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<table><tbody><tr><td>Amphotericin B</td><td>Gibco (Thermo Fisher Scientific)</td><td>15290018</td><td>Final concentration:&nbsp;1,25&nbsp;&mu;g/mL</td></tr><tr><td>Autologous serum, rabbit (AS)</td><td>Prepared in-house</td><td>-</td><td>Prepared from whole blood; filtered through&nbsp;0,22 &mu;m&nbsp;PES</td></tr><tr><td>Blue LED curing lamp</td><td>Woodpecker Medical Instrument Co</td><td>LED.C model</td><td>Wavelength:&nbsp;&lambda;=420&ndash;480&nbsp;nm; Distance:&nbsp;1&ndash;2&nbsp;cm; Light output: 850-1000 mW/cm2</td></tr><tr><td>Buprenorphine (Buprecare)</td><td>Ecuphar</td><td>578950</td><td>Dose:&nbsp;0,05&nbsp;mg/kg, subcutaneous injection every&nbsp;12&nbsp;h&nbsp;for&nbsp;72&nbsp;h</td></tr><tr><td>Camera</td><td>Panasonic</td><td>LUMIX TZ35</td><td>Camera equipped with Leica optics</td></tr><tr><td>Cimarec Digital Stirring Hotplate</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>SP131320-33</td><td>220-240 V, Max temperature: 540 &deg;C</td></tr><tr><td>Crescent microsurgical blade</td><td>BVI Medical</td><td>373807</td><td>-</td></tr><tr><td>DMEM (Dulbecco&rsquo;s Modified Eagle Medium)</td><td>Gibco (Thermo Fisher Scientific)</td><td>11966025</td><td>-</td></tr><tr><td>Eppendorf tubes (0.2 mL)</td><td>Merck KGaA</td><td>30124707</td><td>Kept cold for HAMe prep; aliquoting</td></tr><tr><td>Eppendorf tubes (5 mL)</td><td>Merck KGaA</td><td>30119606</td><td>Kept cold for HAMe prep; aliquoting</td></tr><tr><td>Fluorescein solution&nbsp;</td><td>Novartis</td><td>Colorcusi Fluotest</td><td>2% Fluorescein solution, 5 &micro;l eye drops</td></tr><tr><td>Gibco Neomycin</td><td>Merck KGaA</td><td>N1142</td><td>Final concentration:&nbsp;50&nbsp;&mu;g/mL</td></tr><tr><td>Gelatin powder</td><td>Sigma Aldrich</td><td>G1890</td><td>Dissolved at&nbsp;80 &deg;C; pH adjusted to 7.0</td></tr><tr><td>Hyaluronic acid artificial tears (0.2%)</td><td>Chem.-pharm. Fabrik GmbH</td><td>Hylo-Tear</td><td>-</td></tr><tr><td>ImageJ image processing software</td><td>National Institute of Mental Health</td><td>-</td><td>Developed by Wayne Rasband at the Research Services Branch</td></tr><tr><td>Ketamine (Ketolar)</td><td>Pfizer</td><td>631028.1</td><td></td></tr><tr><td>Lidocaine</td><td>Vet One</td><td>NDC 13985-222-04</td><td>Topical or subcutaneous injection</td></tr><tr><td>Penicillin&ndash;Streptomycin</td><td>Gibco (Thermo Fisher Scientific)</td><td>15140-122</td><td>Final concentration:&nbsp;50&nbsp;&mu;g/mL</td></tr><tr><td>PES syringe filters,&nbsp;0.22&thinsp;&mu;m0.22&mu;m&nbsp;(Millex)</td><td>Merck KGaA</td><td>SLGP033RS</td><td>-</td></tr><tr><td>Phosphate-buffered saline (PBS)</td><td>Sigma Aldrich</td><td>P4417-100TAB</td><td>-</td></tr><tr><td>Protease inhibitor cocktail</td><td>Sigma Aldrich</td><td>P8340</td><td>Added at&nbsp;5&nbsp;&mu;L&nbsp;per&nbsp;mg&nbsp;tissue</td></tr><tr><td>Povidone-iodine solution</td><td>Meda pharma</td><td>7167204</td><td>Preoperative disinfection</td></tr><tr><td>Riboflavin phosphate (RFP)</td><td>Sigma Aldrich</td><td>R0630000</td><td>Concentrations:&nbsp;0,01%&nbsp;w/v&nbsp;(final);&nbsp;0,02%&nbsp;w/v&nbsp;(stock)</td></tr><tr><td>Sonicator</td><td>Bandelein electronic</td><td>Sonoplus GM mini20</td><td>-</td></tr><tr><td>Sonicator probe</td><td>Bandelein electronic</td><td>MS 1.5</td><td>1.5 mm dimater probe, 63 mm length.</td></tr><tr><td>Tarsorrhaphy sutures (non-absorbable)</td><td>Alcon&nbsp;</td><td>8065308001</td><td>1&ndash;2 sutures as needed</td></tr><tr><td>Tobramycin ophthalmic solution (3 mg/mL)</td><td>Novartis</td><td>Tobrex</td><td>Dosing: twice daily until closure</td></tr><tr><td>Hessburg-Barron trephine, 6.5&nbsp;mm diameter</td><td>Jedmed</td><td>21-8265</td><td>-</td></tr><tr><td>Vacutainer blood collection tubes with polymer gel separator</td><td>BD (Becton, Dickinson and Company)</td><td>367704</td><td>-</td></tr><tr><td>Xylazine solution</td><td>Laboratorios Calier SA</td><td>Xylagesic</td><td>Dose:&nbsp;5&nbsp;mg/kg&nbsp;intramuscular injection</td></tr></tbody></table>

