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<ol><li>Bate, M., Martinez Arias, A. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aCohen%2C+SM+%22The+development+of+Drosophila+melanogaster%22">The development of Drosophila melanogaster</a>. , CSHL Press. 747-841 (1993).</li>
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<li>Klein, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunolabeling+of+imaginal+discs%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Immunolabeling of imaginal discs.</a> Methods Mol Biol. 420, 253-263 (2008).</li>
<li>Phalle Bde, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunostaining+of+whole-mount+imaginal+discs%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Immunostaining of whole-mount imaginal discs.</a> Methods Mol Biol. 247, 373-387 (2004).</li>
<li>Morimoto, K., Tamori, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induction+and+diagnosis+of+tumors+in+Drosophila+imaginal+disc+epithelia%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Induction and diagnosis of tumors in Drosophila imaginal disc epithelia.</a> J Vis Exp. (125), e55901(2017).</li>
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</ol>

<table><tbody><tr><td>Fosfato dissódico</td><td>Fisher</td><td>7558-79-4</td><td>Na2HPO4 - fosfato de sódio dibásico anidro. Outros estados de hidratação podem ser usados, mas mudam o peso molecular</td></tr><tr><td>Pinça: Dumont #5 Pinça Biologie</td><td>Ferramentas científicas finas</td><td>11252-20</td><td>Estilo: #5</td></tr><tr><td>&nbsp; &nbsp;</td><td>&nbsp; &nbsp; &nbsp;</td><td>&nbsp; &nbsp;</td><td>Formato da Ponta: Reta</td></tr><tr><td>&nbsp; &nbsp; &nbsp;</td><td>&nbsp; &nbsp; &nbsp;</td><td>&nbsp; &nbsp; &nbsp;</td><td>Comprimento: 11cm</td></tr><tr><td>&nbsp; &nbsp;</td><td>&nbsp; &nbsp; &nbsp;</td><td>&nbsp; &nbsp;</td><td>Autoclave Safe: Sim</td></tr><tr><td>&nbsp; &nbsp;</td><td>&nbsp; &nbsp; &nbsp;</td><td>&nbsp; &nbsp;</td><td>Dicas: Biologia</td></tr><tr><td>&nbsp; &nbsp;</td><td>&nbsp; &nbsp; &nbsp;</td><td>&nbsp; &nbsp;</td><td>Dimensões da Ponta:</td></tr><tr><td>&nbsp; &nbsp;</td><td>&nbsp; &nbsp;</td><td>&nbsp; &nbsp;</td><td>0,05 x 0,02mm</td></tr><tr><td>&nbsp; &nbsp;</td><td>&nbsp; &nbsp; &nbsp;</td><td>&nbsp; &nbsp;</td><td>Liga / Material: Inox</td></tr><tr><td>Formaldeído</td><td>Fisher</td><td>BP531-500</td><td>Grau em biologia molecular, 37% de formaldeído. 500ml</td></tr><tr><td>Fixador de Formaldeído</td><td>Fisher</td><td>BP531-500</td><td>3,7% de formaldeído em 0,1M de tampão fosfato de sódio pH7,2 produzido por diluição a partir de 37% de estoque.</td></tr><tr><td>Glicerol</td><td>Biorreagentes Fisher</td><td>BP229-1</td><td></td></tr><tr><td>Gelo</td><td>Preferência do Usuário</td><td></td><td></td></tr><tr><td>L-Lisina, 98%</td><td>Termociência</td><td>J62225.22</td><td></td></tr><tr><td>mAb40-1</td><td>DHSB</td><td>40-1a-s</td><td>Anti-beta galactosidase</td></tr><tr><td>Tubos microcentrífugas</td><td>Ciência dos EUA</td><td>1615-5520</td><td>Tubos de 1,5mL para armazenar amostras.</td></tr><tr><td>Tesouras de microdissecação</td><td>Ferramentas Científicas Finas</td><td>15003-08</td><td>Borda de corte de 5mm, ponta reta, 8,5cm</td></tr><tr><td>Fosfato Monossódico</td><td>Fisher</td><td>7558-80-7</td><td>NaH2PO4 - Fosfato de Sódio Monobásico Anidro. Se for usada uma forma hidratada, o peso necessário para fazer uma solução de 0,1M variaria.</td></tr><tr><td>Meio de Montagem</td><td></td><td></td><td>Solução de glicerol a 75% em 0,1M fosfato de sódio tampão pH7,2 com 2,5% de n-propila galato. Misture por inversão para minimizar bolhas.