Name: Administração intranasal de poliplexos de mRNA via aerossóis de quebra de Rayleigh: Um método in vitro para deposição nasal e testes funcionais (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-01-20T13:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 50 s
Description: Aprenda a administrar vacinas de mRNA intranasais usando aerossóis de quebra de Rayleigh com o modelo AINI. Este método preserva a integridade do mRNA e permite deposição nasal direcionada em células pulmonares humanas.

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<ol><li>Akula, V. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+heterologous+intranasal+incovacc%28r%29+vaccination+as+a+booster+to+two-dose+intramuscular+COVID-19+vaccination+series%3A+a+randomized+phase+3+clinical+trial%5BTitle%5D)+AND+%22Commun+Med+%28Lond%29%22%5BJournal%5D)">Effect of heterologous intranasal incovacc(r) vaccination as a booster to two-dose intramuscular COVID-19 vaccination series: a randomized phase 3 clinical trial.</a> Commun Med (Lond). 5 (1), 133(2025).</li>
<li>Van Hoeve, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Breakup+of+diminutive+Rayleigh+jets%5BTitle%5D)+AND+%22Phys+Fluids%22%5BJournal%5D)">Breakup of diminutive Rayleigh jets.</a> Phys Fluids. 22 (12), (2010).</li>
<li>Li, H. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeted+nasal+delivery+of+LNP-mRNAs+aerosolised+by+Rayleigh+breakup+technology%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Pharm%22%5BJournal%5D)">Targeted nasal delivery of LNP-mRNAs aerosolised by Rayleigh breakup technology.</a> Int J Pharm. 672, 125335(2025).</li>
<li>He, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rayleigh-based+soft+mist+inhalers+preserve+mRNA-LNP+integrity+for+pulmonary+delivery%5BTitle%5D)+AND+%22J+Drug+Deliv+Sci+Technol%22%5BJournal%5D)">Rayleigh-based soft mist inhalers preserve mRNA-LNP integrity for pulmonary delivery.</a> J Drug Deliv Sci Technol. 115, 107651(2026).</li>
<li>Biesel, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Soft+mist+inhaler+nebulization+by+Rayleigh-breakup+largely+preserves+functional+integrity+of+liposomal+mRNA+in+respirable+aerosols%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Pharm+Sci%22%5BJournal%5D)">Soft mist inhaler nebulization by Rayleigh-breakup largely preserves functional integrity of liposomal mRNA in respirable aerosols.</a> Eur J Pharm Sci. 214, 107300(2025).</li>
<li>Chen, J. Z., Finlay, W. H., Martin, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vitro+regional+deposition+of+nasal+sprays+in+an+idealized+nasal+inlet%3A+comparison+with+in+vivo+gamma+scintigraphy%5BTitle%5D)+AND+%22Pharm+Res%22%5BJournal%5D)">In vitro regional deposition of nasal sprays in an idealized nasal inlet: comparison with in vivo gamma scintigraphy.</a> Pharm Res. 39 (11), 3021-3028 (2022).</li>
<li>Chen, J. Z., Kiaee, M., Martin, A. R., Finlay, W. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vitro+assessment+of+an+idealized+nose+for+nasal+spray+testing%3A+comparison+with+regional+deposition+in+realistic+nasal+replicas%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Pharm%22%5BJournal%5D)">In vitro assessment of an idealized nose for nasal spray testing: comparison with regional deposition in realistic nasal replicas.</a> Int J Pharm. 582, 119341(2020).</li>
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<li>Wang, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+Rayleigh+jet+atomizer+for+intranasal+delivery+of+lipid+nanoparticle-siRNA+formulations%3A+stability%2C+deposition%2C+and+device+performance%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Pharm%22%5BJournal%5D)">Evaluation of Rayleigh jet atomizer for intranasal delivery of lipid nanoparticle-siRNA formulations: stability, deposition, and device performance.</a> Int J Pharm. 683, 126084(2025).</li>
<li>Moreno Herrero, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Compact+polyethylenimine-complexed+mRNA+vaccines%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Nanotechnol%22%5BJournal%5D)">Compact polyethylenimine-complexed mRNA vaccines.</a> Nat Nanotechnol. 20 (9), 1323-1331 (2025).</li>