fabricação e aplicação cirúrgica de hidrogéis enriquecidos de gelatina–riboflavina com foto-cruzamento para reparo de feridas corneanas em coelhos

Fabrication and Surgical Application of Enriched Photo-crosslinked Gelatin&#8211;Riboflavin Hydrogels for Corneal Wound Repair in Rabbits

Fabricação e Aplicação Cirúrgica de Hidrogéis Enriquecidos de Gelatina–Riboflavina com Foto-Cruzamento para Reparo de Feridas Corneanas em Coelhos

This article presents a step&#8209;by&#8209;step protocol to fabricate, supplement, and surgically apply an in situ blue&#8209;light&#8211;crosslinkable ...

fabrication-surgical-application-enriched-photo-crosslinked

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Bioengenharia

Relatamos uma técnica para a fabricação de microbolsas dentro membranas electrospun para estudar o comportamento das células. Especificamente, descreve-se uma combinação de microstereolithography e de electrospinning para a produção de PLGA (poli (láctido-co-glicólido)) dispositivos de biomateriais córnea equipados com microestruturas.

Combinação de Microstereolithography e Electrospinning Produzir Membranas Equipado com nichos para a Regeneração da córnea

A reticulação do colágeno da córnea (CXL) é o único tratamento conservador atualmente disponível para interromper a progressão do ceratocone, melhorando a rigidez biomecânica do estroma da córnea. O objetivo deste manuscrito é destacar os métodos de três diferentes protocolos de CXL: CXL convencional (C-CXL), CXL acelerado (A-CXL) e ICXL de iontoforese (I-CXL).

Três diferentes protocolos de Corneal Collagen reticulação em Ceratocone: convencional, com aceleração e Iontoforese

Nós demonstramos o efeito de reticulação escleral com riboflavina e UVA em um olho alongamento coelho axial. alongamento axial foi induzida em coelhos 13 dias de idade Nova Zelândia (masculino e feminino) suturando as pálpebras do olho direito (tarsorrafia).

