ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol>
	<li>Alc&#225;zar&#8211;Navarrete, B., Ruiz Rodr&#237;guez, O., Conde Baena, P, Romero Palacios, P. J., Agusti, A. Persistently elevated exhaled nitric oxide fraction is associated with increased risk of exacerbation in COPD. Eur Respir J. 2018;51(1):1701457.</li>
	<li>Krantz, C., Janson, C., Alving, K., Malinovschi, A. Nasal nitric oxide in relation to asthma characteristics in a longitudinal asthma cohort study. Nitric Oxide 2021;106:1&#8211;8.</li>
	<li>Thomas, S. R., Kharitonov, S. A., Scott, S. F., Hodson, M. E., Barnes, P. J. Nasal and exhaled nitric oxide is reduced in adult patients with cystic fibrosis and does not correlate with cystic fibrosis genotype. Chest 2000;117(4):1085&#8211;9.</li>
	<li>Shapiro, A. J. et al. Nasal nitric oxide measurement in primary ciliary dyskinesia. A technical paper on standardized testing protocols. Ann Am Thorac Soc. 2020;17(2):e1&#8211;e12 .</li>
	<li>Legendre, M., Zaragosi, L. E., Mitchison, H. M. Motile cilia and airway disease. Semin Cell Dev Biol. 2021;110:19&#8211;33.</li>
	<li>Li, D., Shirakami, G., Zhan, X., Johns, R. A. Regulation of ciliary beat frequency by the nitric oxide&#8211;cyclic guanosine monophosphate signaling pathway in rat airway epithelial cells. Am J Respir Cell Mol Biol. 2000;23(2):175&#8211;81.</li>
	<li>Rochon, E. R. et al. Cytoglobin regulates NO-dependent cilia motility and organ laterality during development. Nat Commun. 2023;14(1): 8333.</li>
	<li>Mikhailik, A. et al. nNOS regulates ciliated cell polarity, ciliary beat frequency, and directional flow in mouse trachea. Life Sci Alliance 2021;4(5):e202000981.</li>
	<li>Schamberger, A. C., Staab&#8211;Weijnitz, C. A., Mise&#8211;Racek, N., Eickelberg, O. Cigarette smoke alters primary human bronchial epithelial cell differentiation at the air&#8211;liquid interface. Sci Rep. 2015;5:8163.</li>
	<li>Gindele, J. A. et al. Intermittent exposure to whole cigarette smoke alters the differentiation of primary small airway epithelial cells in the air&#8211;liquid interface culture. Sci Rep. 2020;10(1):6257.</li>
	<li>Ghosh, B. et al. Effect of sub-chronic exposure to cigarette smoke, electronic cigarette and waterpipe on human lung epithelial barrier function. BMC Pulm Med. 2020;20(1):216.</li>
	<li>Baldassi, D., Gabold, B., Merkel, O. Air-liquid interface cultures of the healthy and diseased human respiratory tract: promises, challenges and future directions. Adv Nanobiomed Res. 2021;1(6):2000111.</li>
	<li>Bessa, M. J. et al.&#160;In vitro&#160;toxicity of industrially relevant engineered nanoparticles in human alveolar epithelial cells: Air-liquid interface&#160;versus&#160;submerged cultures. Nanomaterials (Basel) 2021;11(12):3225.</li>
	<li>Allouche, Y. et al. Comparison of submerged and air liquid interface exposure: limitations and differences in the toxicological effects evaluated in bronchial epithelial cells. Environ Res. 2025;279(Pt 2):121856.</li>
	<li>Li, J., LoBue, A., Heuser, S. K., Leo, F., Cortese-Krott, M. M. Using diaminofluoresceins (DAFs) in nitric oxide research. Nitric Oxide. 2021;115:44&#8211;54.</li>
	<li>Jiang S. et al. Real&#8211;time electrical detection of nitric oxide in biological systems with sub&#8211;nanomolar sensitivity. Nat Commun. 2013;4:2225.&#160;</li>