<li>Geall, A. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Non-viral+delivery+of+self-amplifying+RNA+vaccines%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Non-viral delivery of self-amplifying RNA vaccines.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 109 (36), 14604-14609 (2012).</li>
<li>Xi, J., Lei, L. R., Zouzas, W., Si, X. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nasally+inhaled+therapeutics+and+vaccination+for+COVID-19%3A+developments+and+challenges%5BTitle%5D)+AND+%22MedComm%22%5BJournal%5D)">Nasally inhaled therapeutics and vaccination for COVID-19: developments and challenges.</a> MedComm. 2 (4), 569-586 (2021).</li>
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<li>Jin, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+experimental+approach+to+measure+nebulized+droplet+deposition+pattern+and+deposition+fraction+in+an+idealized+mouth-to-throat+model%5BTitle%5D)+AND+%22Phys+Fluids%22%5BJournal%5D)">A novel experimental approach to measure nebulized droplet deposition pattern and deposition fraction in an idealized mouth-to-throat model.</a> Phys Fluids. 35 (8), (2023).</li>
<li>Darquenne, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aerosol+deposition+in+health+and+disease%5BTitle%5D)+AND+%22J+Aerosol+Med+Pulm+Drug+Deliv%22%5BJournal%5D)">Aerosol deposition in health and disease.</a> J Aerosol Med Pulm Drug Deliv. 25 (3), 140-147 (2012).</li>
<li>Liu, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Turbinate-homing+IgA-secreting+cells+originate+in+the+nasal+lymphoid+tissues%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Turbinate-homing IgA-secreting cells originate in the nasal lymphoid tissues.</a> Nature. 632 (8025), 637-646 (2024).</li>
<li>Debus, H., Baumhof, P., Probst, J., Kissel, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Delivery+of+messenger+RNA+using+poly%28ethylene+imine%29-poly%28ethylene+glycol%29-copolymer+blends+for+polyplex+formation%3A+biophysical+characterization+and+in+vitro+transfection+properties%5BTitle%5D)+AND+%22J+Control+Release%22%5BJournal%5D)">Delivery of messenger RNA using poly(ethylene imine)-poly(ethylene glycol)-copolymer blends for polyplex formation: biophysical characterization and in vitro transfection properties.</a> J Control Release. 148 (3), 334-343 (2010).</li>
<li>Brandtzaeg, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Potential+of+nasopharynx-associated+lymphoid+tissue+for+vaccine+responses+in+the+airways%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Respir+Crit+Care+Med%22%5BJournal%5D)">Potential of nasopharynx-associated lymphoid tissue for vaccine responses in the airways.</a> Am J Respir Crit Care Med. 183 (12), 1595-1604 (2011).</li>
<li>Foley, R. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lipid+nanoparticles+for+the+delivery+of+CRISPR%2FCas9+machinery+to+enable+site-specific+integration+of+CFTR+and+mutation-agnostic+disease+rescue%5BTitle%5D)+AND+%22bioRxiv%22%5BJournal%5D)">Lipid nanoparticles for the delivery of CRISPR/Cas9 machinery to enable site-specific integration of CFTR and mutation-agnostic disease rescue.</a> bioRxiv. , (2025).</li>
<li>Hou, X., Zaks, T., Langer, R., Dong, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lipid+nanoparticles+for+mRNA+delivery%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Mater%22%5BJournal%5D)">Lipid nanoparticles for mRNA delivery.</a> Nat Rev Mater. 6 (12), 1078-1094 (2021).</li>
<li>D'Angelo, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hybrid+lipid%2Fpolymer+nanoparticles+for+pulmonary+delivery+of+siRNA%3A+development+and+fate+upon+in+vitro+deposition+on+the+human+epithelial+airway+barrier%5BTitle%5D)+AND+%22J+Aerosol+Med+Pulm+Drug+Deliv%22%5BJournal%5D)">Hybrid lipid/polymer nanoparticles for pulmonary delivery of siRNA: development and fate upon in vitro deposition on the human epithelial airway barrier.</a> J Aerosol Med Pulm Drug Deliv. 31 (3), 170-181 (2018).</li>
