinápticas marcadas com fluorescência no córtex de camundongo vivo por microscopia de dois fótons.

Two-Photon<em&gt; In vivo</em&gt; Imagem de espinhas dendríticas no Rato Cortex Usando um desbaste-crânio Preparação

Pele de mamíferos contém um diversificado leque de estruturas - como os folículos capilares e terminações nervosas - que apresentam padrões distintos de organização espacial. Analisando a pele como uma montagem plana aproveita a geometria 2-dimensional deste tecido para produzir de espessura total imagens de alta resolução de estruturas da pele.

Plano Monte imagem de Rato pele e sua aplicação à análise do folículo piloso Padronização e Sensorial Axon Morfologia

A imagem intravital de dois fótons pode ser usada para investigar interações entre diferentes tipos de células na medula espinhal em seu ambiente de tecido nativo em um animal quimérico da medula óssea com uma lesão traumática por esmagamento da medula espinhal da coluna dorsal.

Imagem Intravital de axonais Interações com Microglia e macrófagos em um mouse Dorsal Coluna lesão por esmagamento

Este vídeo mostra o procedimento de craniotomia que permite imagens crônicas de neurônios no córtex retroesplenial de camundongos usando microscopia in vivo de dois fótons na linha transgênica Thy1-GFP. Essa abordagem é combinada com a injeção de vírus adeno-associado que expressa mCherry no hipocampo dorsal. Essas técnicas permitem o monitoramento de longo prazo da plasticidade estrutural dependente da experiência em RSC.

Simultânea de dois fótons<em&gt; In Vivo</em&gt; Imagem de Synaptic Entradas e metas pós-sinápticos no córtex do rato retrosplï¿½ico

Nós apresentamos um procedimento local aperfeiçoado da ejeção usando uma micro-pipeta de vidro e um método rápido da imagem latente do hyperstack do dois-fotão, que permita a medida precisa de mudanças capilares do diâmetro e a investigação de sua regulação em três dimensões.

In vivo tridimensional microscopia de dois fótons para estudo conduzido respostas vasculares por ejeção ATP local usando uma micro-pipeta de vidro

As alterações morfológicas ocorrem em células de fibroblastos imunes responsivos após a ativação e promovem alterações no recrutamento celular. Utilizando a imagem latente do Photon 2 conjuntamente com uma proteína fibroblástica-específica geneticamente projetada 1 (FSP1)-CRE; tdtomato floxed-parar-floxed (TB/TB) linha do mouse e verde cDNAs Tagged lipopolissacarídeo-FITC, podemos ilustrar a captação altamente específica de lipopolissacaríno em fibroblastos dérmicos e alterações morfológicas in...

In vivo duas cores 2-Photon Imaging de células de repórter geneticamente marcadas na pele

Aprenda a realizar imagem intravital de dois fótons para visualizar terminais axonais de mecanorreceptores de baixo limiar na pele do antebraço de camundongos. Este método permite estudar o desenvolvimento e a função dos circuitos sensoriais cutâneos in vivo.

Imagem Intravital de Dois Fótons da Morfologia do Axônio Sensorial de Toque em Pele de Camundongos

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