	<li>Brown M. D, Schoenfisch M. H. Electrochemical nitric oxide sensors: Principles of design and characterization. Chem Rev. 2019;119(22):11551&#8211;75.</li>
	<li>Corti, P. et al. Globin X is a six-coordinate globin that reduces nitrite to nitric oxide in fish red blood cells. Proc Natl Acad Sci U S A 2016;113(30):8538&#8211;43.</li>
	<li>Zhao, X. J. et al. Mechanisms for cellular NO oxidation and nitrite formation in lung epithelial cells. Free Radic Biol Med. 2013;61:428&#8211;37.</li>
	<li>Lundberg, J. O. Weitzberg E, Gladwin MT. The nitrate-nitrite-nitric oxide pathway in physiology and therapeutics. Nat Rev Drug Discov. 2008;7(2):156&#8211;67.</li>
	<li>Rochon, E. R., Corti, P. Globins and nitric oxide homeostasis in fish embryonic development. Mar Genomics 2020;49:100721.</li>
	<li>Giordano, D., Verde, C., Corti, P. Nitric oxide production and regulation in the teleost cardiovascular system. Antioxidants (Basel) 2022;11(5):957.</li>
	<li>MacArthur, P. H., Shiva, S., Gladwin, M. T. Measurement of circulating nitrite and S&#8211;nitrosothiols by reductive chemiluminescence. J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci. 2007;851(1&#8211;2):93&#8211;105.</li>
	<li>Basu, S., Ricart, K., Gladwin, M. T., Patel, R. P, Kim-Shapiro, D. B. Tri-iodide and vanadium chloride based chemiluminescent methods for quantification of nitrogen oxides. Nitric Oxide 2022;121: 11&#8211;19.</li>
	<li>Brody, S. L., Yan, X. H., Wuerffel, M. K., Song, S. K., Shapiro, S. D. Ciliogenesis and left-right axis defects in forkhead factor HFH-4-null mice. Am J Respir Cell Mol Biol. 2000;23(1): 45&#8211;51.</li>
	<li>Jain, R. et al. Temporal relationship between primary and motile ciliogenesis in airway epithelial cells. Am J Respir Cell Mol Biol. 2010;43(6): 731&#8211;9.</li>
	<li>Eenjes, E. et al. A novel method for expansion and differentiation of mouse tracheal epithelial cells in culture. Sci Rep. 2018;8(1): 7349.</li>
	<li>You, Y., Richer, E. J., Huang, T., Brody, S. L. Growth and differentiation of mouse tracheal epithelial cells: selection of a proliferative population. Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 2002;283(6): L1315&#8211;21.</li>
	<li>Pfeiffer, S., Leopold, E., Schmidt, K., Brunner, F., Mayer, B. Inhibition of nitric oxide synthesis by NG-nitro-L-arginine methyl ester (L-NAME): requirement for bioactivation to the free acid, NG-nitro-L-arginine. Br J Pharmacol 1996;118(6):1433&#8211;40.&#160;</li>
	<li>Rochon, E. R., Corti, P., Gladwin, M. T. Hemoglobin &#945; in Pulmonary Endothelium: Ironing Out Nitric Oxide Signaling. Am J Respir Cell Mol Biol. 2017;57(6):639&#8211;41.</li>
	<li>van Faassen, E. E. et al. Nitrite as regulator of hypoxic signaling in mammalian physiology. Med Res Rev. 2009;29(5):683&#8211;741.&#160;</li>
</ol>

```html