<li>Movia, D., Bazou, D., Volkov, Y., Prina-Mello, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multilayered+cultures+of+NSCLC+cells+grown+at+the+air-liquid+interface+allow+the+efficacy+testing+of+inhaled+anti-cancer+drugs%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Multilayered cultures of NSCLC cells grown at the air-liquid interface allow the efficacy testing of inhaled anti-cancer drugs.</a> Sci Rep. 8 (1), 12920(2018).</li>
<li>Waltl, E., Eckl-Dorna, J., Selb, R., Valenta, R., Niederberger, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterisation+and+culture+of+primary+human+nasal+epithelial+cells+and+the+influence+of+interferon-gamma%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Transl+Allergy%22%5BJournal%5D)">Characterisation and culture of primary human nasal epithelial cells and the influence of interferon-gamma.</a> Clin Transl Allergy. 4 (2), P21(2014).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Tubos centrífugos de 50 mL</td><td>Sigma-Aldrich Company Limited</td><td>CLS430829-500EA</td><td></td></tr><tr><td>50&ndash; 1000 & mu; Pontas da pipeta em L</td><td>Sigma-Aldrich Company Limited</td><td>Z740031-1000EA</td><td></td></tr><tr><td>Linha de Células A549</td><td>Coleção de Cultura do Tipo Americano</td><td>ATCC CRM-CCL-185</td><td></td></tr><tr><td>Medidor de Fluxo de Ar</td><td>N/A</td><td>N/A</td><td>Um medidor de fluxo de ar genérico pode ser utilizado.</td></tr><tr><td>Modelo de Entrada Nasal Idealizada de Alberta (AINI)</td><td>TSI Incorporated (via Copley Scientific, Reino Unido)</td><td>0001-01-8540</td><td></td></tr><tr><td>Fita indicadora de autoclave</td><td>Sigma-Aldrich Company Limited</td><td>Z744090</td><td></td></tr><tr><td>DAPI</td><td>Sigma-Aldrich Company Limited</td><td>D1306</td><td></td></tr><tr><td>DMEM (Eagle Medium Modificado da Dulbecco)</td><td>Gibco, Thermo Fisher Scientific</td><td>11966025</td><td></td></tr><tr><td>Álcool etílico, puro</td><td>Sigma-Aldrich Company Limited</td><td>32221-M</td><td>Comprado via Merck</td></tr><tr><td>Soro Bovino Fetal (FBS)</td><td>Gibco, Thermo Fisher Scientific</td><td>A5256701</td><td></td></tr><tr><td>Formaldeído</td><td>Sigma-Aldrich Company Limited</td><td>F8775</td><td></td></tr><tr><td>HEK293T Linha Celular</td><td>Coleção de Cultura do Tipo Americano</td><td>ATCC CRL-3216</td><td></td></tr><tr><td>Gabinete de Biossegurança Heraeus HERAsafe HS 12</td><td>Heraeus</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Impactor de Próxima Geração</td><td>MSP's, uma divisão da TSI</td><td>0170-01-1000</td><td>Este produto também está presente no Catálogo Copley, com o número de peça 5201.</td></tr><tr><td>Câmera Monocromática Nikon DS-Qi2</td><td>Nikon</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Multidishes tratados com cultura celular Nunc</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>142475</td><td></td></tr><tr><td>Frascos tratados com cultura celular Nunc EasYFlask</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>156340</td><td></td></tr><tr><td>Parafilm</td><td>Sigma-Aldrich Company Limited</td><td>P7793-1EA</td><td></td></tr><tr><td>Penicilina-Estreptomicina (10.000 U/mL)</td><td>Gibco, Thermo Fisher Scientific</td><td>15140148</td><td></td></tr><tr><td>Comprimidos de solução salina tamponada com fosfato (PBS)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>18912014</td><td></td></tr><tr><td>Cloridrato de polietilenemina</td><td>Sigma-Aldrich Company Limited</td><td>764965-1G</td><td>Comprado via SLS</td></tr><tr><td>Atomizador Nasal Rayleigh Jet</td><td>Resyca BV Enschede</td><td>Adaptador de spray nasal macio</td><td></td></tr><tr><td>Água livre de RNAse</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>J60610. EQC</td><td></td></tr><tr><td>Cuvette de Dimensionamento</td><td>Malvern Panalytical</td><td>ZEN0040</td><td></td></tr><tr><td>A célula capilar dobrada</td><td>Malvern Panalytical</td><td>DTS1070</td><td></td></tr><tr><td>Zetasizer Pro</td><td>Malvern Panalytical</td><td>Zetasizer Pro</td><td></td></tr><tr><td>Software Zetasizer Ultra-Pro ZS Xplorer</td><td>Malvern Panalytical</td><td>N/A</td><td></td></tr></tbody></table>

