Name: Gavage Oral em Filhotes de Camundongos Neonatais e Avaliação Funcional da Integridade da Barreira Intestinal Usando Câmaras de Uso (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-01-09T14:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 18 s
Description: Aprenda a avaliar a integridade da barreira intestinal em filhotes de camundongos neonatais usando gavagem oral e câmaras de Ussing. Este método permite investigar como moléculas específicas afetam a permeabilidade intestinal durante o desenvolvimento precoce.

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<ol><li>Di Vincenzo, F., Del Gaudio, A., Petito, V., Lopetuso, L. R., Scaldaferri, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gut+microbiota%2C+intestinal+permeability%2C+and+systemic+inflammation%3A+A+narrative+review%5BTitle%5D)+AND+%22Intern+Emerg+Med%22%5BJournal%5D)">Gut microbiota, intestinal permeability, and systemic inflammation: A narrative review.</a> Intern Emerg Med. 19 (2), 275-293 (2024).</li>
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</ol>

<table><tbody><tr><td>10x DPBS SEM Ca & Ca Mg</td><td>Dulbeccos</td><td>14200091</td><td></td></tr><tr><td>Anticorpo anti-HRP</td><td>Nordic Biosite</td><td>GTX10183</td><td>Peroxidase de Raiz-Forte Monoclonal de Camundongo [2H11]</td></tr><tr><td>Lupa binocular</td><td>Olympus&nbsp;</td><td>SZ61</td><td>Não é necessário especificar.</td></tr><tr><td>Placa preta de 96 poços com fundo plano</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>137101</td><td>As placas devem ser pretas e adaptadas às leituras de fluorescência. A tampa deve ser retirada durante a leitura.</td></tr><tr><td>BSA</td><td>Merck</td><td>A4503</td><td></td></tr><tr><td>Camundongos C57BL/6J</td><td>Rio Charles</td><td>632C57BL/6J&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>CaCl2</td><td>Merck</td><td>2382</td><td></td></tr><tr><td>Encadernação Transparente de Fundo Plano Alto com 96 Poços</td><td>Corning</td><td>9018</td><td></td></tr><tr><td>D-(+)-glicose</td><td>Merck</td><td>G8270&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>HO destilado</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>D-Mannitol</td><td>Merck</td><td>M4125</td><td></td></tr><tr><td>Pinças Finas</td><td>FST</td><td>11445-12</td><td></td></tr><tr><td>Tesoura Fina</td><td>FST</td><td>14058-09</td><td></td></tr><tr><td>FITC-Dextran 4Kd</td><td>FD4</td><td>Laboratórios TdB</td><td>Sensível à fotodegradação.</td></tr><tr><td>Bolsa térmica</td><td>Minerve</td><td>20 031 01</td><td></td></tr><tr><td>HRP</td><td>Merck</td><td>P8375</td><td></td></tr><tr><td>MgCl2, 6H2O</td><td>Merck</td><td>M2670&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Milli-Q H2O</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Sistema de Uso P2300 EasyMount & Câmaras</td><td>Instrumentos fisiológicos</td><td>EM6-C-CE</td><td>Sistemas, câmaras e sliders devem ser todos compatíveis.</td></tr><tr><td>P2306 Ussing Chamber Slider</td><td>Instrumentos fisiológicos</td><td>PI-P2306</td><td>Diferentes modelos de deslizantes estão disponíveis para diferentes tamanhos e tipos de tecidos.</td></tr><tr><td>Kit de substrato de peroxidase fluorogênica QuantaBlu</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>15169</td><td></td></tr><tr><td>Agulhas de Alimentação Reutilizáveis Ponta Redonda</td><td>FST</td><td>18061-24</td><td>Calibre 24, ponta de 1,25mm de diâmetro, ponta redonda. Deve ser lavado com água estéril, etanol a 70% e autoclavado antes do uso.</td></tr><tr><td>Bicarbonato de sódio</td><td>Merck</td><td>S6297</td><td></td></tr><tr><td>Carbonato de sódio</td><td>Merck</td><td>S7795</td><td></td></tr><tr><td>Espectrofotômetro</td><td>TECAN&nbsp;</td><td>Spark 10M</td><td>Um leitor de placas com aquisição superior é necessário se forem usadas as placas pretas 137101.</td></tr><tr><td>Pré-adolescente-20</td><td>Merck</td><td>P7949</td><td></td></tr></tbody></table>

gavage oral em filhotes de camundongos neonatais e avaliação funcional da integridade da barreira intestinal usando câmaras de uso

Oral Gavage in Neonatal Mouse Pups and Functional Assessment of Gut Barrier Integrity Using Ussing Chambers

Quantificação padrão de curvas e concentrações de poços O valor médio dos blanks foi subtraído de cada poço da placa. Com valores de absorção no eixo Y e concentrações no eixo X, uma curva padrão foi criada usando a função "Interpolate a curva padrão" do GraphPad Prism. Se todos os pontos padrão estiverem alinhados, o modelo "Linha" oferece os melhores resultados. Alternativamente, o modelo "Sigmoidal, 4 PL, X é concentração" oferece grande flexibilidade e precisão com interpolação padrão de curvas nã...