Escleral reticulação Usando ultravioleta e riboflavina-A radiação de Prevenção de Axial Miopia em um modelo de coelho

Este protocolo descreve técnicas para a avaliação química do cross-linking de esclera coelho usando a imagem latente de geração segundo harmônico e diferencial de calorimetria de varredura.

Segunda geração harmônica sinais na esclera coelho como uma ferramenta para avaliação do tecido terapêutico do cross-linking (TXL) para miopia

Um protocolo para uma ex modelo de cultura da córnea órgão vivo, útil para estudos de cicatrização de feridas é descrita. Este sistema de modelo pode ser usado para avaliar os efeitos de agentes para promover a cicatrização regenerativa ou toxicidade de drogas em ambiente 3D multicelular organizada.

Ex Vivo modelo de cultura órgão da córnea para cicatrização de feridas estudos

Aqui, modelos animais baseados em camundongos e coelhos são desenvolvidos para lesão mecânica e química do epitélio corneano para triagem de novas terapêuticas e do mecanismo subjacente.

Modelos Animais Ex Vivo e In Vivo para Lesões Mecânicas e Químicas do Epitélio da Córnea

Este artigo descreve um novo modelo animal desenvolvido para estudar a anatomia e histologia da córnea e seus processos de cicatrização. Este novo modelo animal usa o gerbil mongol, que tem uma córnea com muitas semelhanças com a córnea humana.

Gerbils mongóis como um modelo animal de cicatrização de feridas

Descemet's Stripping Only é um procedimento experimental em que pacientes com gutae córnea central resultante da Distrofia Corneal Endotelial De Fuchs têm a membrana de Descemet despojada para células periféricas para regenerar a camada endotelial. Apresentamos nova metodologia simulando DSO em córneas humanas distróficas ex vivo com cura acelerada estimulada pelo eFGF1 (NM141).

Um modelo de cultura de órgãos córneas humanas de descascamento de descemet apenas com cura acelerada estimulada pelo fator de crescimento do fibroblasto projetado 1

O presente protocolo descreve a extração de lumicano da membrana amniótica (MA) e suas condições de armazenamento como extrato de micorrizas (EMA) a -20 °C, 4 °C e temperatura ambiente (RT) por 6, 12, 20 e 32 dias para quantificar suas proteínas e concentração de lumicano.

Extração de Lumican da Membrana Amniótica e Determinação de sua Temperatura de Armazenamento

O protocolo aqui apresentado mostra a síntese de um forte hidrogel adesivo gelatina o-nitrosobenzaldeído (gelatina-NB). A gelatina-RN tem uma capacidade de adesão tecidual rápida e eficiente, que pode formar uma forte barreira física para proteger as superfícies das feridas, por isso espera-se que seja aplicada no campo da biotecnologia de reparação de lesões.

Síntese de Hidrogel Adesivo Forte, Gelatina O-Nitrosobenzaldeído

A fração vascular estromal isolada mecanicamente (SVF) em combinação com um hidrogel de fibrina oferece um transportador fácil e eficiente para células estromais derivadas de tecido adiposo viáveis para várias indicações, incluindo engenharia de tecidos e/ou fins de cicatrização de feridas. Aqui, apresentamos a preparação de uma construção mecânica de SVF (mSVF)-hidrogel de fibrina para pesquisa translacional e aplicação clínica.

A combinação de fração vascular estromal isolada mecanicamente e hidrogel de fibrina: um protocolo de processamento

University of the Basque Country UPV/EHU.  Um protocolo reprodutível é apresentado para a preparação, enriquecimento e aplicação de um hidrogel in situ de luz azul e reticulável gelatina–riboflavina para reparo de feridas estromais corneanas em coelhos, incluindo etapas procedimentais para manuseio cirúrgico, tarsórrafia parcial e cuidados pós-operatórios.

Fabricação e Aplicação Cirúrgica de Hidrogéis Enriquecidos de Gelatina–Riboflavina com Foto-Cruzamento para Reparo de Feridas Corneanas em Coelhos

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