administração intranasal de poliplexos de mrna via aerossóis de quebra de rayleigh: um método in vitro para deposição nasal e testes funcionais

Intranasal Delivery of mRNA Polyplexes via Rayleigh Breakup Aerosols: An In Vitro Method for Nasal Deposition and Functional Testing

Administração intranasal de poliplexos de mRNA via aerossóis de quebra de Rayleigh: Um método in vitro para deposição nasal e testes funcionais

Intranasal delivery of mRNA therapeutics is a promising strategy for vaccination and treating respiratory diseases, offering direct immune activation at ...

intranasal-delivery-mrna-polyplexes-via-rayleigh-breakup-aerosols-an

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Fonte: Ullah, I., et.al. Um dispositivo de posicionamento para a colocação de camundongos durante a entrega intranasal de siRNA ao sistema nervoso central. J. Vis. Exp. (2019)Este vídeo demonstra uma técnica de administração intranasal precisa para fornecer complexos peptídeo-siRNA direcionados a neurônios ao cérebro de camundongos usando um dispositivo de posicionamento especializado. Os camundongos anestesiados são fixados em uma posição de cabeça para baixo e para frente para otimizar a...

Entrega intranasal de siRNA ao cérebro de camundongo usando um dispositivo de posicionamento

A instilação intratraqueal mediada por intubação (IMIT) de reagentes é um método excelente e não invasivo para estudar doenças respiratórias, bem como um método para instilar reagentes terapêuticos diretamente no pulmão. É um método rápido e altamente reprodutível, adequado para testes pré-clínicos.

Intratraqueal (IMIT) instilação mediada por intubação: A não-invasiva, sistema de entrega Lung-specific

Há uma falta geral de conhecimento sobre como as vacinas funcionam. Aqui, propomos o uso combinado de genética reversa e camundongos quiméricos da medula óssea para obter informações sobre as respostas imunes iniciais do hospedeiro às vacinas, com foco especial nas células dendríticas e na imunidade das células T.

A administração intranasal de recombinantes Vacinas contra Influenza em quimérico rato Modelos para estudar a imunidade mucosal

Este manuscrito revisa a modelagem e simulações de diferentes protocolos para administrar medicamentos à região olfativa em modelos de vias aéreas nasais baseados em imagens. Vários módulos de software são usados para desenvolver o modelo de nariz anatomicamente preciso, gerar malha computacional, simular fluxos de ar nasais e prever a deposição de partículas na região olfativa.

Modelagem e Simulações de Olfativo Drug Delivery com controles passivo e ativo do nasal inalados Farmacêuticas Aerossóis

A unidade de inalação aqui descritos possam gerar, de amostra para a caracterização, e uniformemente depositar um aerossol da droga nos pulmões de roedores. Isto permite a determinação de pré-clínica da eficácia e segurança das doses de medicamentos depositados nos pulmões; dados fundamentais que permitem o desenvolvimento de medicamentos inalados clínica.

Pó seco e nebulizada de inalação de aerossóis de produtos farmacêuticos entregue no Ratos Usando um nariz somente Sistema de Exposição

Aqui descrevemos um protocolo para a geração de nanoliposomes catiônico, o qual se baseia o método seco-filme e pode ser usado para o cofre e entrega eficiente do in vitro transcrito de RNA mensageiro.

Geração de Nanoliposomes catiônica para a entrega eficiente de In Vitro transcrito de RNA mensageiro

Aqui, descrevemos dois métodos novos da administração intranasal estável sob anestesia por inalação com o mínimo de estresse físico para animais experimentais. Podemos também descrever um método de avaliação quantitativa dos níveis de distribuição de drogas no cérebro através da via de nariz-de-cérebro usando radiolabeled [14C]-inulina como um substrato de modelo de macromoléculas solúveis em água.

Novos métodos para a Administração Intranasal sob anestesia por inalação para avaliar a entrega da droga de nariz-de-Brain

Aqui, nós apresentamos um protocolo usando um dispositivo de posicionamento do rato que permita a colocação apropriada dos ratos para a administração intranasal de uma formulação do peptide-siRNA do cérebro-alvejando permitindo o silenciamento de gene eficaz no sistema nervoso central.

Um dispositivo de posicionamento para a colocação de camundongos durante a entrega de siRNA intranasal ao sistema nervoso central

Aqui, um protocolo simples é apresentado para a produção de nanopartículas mRNA baseadas em polímeros poli (beta aminoester), fáceis de serem adaptados alterando o mRNA encapsulado. O fluxo de trabalho para sintetizar os polímeros, as nanopartículas e sua caracterização essencial in vitro também são descritos. Também é acrescentada uma prova de conceito em relação à imunização.

Síntese e Caracterização de nanopartículas poli-carregadas de mRNA (Beta Aminoesters) para fins de vacinação

Uma nanopartícula de peptídeo-poloxamina auto-montada (PP-sNp) é desenvolvida usando um dispositivo de mistura microfluida para encapsular e fornecer RNA de mensageiro transcrito in vitro . O mRNA/PP-sNp descrito poderia transfetar eficientemente células cultivadas in vitro.

Transfecção eficiente de mRNA transcrito in vitro em células cultivadas usando nanopartículas de peptídeo-poloxamina

Aqui, apresentamos métodos detalhados para a preparação e avaliação da vacina tumoral em nanoemulsão auto-montada nasal in vitro e in vivo.

Preparação, características, toxicidade e avaliação da eficácia da vacina contra tumores em nanoemulsão automontada nasal in vitro e in vivo

Aprenda a administrar vacinas de mRNA intranasais usando aerossóis de quebra de Rayleigh com o modelo AINI. Este método preserva a integridade do mRNA e permite deposição nasal direcionada em células pulmonares humanas.

Administração intranasal de poliplexos de mRNA via aerossóis de quebra de Rayleigh: Um método in vitro para deposição nasal e testes funcionais (Vídeo) | JoVE Journal

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