Gavage Oral em Filhotes de Camundongos Neonatais e Avaliação Funcional da Integridade da Barreira Intestinal Usando Câmaras de Uso

Growing evidence underscores the importance of the first 1,000 days of life in shaping the gut-microbiome axis. This early-life window is critical in the ...

oral-gavage-neonatal-mouse-pups-functional-assessment-gut-barrier

Research

JoVE Journal

Biology

Biologia

Íleo pós-operatório (POI) é uma complicação da cirurgia abdominal levando a um aumento da morbidade e permanência hospitalar prolongada. Porque estratégias profiláticas e terapêuticas faltam pesquisa intensificada é necessário. Por isso, estabeleceu um modelo de mouse padronizada e viável para o entendimento da fisiopatologia POI e estudar potenciais opções terapêuticas.

Avaliação Funcional da motilidade intestinal e inflamação da parede do intestino em Roedores: Análises em um modelo padronizado de Manipulação Intestinal

Este protocolo descreve o uso de preparações de tecido intestinal excisadas ou "sacos intestinais" como um modelo ex vivo da função da barreira intestinal. Este modelo pode ser usado para avaliar a integridade da barreira epitelial e da camada de gel mucoso em locais intestinais específicos em modelos animais de doenças digestivas.

Ex Vivo Intestinal Sacs para Avaliar mucosa Permeabilidade de modelos de doença gastrointestinal

Este estudo detalha o processo de quantidades precisas de gavaging de probióticos para camundongos neonatais. A montagem experimental foi otimizada para incluir, mas não está limitada ao probiótico dosagem, métodos de administração e quantificação de bactérias no intestino.

Estudos de probiótico em camundongos neonatais usando Gavage

Aproveitando a microscopia intravital, o método aqui apresentado permite a visualização em tempo real do derramamento de células epiteliais intestinais em animais vivos. Portanto, a mucosa intestinal topicamente manchada (acriflavina e rhodamineB-dextran) de camundongos anesthetizados é imageda até a resolução unicelular usando microscopia confocal.

Uma abordagem baseada em microscopia intravital para avaliar a permeabilidade intestinal e o desempenho do derramamento de células epiteliais

Função de barreira epitelial intestinal disregulada e respostas imunológicas são marcas de doença inflamatória intestinal que permanecem mal investigadas devido à falta de modelos fisiológicos. Aqui, descrevemos um modelo de alça intestinal de camundongos que emprega um segmento intestinal bem vascularizado e exteriorizado para estudar a permeabilidade mucosa e o recrutamento de leucócitos in vivo.

Avaliação Funcional da Permeabilidade Intestinal e Migração Transepitelial de Neutrófilo em Camundongos usando um Modelo de Laço Intestinal Padronizado

O epitélio intestinal confere não apenas absorção de nutrientes, mas proteção contra substâncias nocivas. A junção intercelular mais epitelial apical, ou seja, a junção apertada, regula soluto paracelular e permeabilidade de íons. Aqui, é descrito um protocolo para a preparação de folhas mucosas e avaliação da seletividade de íons de junções apertadas usando a técnica da câmara de Ussing.

Avaliação funcional da barreira de junção apertada intestinal e permeabilidade de íons em tecido nativo pela técnica da câmara de ussing

A enterocolite necrosante (NEC) é a doença gastrointestinal (GI) mais grave que ocorre frequentemente em bebês prematuros, especialmente bebês com baixo peso ao nascer, com alta mortalidade e patogênese pouco clara. A causa da NEC pode estar relacionada a anormalidades inflamatórias do sistema de regulação imunológica. Um modelo animal NEC é uma ferramenta indispensável para a pesquisa imunológica da doença NEC. Modelos animais NEC geralmente usam camundongos neonatais C57BL/6J; Os camundongos...

Um modelo de rato BALB/c neonatal de Enterocolite Necrotizante

Para estudar como o intestino delgado lida com partículas de tamanhos variados, modificamos um método estabelecido in vivo para determinar o trânsito do intestino delgado.

Estudando o Mecananosense do Intestino Delgado Urinário de Partículas Luminais

No presente estudo, o dextrano marcado com fluoresceína-isotiocianato (FITC) é administrado a camundongos via gavagem oral para avaliar a permeabilidade intestinal tanto in vivo quanto em amostras plasmáticas e fecais. Como a função de barreira intestinal é afetada em muitos processos de doenças, este ensaio direto e quantitativo pode ser usado em diversas áreas de pesquisa.

Avaliação da integridade da barreira intestinal em camundongos usando Dextrano marcado com fluoresceína-isotiocianato

Este protocolo descreve um modelo de camundongo neonatal de enterocolite necrosante (NEC) e subsequente isolamento de células imunes da lâmina própria do intestino delgado murino neonatal.

Um modelo de camundongo neonatal de enterocolite necrosante e isolamento da lâmina própria para perfil de células imunes

O objetivo deste protocolo é fornecer uma abordagem padronizada para avaliar quantitativamente a integridade da barreira epitelial gengival murina, aplicando topicamente dextranos marcados com fluorescência de diferentes tamanhos moleculares na superfície gengival in vivo, seguido por imagens ex vivo usando um sistema de microscopia de fóton único.

Avaliação funcional da barreira epitelial gengival de camundongos usando traçadores fluorescentes

Aprenda a avaliar a integridade da barreira intestinal em filhotes de camundongos neonatais usando gavagem oral e câmaras de Ussing. Este método permite investigar como moléculas específicas afetam a permeabilidade intestinal durante o desenvolvimento precoce.

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Gavage Oral em Filhotes de Camundongos Neonatais e Avaliação Funcional da Integridade da Barreira Intestinal Usando Câmaras de Uso

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