<table><tbody><tr><td>4&prime;,6-Diamidino-2-phenylindole (DAPI)</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>62248</td><td>diluted 1:2000 for immunostaining</td></tr><tr><td>50 mL Centrifuge tube filter (0.22 &micro;m)</td><td>CellTreat</td><td>229710</td><td>Para preparação de soluções estéreis</td></tr><tr><td>500 mL Filter units</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>566-0020</td><td>Para preparação de mídia estéril</td></tr><tr><td>Accutase</td><td>Sigma</td><td>A6964</td><td></td></tr><tr><td>Amphoterecin B</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>15290026</td><td></td></tr><tr><td>Bovine Pituitary Extract</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>13028014</td><td></td></tr><tr><td>Bovine Serum Albumin</td><td>Sigma</td><td>A7906</td><td></td></tr><tr><td>Cholera toxin</td><td>Sigma</td><td>C8052</td><td></td></tr><tr><td>Collagen I</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>A1048301</td><td></td></tr><tr><td>Confocal Microscope</td><td>Nikon</td><td></td><td>W1 Spinning disk Ti2 inverted microscope with Hamamatsu sCMOS camera</td></tr><tr><td>Corning Transwell inserts</td><td>Sigma</td><td>CLS3460</td><td></td></tr><tr><td>Diethylenetriamine NONOate (DETA-NONOate)</td><td>Cayman Chemical</td><td>82120</td><td></td></tr><tr><td>DMEM/F-12 media</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>11330032</td><td></td></tr><tr><td>DNAse I</td><td>Sigma</td><td>DN25</td><td></td></tr><tr><td>Fetal Bovine Serum</td><td>Sigma</td><td>F4135</td><td></td></tr><tr><td>Halt 1X Protease inhibitor cocktail</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>1860932</td><td></td></tr><tr><td>Ham's F1-12 Nutrient mix</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>11765054</td><td></td></tr><tr><td>Insulin solution</td><td>Sigma</td><td>I0516</td><td></td></tr><tr><td>Isoproterenol hydrochloride</td><td>Sigma</td><td>I6504</td><td></td></tr><tr><td>Keratinocyte Serum-free media</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>17005042</td><td></td></tr><tr><td>Murine Epidermal growth factor</td><td>Sigma</td><td>E4127</td><td></td></tr><tr><td>N(G)-Nitro-L-arginine methyl ester (L-NAME)</td><td>Sigma</td><td>N5751</td><td></td></tr><tr><td>NuSerum</td><td>Corning</td><td>355100</td><td></td></tr><tr><td>Penicillin-Streptomycin</td><td>Sigma</td><td>P4333</td><td></td></tr><tr><td>Phosphate buffer saline (PBS)</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>10010023</td><td></td></tr><tr><td>Pierce BCA Protein Assay Kit</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>23227</td><td></td></tr><tr><td>Pronase</td><td>Sigma</td><td>10165921001</td><td></td></tr><tr><td>Retinoic acid</td><td>Sigma</td><td>R2625</td><td></td></tr><tr><td>Rho kinase inhibitor (Y-27632 hydrochloride)</td><td>Cayman Chemical</td><td>TOM-C837Z37</td><td></td></tr><tr><td>RIPA buffer</td><td>Sigma</td><td>R0278</td><td></td></tr><tr><td>RPMI-1640 media</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>11875093</td><td></td></tr><tr><td>Sodium nitrite&nbsp;</td><td>Sigma</td><td>S2252</td><td></td></tr><tr><td>Transferrin</td><td>Sigma</td><td>T8158</td><td></td></tr><tr><td>&alpha;-Acetylated tubulin antibody (mouse)</td><td>Sigma</td><td>T6793</td><td>diluted 1:200 for immunostaining</td></tr><tr><td>&alpha;-FoxJ1 antibody (mouse)</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>14-9965-80</td><td>diluted 1:200 for immunostaining</td></tr><tr><td>&alpha;-mouseCy3 secondary antibody</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>A10521</td><td>diluted 1:1000 for immunostaining</td></tr><tr><td>&gamma;-secretase inhibitor IX (DAPT)</td><td>Sigma</td><td>D5942</td><td></td></tr></tbody></table>
```

