Name: In Vivo Imagem de Cálcio com Microscópio Miniaturizado no Hipotálamo para Compreensão de Comportamentos Sociais em Camundongos (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-03-20T14:10:00.000+00:00
Duration: 6 min 13 s
Description: Aprenda a realizar imagem de cálcio in vivo no núcleo pré-ótico medial do hipotálamo de camundongos usando miniscópio montado na cabeça. Este método permite estudar a necessidade social e saciedade com resolução de neurônio único em animais em comportamento livre.

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<ol><li>Beery, A. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Frank+Beach+award+winner%3A+Neuroendocrinology+of+group+living%5BTitle%5D)+AND+%22Horm+Behav%22%5BJournal%5D)">Frank Beach award winner: Neuroendocrinology of group living.</a> Horm Behav. 107, 67-75 (2019).</li>
<li>Krause, J., Ruxton, G. D. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aKrause%2C+J+%22Living+in+groups%22">Living in groups</a>. , Oxford University Press. (2002).</li>
<li>Riters, L. V., Kelm Nelson, C. A., Spool, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Why+do+birds+flock%3F+A+role+for+opioids+in+the+reinforcement+of+gregarious+social+interactions%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Physiol%22%5BJournal%5D)">Why do birds flock? A role for opioids in the reinforcement of gregarious social interactions.</a> Front Physiol. 10, 421(2019).</li>
<li>Panksepp, J. B., Lahvis, G. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Social+reward+among+juvenile+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Genes+Brain+Behav%22%5BJournal%5D)">Social reward among juvenile mice.</a> Genes Brain Behav. 6 (7), 661-671 (2007).</li>
<li>Matthews, G. A., Tye, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neural+mechanisms+of+social+homeostasis%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+N+Y+Acad+Sci%22%5BJournal%5D)">Neural mechanisms of social homeostasis.</a> Ann N Y Acad Sci. 1457 (1), 5-25 (2019).</li>
<li>Lee, C. R., Chen, A., Tye, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+neural+circuitry+of+social+homeostasis%3A+Consequences+of+acute+versus+chronic+social+isolation%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">The neural circuitry of social homeostasis: Consequences of acute versus chronic social isolation.</a> Cell. 184 (6), 1500-1516 (2021).</li>
<li>Liu, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+hypothalamic+circuit+underlying+the+dynamic+control+of+social+homeostasis%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">A hypothalamic circuit underlying the dynamic control of social homeostasis.</a> Nature. 640 (8060), 1000-1010 (2025).</li>
<li>Luquet, S., Perez, F. A., Hnasko, T. S., Palmiter, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((NPY%2FAgRP+neurons+are+essential+for+feeding+in+adult+mice+but+can+be+ablated+in+neonates%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">NPY/AgRP neurons are essential for feeding in adult mice but can be ablated in neonates.</a> Science. 310 (5748), 683-685 (2005).</li>
<li>Balthasar, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Leptin+receptor+signaling+in+POMC+neurons+is+required+for+normal+body+weight+homeostasis%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Leptin receptor signaling in POMC neurons is required for normal body weight homeostasis.</a> Neuron. 42 (6), 983-991 (2004).</li>
<li>Zimmerman, C. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Thirst+neurons+anticipate+the+homeostatic+consequences+of+eating+and+drinking%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Thirst neurons anticipate the homeostatic consequences of eating and drinking.</a> Nature. 537 (7622), 680-684 (2016).</li>
<li>Augustine, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hierarchical+neural+architecture+underlying+thirst+regulation%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Hierarchical neural architecture underlying thirst regulation.</a> Nature. 555 (7695), 204-209 (2018).</li>
<li>Allen, W. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Thirst-associated+preoptic+neurons+encode+an+aversive+motivational+drive%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Thirst-associated preoptic neurons encode an aversive motivational drive.</a> Science. 357 (6356), 1149-1155 (2017).</li>
<li>Ghosh, K. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Miniaturized+integration+of+a+fluorescence+microscope%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">Miniaturized integration of a fluorescence microscope.</a> Nat Methods. 8 (10), 871-878 (2011).</li>