</td></tr><tr><td>NSG</td><td></td><td></td><td>0,1M fosfato de sódio tampão pH7,2, 0,1% saponina, 5% NGS</td></tr><tr><td>N-propilo galato</td><td>MP Biomédicos</td><td>210274780</td><td></td></tr><tr><td>Esmalte</td><td>Ted Pella, Comprado de Fisher</td><td>NC0381432</td><td>Para lâminas de vedação</td></tr><tr><td>Suporte de agulha</td><td>Fisher</td><td>NC0099380</td><td>Para microdissecar agulhas. Aço inoxidável oco; comprimento do cabo: 4 3/4" de comprimento</td></tr><tr><td>Mini Trays Microwell Nunc</td><td>Termo Científica</td><td>12565155</td><td>MicroWell MiniTray para aplicações sorológicas. Contagem de poços 60</td></tr><tr><td>Parafilm</td><td>StatLab</td><td>PM996</td><td>StatLab ParaFilm M Filme Flexível Auto-Selante</td></tr><tr><td>Paraformaldeído</td><td>Polysciences, Inc.</td><td>00380-250</td><td></td></tr><tr><td>10x PBS</td><td>Preferência do Usuário</td><td></td><td>Prepare 800 mL de água destilada em um recipiente adequado.</td></tr><tr><td>&nbsp; &nbsp;</td><td>&nbsp; &nbsp;</td><td>&nbsp; &nbsp; &nbsp;</td><td>Adicione 1,37M de cloreto de sódio à solução.</td></tr><tr><td>&nbsp; &nbsp; &nbsp;</td><td>&nbsp; &nbsp; &nbsp;</td><td>&nbsp; &nbsp;</td><td>Adicione 26,8 mM de cloreto de potássio à solução.</td></tr><tr><td>&nbsp; &nbsp; &nbsp;</td><td>&nbsp; &nbsp; &nbsp;</td><td>&nbsp; &nbsp;</td><td>Adicione 101mM de Dibásico de Fosfato de Sódio à solução.</td></tr><tr><td>&nbsp; &nbsp;</td><td>&nbsp; &nbsp;</td><td>&nbsp; &nbsp;</td><td>Adicione 18,0 mM de Monobásico de Fosfato de Potássio à solução.</td></tr><tr><td>&nbsp; &nbsp;</td><td>&nbsp; &nbsp;</td><td>&nbsp; &nbsp;</td><td>Ajuste a solução para o pH desejado (tipicamente pH &assínpita; 7,4).</td></tr><tr><td>&nbsp; &nbsp; &nbsp;</td><td>&nbsp; &nbsp;</td><td>&nbsp; &nbsp;</td><td>Adicione água destilada até o volume chegar a 1 L.</td></tr><tr><td>PBT</td><td>Preferência do Usuário</td><td></td><td>0,1M de fosfato de sódio tampão pH7,2, 0,1% de albumina sérica bovina e 0,2% Triton X-100.</td></tr><tr><td>PDT</td><td>Preferência do Usuário</td><td></td><td>0,1M de tampão fosfato de sódio (pH = 7,2), 0,3% desoxicolato e 0,3% Triton x-100</td></tr><tr><td>Placa de Petri</td><td>Falcon</td><td>Corning 351007</td><td>Placa de Petri; 60mm; não tratado</td></tr><tr><td>Placa de Petri</td><td>Falcon</td><td>Corning 351008</td><td>Placa de Petri; 35mm; não tratado</td></tr><tr><td>Alicate</td><td>Preferência do Usuário</td><td></td><td></td></tr><tr><td>PLP</td><td>N/A</td><td></td><td>2% de paraformaldeído 1,35% de lisina em 0,05M fosfato de sódio tampão pH7,2</td></tr><tr><td>Anticorpos Secundários</td><td>Jackson ImmunoResearch</td><td>715-545-151</td><td>0,5mg Alexa Fluor 488 Donkey Anti-Mouse IgG.</td></tr><tr><td>Tampas de Slides</td><td>VWR</td><td>48393-172</td><td>VWR Coverglass #1.5 22x40 (CAIXA)</td></tr><tr><td>Slides</td><td>Fisher</td><td>125442</td><td>Fisher Glass Slides 10bx/CS</td></tr><tr><td>Desoxicolato de sódio</td><td>Ciência Termodinâmica Fisher</td><td>89904</td><td>detergente desoxicolato de sódio; 5mg</td></tr><tr><td>Periodato de sódio</td><td>Sigma Aldrich</td><td>71859-25G</td><td>Periodato de sódio &ndash; 25 gramas</td></tr><tr><td>Tamponador de fosfato de sódio</td><td></td><td></td><td>0,1M do tampão NaPO4 pH 7,2. Misture 28ml de estoque fosfato monossódico anyhdrous de 0,1M (11,998g NaH2PO4 a 1L de água destilada) com 72ml de 0,1M de fosfato dissódico qualquer (14,196g Na2HPO4 a 1L de água destilada) para gerar 100ml de tampão de 0,1M NaPO4. Alternativamente, pode ser usado PBS.</td></tr><tr><td>Fio de tungstênio</td><td>Ted Pella</td><td>27-11</td><td>.005" Dia.</td></tr><tr><td>Triton x-100</td><td>Ciência Termodinâmica Fisher</td><td>A16046AE</td><td></td></tr><tr><td>Vórtice</td><td>Preferência do Usuário</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

dissecação em pequena escala e coloração por anticorpos de discos imaginários antenas oculares e das asas de drosophila melanogaster