medição da produção de óxido nítrico em culturas celulares epiteliais traqueais de camundongos diferenciadas na interface ar-líquido

Measurement of Nitric Oxide Production in Mouse Tracheal Epithelial Cell Cultures Differentiated at the Air Liquid Interface

Medição da produção de óxido nítrico em culturas celulares epiteliais traqueais de camundongos diferenciadas na interface ar-líquido

Airway epithelial cultures differentiated at the air&#8211;liquid interface (ALI) provide a physiologically relevant model to study nitric oxide (NO) ...

measurement-nitric-oxide-production-mouse-tracheal-epithelial-cell

Research

JoVE Journal

Medicine

Medicina

Células epiteliais pulmonares podem ser isolados do trato respiratório de camundongos e cultivadas em ar-líquido interface como um modelo de epitélio respiratório diferenciado. Um protocolo é descrito para o isolamento, cultura e expondo essas células à fumaça de cigarro mainstream, a fim de estudar as respostas moleculares para esta toxina ambiental.

Isolamento de rato células epiteliais respiratórias e exposição à fumaça de cigarro Experimental da Air interface líquido

Camundongos transgênicos têm sido extremamente úteis em atribuir função fisiológica para genes. Como a pesquisa, tal em geral, e estudos funcionais da via aérea, em particular, têm sofrido uma mudança notável na direção modelos murinos. Aqui nós fornecemos os protocolos...

Em medições in vitro de constrição traqueal Utilizando camundongos

A camada de superfície endotelial glicocálice / endotelial está idealmente estudada por microscopia intravital. Microscopia intravital é tecnicamente desafiante em um órgão em movimento, tais como o pulmão. Demonstramos como brightfield simultânea e microscopia de fluorescência pode ser utilizado para estimar a espessura da camada endotelial da superfície em um movimento...

Na medição in vivo da camada superficial do rato pulmonar endotelial

Células epiteliais nasais, obtidas através de biópsia superficial raspar de voluntários humanos, são expandidas e transferido para tecido inserções de cultura. Ao atingir a confluência, as células são cultivadas na interface ar-líquido, obtendo-se culturas de células ciliadas e não ciliadas. Culturas de células epiteliais nasais diferenciados fornecem modelos experimentais para o estudo de viáveis ​​da mucosa respiratória.

A cultura de células epiteliais nasais Humano na interface ar líquido

Neste artigo, células endoteliais primárias do pulmão foram isoladas e cultivadas de camundongos neonatais.

Isolamento de Células Endoteliais Primárias de Pulmão de Camundongo

Os recentes avanços nos protocolos de diferenciação de células-tronco pluripotentes induzidos pelo homem permitem a derivação stepwise de tipos celulares específicos de órgãos. Aqui, fornecemos etapas detalhadas para a manutenção e expansão das células basais derivadas das vias aéreas derivadas do iPSC e sua diferenciação em um epitélio mucociliary em culturas de interface ar-líquido.

Geração de culturas de interface ar-líquido de células epiteliais das vias aéreas a partir de células-tronco pluripotentes humanas

Apresentamos aqui um método reprodutível, acessível e robusto para o isolamento e expansão de células epiteliais brônquicas primárias para biobanco de longo prazo e geração de células epiteliais diferenciadas por cultura na interface ar-líquido.

Isolando Células Epiteliais Brônquicas de Tecido Pulmonar Ressecado para Biobanco e Estabelecendo Culturas de Interface Ar-Líquido Bem Diferenciadas

Aqui, descrevemos um modelo in vitro para isolar e diferenciar células epiteliais das vias aéreas murinas, com foco em sua aclimatação ao extrato de fumaça de cigarro crônico (CSE). O modelo pode ser utilizado para caracterizar de forma abrangente o impacto multi-ômico do CSE, o que possivelmente fornece informações sobre as respostas celulares sob exposição crônica à fumaça.

Modelo in vitro para estudo da diferenciação e alterações de multiômicas em células epiteliais das vias aéreas murinas estimuladas com extrato de fumaça de cigarro

A cultura de interface ar-líquido é comumente usada para desenvolver epitélio pseudoestratificado das vias aéreas, diferenciando células epiteliais brônquicas humanas normais primárias que imitam o lado apical das vias aéreas pulmonares. Aqui, descrevemos um protocolo fácil para determinar sua qualidade monitorando suas propriedades biofísicas, como função ciliar e integridade da membrana.

Determinando a função ciliar e a impermeabilidade da membrana do epitélio pseudoestratificado das vias aéreas pulmonares

A produção endógena de óxido nítrico (NO) regula uma grande variedade de funções biológicas. Está se tornando cada vez mais claro que a ruptura ou desregulagem de sinalização NO base está envolvida em muitas doenças humanas. Os métodos para quantificar relevante metabólitos podem fornecer novos biomarcadores de diagnóstico ou de prognóstico para a doença humana.

Técnicas Analíticas para ensaiar Bioatividade Óxido Nítrico

University of Maryland School of Medicine.  Este protocolo descreve um método para quantificar a produção de óxido nítrico (NO) em culturas epiteliais das vias aéreas diferenciadas na interface ar-líquido (ALI), medindo nitrito em secreções apicais usando um ensaio de quimioluminescência baseado em triiodeto.

Medição da produção de óxido nítrico em culturas celulares epiteliais traqueais de camundongos diferenciadas na interface ar-líquido

Explorar mais vídeos