<li>Gulati, S., Cao, V. Y., Otte, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multi-layer+cortical+Ca2%2B+imaging+in+freely+moving+mice+with+prism+probes+and+miniaturized+fluorescence+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Multi-layer cortical Ca2+ imaging in freely moving mice with prism probes and miniaturized fluorescence microscopy.</a> J Vis Exp. (124), (2017).</li>
<li>Lee, H. S., Han, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Successful+in+vivo+calcium+imaging+with+a+head-mount+miniaturized+microscope+in+the+amygdala+of+freely+behaving+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Successful in vivo calcium imaging with a head-mount miniaturized microscope in the amygdala of freely behaving mouse.</a> J Vis Exp. (162), (2020).</li>
<li>Burrows, R., Ma, C. H., Sun, Y. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+imaging+of+identified+neural+populations+using+microprisms+in+freely+moving+and+head-fixed+animals%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Long-term imaging of identified neural populations using microprisms in freely moving and head-fixed animals.</a> J Vis Exp. (203), (2024).</li>
<li>Zhou, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficient+and+accurate+extraction+of+in+vivo+calcium+signals+from+microendoscopic+video+data%5BTitle%5D)+AND+%22eLife%22%5BJournal%5D)">Efficient and accurate extraction of in vivo calcium signals from microendoscopic video data.</a> eLife. 7, e28728(2018).</li>
<li>Britten, K. H., Shadlen, M. N., Newsome, W. T., Movshon, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+analysis+of+visual+motion%3A+a+comparison+of+neuronal+and+psychophysical+performance%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">The analysis of visual motion: a comparison of neuronal and psychophysical performance.</a> J Neurosci. 12 (12), 4745-4765 (1992).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>AAV2/9-hSyn-jGCaMP7f-WPRE-pA</td><td>Taitool</td><td>S0587-9</td><td>Vetores virais, cirurgia</td></tr><tr><td>Esponja de Gelatina Hemostática Absirbável</td><td>FUKANGSEN</td><td>FKS-A</td><td>Cirurgia</td></tr><tr><td>Solução de betadina (10% iodadoPovidona) 500mL</td><td>HYNAUT</td><td>Q13702855HNW002</td><td>Cirurgia</td></tr><tr><td>Câmera para vídeo comportamental</td><td>DAHENG</td><td>MER2-160-227-U3C</td><td>Comportamento</td></tr><tr><td>Carprofeno</td><td>MCE</td><td>HY-B1227</td><td>Cirurgia</td></tr><tr><td>Instrumentos Estereotaxicos Digitais</td><td>RWD</td><td>68803</td><td>Cirurgia</td></tr><tr><td>Etanol (75%)</td><td>Reagente químico Sinopharm Co.,Ld</td><td>801769610</td><td>Cirurgia</td></tr><tr><td>Pomada para os Olhos</td><td>FODU</td><td>H37022025</td><td>Cirurgia</td></tr><tr><td>Software de Processamento de Dados Inscopix (IDPS)</td><td>Inscopix</td><td>1000-006551</td><td>Análise de Dados</td></tr><tr><td>Isoflurano</td><td>RWD</td><td>R510-22-10</td><td>Cirurgia</td></tr><tr><td>Pacote adesivo Kwik-Sil de 2</td><td>Instrumentos de Precisão Mundial</td><td>KWIK-SIL</td><td>Cirurgia</td></tr><tr><td>Microdrill</td><td>RWD</td><td>78001</td><td>Cirurgia</td></tr><tr><td>Puxador de Micropipeta MP-1000</td><td>RWD</td><td>MP-1000</td><td>Cirurgia</td></tr><tr><td>Soluções Multifuncionais de Anestesia Animal</td><td>RWD</td><td>TAIJI-IE</td><td>Cirurgia</td></tr><tr><td>Bomba de Microinjeção de Nanolitros</td><td>RWD</td><td>R-480</td><td>Cirurgia</td></tr><tr><td>Miniscópio nVista 3.0</td><td>Inscopix</td><td>1000-004323</td><td>Imagem</td></tr><tr><td>Pinça oftalmótrica</td><td>RWD</td><td>F12006-10</td><td>Cirurgia</td></tr><tr><td>Tesouras de Operação</td><td>RWD</td><td>S14001-15</td><td>Cirurgia</td></tr><tr><td>Kit de Implante ProView</td><td>Inscopix</td><td>1000-004238</td><td>Cirurgia e Imagem</td></tr><tr><td>Cimento de resina (Super-bond)</td><td>Sun Medical</td><td>Super Bond C & B</td><td>Cirurgia</td></tr><tr><td>Conjunto de 5 tampas de base</td><td>Inscopix</td><td>1050-004639</td><td>Imagem</td></tr><tr><td>Conjunto de 5 placas base</td><td>Inscopix</td><td>1050-004638</td><td>Imagem</td></tr><tr><td>Conjunto de 5 lentes GRIN, 0,6mm de diâmetro, 7,3mm de comprimento</td><td>Inscopix</td><td>1050-004626</td><td>Cirurgia e Imagem</td></tr><tr><td>Microscópio Estereotaxia</td><td>Murzider</td><td>MSD205A</td><td>Cirurgia</td></tr><tr><td>Solução salina estéril</td><td>QIDUKELIN</td><td>R1B25071902</td><td>Cirurgia</td></tr></tbody></table>