Small Scale Dissection and Antibody Staining of Eye-Antennal and Wing Imaginal Discs from Drosophila melanogaster

Dissecação em pequena escala e coloração por anticorpos de discos imaginários antenas oculares e das asas de Drosophila melanogaster

Drosophila imaginal discs have long been studied as models of epithelial development, patterning, and regeneration. Antibody labeling and imaging of ...

small-scale-dissection-antibody-staining-eye-antennal-wing-imaginal

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Biologia do Desenvolvimento

Aqui nós descrevemos um protocolo para analisar a migração de células gliais no olho Drosophila desenvolvimento, utilizando análise microscópica ao vivo emparelhado com GFP tag células gliais.

Imagens ao vivo da migração das células da glia no Disco Drosophila Eye Imaginal

Nós descrevemos um romance vermelho proteína fluorescente repórter (RFP) que se expressa especificamente...

A Novel Reporter RFP para ajudar na visualização do Disco Imaginal Eye em Drosophila</em

Dissecção e imunohistoquímica de larvas, pupa e adulto<em&gt; Drosophila</em&gt; Retinas

Ao corar discos imaginais de Drosophila, muitas vezes é realizada uma dissecção grosseira onde os discos são expostos, mas permanecem presos ao corpo. Uma vez corados, os discos de interesse são isolados e montados. O protocolo de exemplo demonstra um procedimento para dissecção e montagem do disco imaginal da asa.

drosófila Dissecção de disco imaginal de larvas: um método para observar o desenvolvimento de epitélios

As estruturas adultas de Drosophila são derivadas de estruturas semelhantes a sacos chamadas discos imaginais. A análise desses discos fornece informações sobre muitos processos de desenvolvimento, incluindo determinação de tecidos, estabelecimento de limites de compartimentos, proliferação celular, especificação do destino celular e polaridade celular planar. Este protocolo é usado para preparar discos imaginais para microscopia de luz / fluorescente.

Dissecção e Imunocoloração do Imaginário discos de Drosophila melanogaster

O objetivo desta técnica é permitir que os pesquisadores realizem dissecação, imunocoloração e montagem de discos oculares de Drosophila melanogaster de qualquer idade.

Dissecção e montagem de<em&gt; Drosophila</em&gt; pupais Discos Eye

Este protocolo demonstra como gerar tumores clonais fluorescente marcada, geneticamente definidas no Drosophila olho / discos imaginais antenares (DAE). Ele descreve como dissecar o EAD e do cérebro a partir do terceiro larvas e como processá-los para visualizar e quantificar as mudanças de expressão gênica e invasão tumoral.

o<em&gt; Drosophila</em&gt; Imaginal Modelo Disc Tumor: visualização e quantificação da expressão gênica e invasão tumoral Usando Mosaicos Genéticos

Este protocolo descreve a dissecção e imunocoloração de adultos Drosophila melanogaster tecidos do cérebro. Especificamente, este protocolo destaca o uso da Drosophila cogumelo corpo e fotoreceptor neurônios como subconjuntos neuronal de exemplo que podem ser usados com precisão para descobrir princípios gerais subjacentes a muitos aspectos do desenvolvimento neuronal.

Dissecção e imunofluorescência coloração de cogumelo corpo e fotoreceptor neurônios em cérebros adultos Drosophila melanogaster

Aqui, apresentamos um protocolo para estágio e dissecar a desenvolver o tecido olfativo de espécies de Drosophila . O tecido dissecado mais tarde pode ser usado para análises moleculares, como quantitativa de RT-PCR (Reverse transcrição-Polymerase Chain Reaction) ou RNA sequenciamento (RNAseq), bem como na vivo de análise como a imuno-histoquímica ou em situ hibridização.

Preparando a desenvolver tecido olfativo periférico para Molecular e análise imuno-histoquímica em Drosophila

Este trabalho apresenta um método cirúrgico para dissecando Drosophila pupal retina juntamente com protocolos para o processamento de tecido para extração de RNA, análise ocidental e imuno-histoquímica.

Dissecação da Retina Pupal drosófila para imuno-histoquímica, análise ocidental e isolamento de RNA

Drosophila é um modelo poderoso para entender os mecanismos fundamentais da miogênese. Este protocolo para a dissecção e preparação de hemissecções de tórax permite a análise microscópica do músculo de voo indireto dos estágios pupal e adulto. Este protocolo permite imagens confocais da morfologia celular, localização de proteínas, estrutura muscular e vários outros aspectos da miogênese.

Dissecção de músculos de voo indireto de Drosophila melanogaster para abordagens de microscopia

University of California, Irvine.  Este artigo descreve um protocolo eficiente de dissecação imaginária de discos e coloração de anticorpos, econômico com reagentes e facilita o manuseio de discos imaginários em pequenas quantidades.

Dissecação em pequena escala e coloração por anticorpos de discos imaginários antenas oculares e das asas de Drosophila melanogaster

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