in vivo imagem de cálcio com microscópio miniaturizado no hipotálamo para compreensão de comportamentos sociais em camundongos

In Vivo Calcium Imaging with a Miniaturized Microscope in the Hypothalamus for Understanding Social Behaviors in Mice

In Vivo Imagem de Cálcio com Microscópio Miniaturizado no Hipotálamo para Compreensão de Comportamentos Sociais em Camundongos

Social behavior in vertebrates is tightly regulated through hypothalamic circuits. Molecularly defined hypothalamic neuron types were recently identified ...

in-vivo-calcium-imaging-with-miniaturized-microscope-hypothalamus-for

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Neurociência

Para entender a dinâmica da rede de microcircuitos no neocórtex, é essencial para gravar simultaneamente a atividade de um grande número de neurônios. In-vivo de dois fótons de imagens de cálcio é o único método que permite registrar a atividade de uma densa população neuronal com uma única célula de resolução.

Vivo em 2-Photon Imagens de cálcio na camada 2 / 3 dos Ratos

Fonte: Lee, H. et. al., Imagem de cálcio in vivo bem-sucedida com um microscópio miniaturizado montado na cabeça na amígdala de um camundongo que se comporta livremente. J. Vis. Exp. (2020)Este vídeo demonstra imagens de cálcio in vivo em um camundongo usando um índice de refração gradiente, ou lente GRIN, e um microscópio miniaturizado. A configuração combina a fixação da cabeça dentro de um sistema de gaiola móvel sem atrito, estimulando os neurônios e desencadeando o influxo de íons de...

Imagem microendoscópica de cálcio em tempo real em um camundongo que se move livremente

Fonte: Thapa, R., et. al., Injeção Viral Estereotáxica e Implante de Lente de Índice de Gradiente para Imagem de Cálcio Cerebral Profundo In Vivo.  J. Vis. Exp. (2021)O vídeo demonstra imagens de cálcio em tempo real usando um miniscópio em um camundongo transduzido, correlacionando a atividade neuronal com o comportamento.

Imagem de cálcio em tempo real de um córtex pré-frontal medial de camundongo usando um miniscópio

Aqui nós descrevemos os procedimentos experimentais envolvidos em dois fótons de imagem de rato córtex durante o comportamento em um ambiente de realidade virtual.

Dois fótons de imagem de cálcio em camundongos Navegando um ambiente da realidade virtual

Aqui, apresentamos um procedimento para a realização de imagens de Ca 2 + em larga escala com resolução celular em múltiplas camadas corticais em camundongos que se movem livremente. Centenas de células ativas podem ser observadas simultaneamente usando um microscópio em miniatura montado na cabeça acoplado com uma sonda de prisma implantada.

Multi-layer Cortical Ca<sup&gt; 2+</sup&gt; Imaging em ratos com movimento livre com sondas de prisma e microscopia de fluorescência miniaturizada

A imagem microendoscópica de cálcio in vivo é uma ferramenta inestimável que permite o monitoramento em tempo real das atividades neuronais em animais de comportamento livre. No entanto, aplicar essa técnica à amígdala tem sido difícil. Este protocolo visa fornecer uma diretriz útil para atingir com sucesso células de amígdala com um microscópio miniaturizado em camundongos.

Imagem de cálcio in vivo bem sucedida com um microscópio miniaturizado de head-mount na Amígdala do Rato Livremente Comportado

Apresentamos um protocolo para expor o tronco cerebral do rato adulto do lado ventral. Usando uma lente de índice gradiente-refrativo com um microscópio em miniatura, a imagem de cálcio pode ser usada para examinar a atividade de somata neural inferior de oliva in vivo.

In vivo Imagem de cálcio em rato de azeitona inferior

Este artigo demonstra a preparação de uma janela de imagem personalizada complementada com cânula de infusão e sua implantação na região ca1 do hipocampo em camundongos.

Procedimento de craniotomia para visualizar atividades neuronais no hipocampo de ratos comportadores

Miniscópio em imagem de cálcio vivo é uma técnica poderosa para estudar dinâmica neuronal e microcircuitos em camundongos que se comportam livremente. Este protocolo descreve a realização de cirurgias cerebrais para obter uma boa imagem in vivo de cálcio usando um miniscópio.

Injeção viral esteretaxica e implantação de lente de índice de gradiente para imagem de cálcio no cérebro profundo em vivo

O giro dentado do hipocampo desempenha funções essenciais e distintas na aprendizagem e na memória. Este protocolo descreve um conjunto de procedimentos robustos e eficientes para imagens de cálcio in vivo de células granulares no giro dentado em camundongos em movimento livre.

Imagem de cálcio in vivo de células granulares no giro dentado do hipocampo em camundongos 

Este protocolo investiga a relação cérebro-comportamento no hipocampo CA1 em camundongos navegando em uma pluma de odor. Fornecemos um protocolo passo a passo, incluindo cirurgia para acessar imagens do hipocampo, treinamento comportamental, gravação e processamento do cérebro do miniscope GCaMP6f e dados comportamentais para decodificar a posição do mouse a partir da atividade neural do ROI.

Miniscope registrando sinais de cálcio no hipocampo de camundongos navegando em uma pluma de odor

Aprenda a realizar imagem de cálcio in vivo no núcleo pré-ótico medial do hipotálamo de camundongos usando miniscópio montado na cabeça. Este método permite estudar a necessidade social e saciedade com resolução de neurônio único em animais em comportamento livre.

In Vivo Imagem de Cálcio com Microscópio Miniaturizado no Hipotálamo para Compreensão de Comportamentos Sociais em Camundongos

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