Name: Protocolo de Empilhamento de Foco para Fotografia de Insetos em Alta Resolução (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-06-02T13:30:00.000+00:00
Duration: 4 min 43 s
Description: Aprenda empilhamento de foco para fotografia de alta resolução de insetos usando câmera mirrorless de 61 MP e iluminação estroboscópica. Este protocolo de baixo custo produz imagens livres de artefatos para taxonomia e digitalização da biodiversidade.

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	<li>Aldhawi, H. A., Abulsba, K. S. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+significance+of+insect+biodiversity+on+ecosystem+functioning+and+stability:+a+review.">The significance of insect biodiversity on ecosystem functioning and stability: a review.</a> Ebers J Med Publ. 5, 140-150 (2024).</li><li>S&#225;nchez-Bayo, F., Wyckhuys, K. A. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Worldwide+decline+of+the+entomofauna:+a+review+of+its+drivers.">Worldwide decline of the entomofauna: a review of its drivers.</a> Biol Conserv. 232, 8-27 (2019).</li><li>Wagner, D. L. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insect+declines+in+the+Anthropocene.">Insect declines in the Anthropocene.</a> Annu Rev Entomol. 65 (1), 457-480 (2020).</li><li>Slade, E. M., Ong, X. R. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+future+of+tropical+insect+diversity:+strategies+to+fill+data+and+knowledge+gaps.">The future of tropical insect diversity: strategies to fill data and knowledge gaps.</a> Curr Opin Insect Sci. 58, 101063 (2023).</li><li>Fujisawa, T., Noguerales, V., Vogler, A. P. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Image-based+taxonomic+classification+of+bulk+insect+biodiversity+samples+using+deep+learning+and+domain+adaptation.">Image-based taxonomic classification of bulk insect biodiversity samples using deep learning and domain adaptation.</a> Syst Entomol. 48 (3), 387-401 (2023).</li><li>O'Kane, W. C. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Methods+in+insect+photography.">Methods in insect photography.</a> J Econ Entomol. 5 (1), 54-61 (1912).</li><li>Borror, D. J., White, R. E. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> A field guide to insects: America north of Mexico. 19, (1970).</li><li>Cheng, D., Wang, D., Yao, C., Liu, Y., Dai, X., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thin+and+large+depth-of-field+compound-eye+imaging+for+close-up+photography.">Thin and large depth-of-field compound-eye imaging for close-up photography.</a> Photonics. 11 (2), 107 (2024).</li><li>Brecko, J., Mathys, A., Dekoninck, W., Leponce, M., VandenSpiegel, D., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Focus+stacking:+comparing+commercial+top-end+set-ups+with+a+semi-automatic+low+budget+approach.+A+possible+solution+for+mass+digitization+of+type+specimens.">Focus stacking: comparing commercial top-end set-ups with a semi-automatic low budget approach. A possible solution for mass digitization of type specimens.</a> ZooKeys. (464), 1-23 (2014).</li><li>Mertens, J. E. J., Van Roie, M., Merckx, J., Dekoninck, W. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+use+of+low+cost+compact+cameras+with+focus+stacking+functionality+in+entomological+digitization+projects.">The use of low cost compact cameras with focus stacking functionality in entomological digitization projects.</a> ZooKeys. 712, 141-154 (2017).</li></ol>

<table><tbody><tr><td>Tabela de suporte</td><td>Preferencialmente 3 pods</td><td>Base estável para todo o conjunto</td><td>150</td></tr><tr><td>Tabela antivibração</td><td>Costume</td><td>Minimiza vibrações durante a captura de imagens</td><td>3,200</td></tr><tr><td>Túnel preto cilíndrico</td><td>Costume</td><td>Controle a direção da luz</td><td>350</td></tr><tr><td>Reduz reflexões para pequenos sujeitos</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Rack de foco Novoflex CASTEL-MICRO (macro rail)</td><td>Motor de passo&ndash; controlado, unidade de controle, cabo de rede, adaptador Euro AC</td><td>Foco de precisão submicrométrica (0,2 & micro; degraus m);</td><td>3,000</td></tr><tr><td>automatiza o movimento da câmera</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Rotativo XYZ</td><td>Montagem ajustável</td><td>Alinhamento e posicionamento meticulosos dos sujeitos</td><td>500</td></tr><tr><td>Câmera</td><td>Sony Alpha 7R IV (61 MP full-frame)</td><td>Captura de imagem em alta resolução</td><td>3,000</td></tr><tr><td>Iluminação</td><td>2 vezes; Godox SK300II</td><td>Iluminação uniforme e sem sombras;</td><td>400</td></tr><tr><td>Iluminação</td><td>2 vezes; Godox QT600II</td><td>alta velocidade com curta duração de flash</td><td>1400</td></tr><tr><td>Suportes de flash</td><td>3 suportes ajustáveis</td><td>Posicionamento flexível das luzes</td><td>100</td></tr><tr><td>Modificador de luz</td><td>Difusor</td><td>Suaviza a luz e reduz sombras fortes</td><td>50</td></tr><tr><td>Contexto</td><td>&ldquo; Buraco negro" veludo</td><td>Elimina reflexos, fornece fundo uniforme</td><td>200</td></tr><tr><td>Objetivos do microscópio</td><td>Plano Mitutoyo Apo Infinity Corrigido: 5 e mais vezes;</td><td>Ampliação de alta qualidade para microestruturas</td><td>1,000</td></tr><tr><td>Plano Mitutoyo Apo Infinity Corrigido: 7,5 vezes;</td><td>2,000</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Plano Mitutoyo Apo Infinity Corrigido: 10 e vezes;</td><td>1,400</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Mitutoyo Plan Apo Infinity Corrigido: 20 e mais vezes;</td><td>5,000</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Sistema de tubos de lente</td><td>Uso direto de câmera das lentes Mitutoyo M-Plan (2x, 5x, 7,5x, 10x, 20x)</td><td>Acoplamento de objetivos de microscópio à câmera</td><td>400</td></tr><tr><td>Adaptador</td><td>Montagem Sony E para baioneta universal A da NOVOFLEX</td><td>Conexão mecânica entre câmera e sistema óptico</td><td>300</td></tr><tr><td>Lente macro</td><td>Venus Optics Laowa 100 mm f/2.8 2 vezes; Ultra Macro APO (Montagem Sony E-mount)</td><td>Imagem de espetáculos maiores em alta ampliação</td><td>550</td></tr><tr><td>Gatilho</td><td>Gatilho de flash</td><td>Sincroniza o flash com o obturador da câmera</td><td>50</td></tr><tr><td>Computador</td><td>Laptop ASUS ou Alienware, &ge; 128 GB de RAM, processador de alto desempenho</td><td>Processamento e armazenamento de imagens</td><td>3,000</td></tr><tr><td>Mídia de armazenamento</td><td>2 vezes; SD 256 GB, leitor rápido de cartão SD</td><td>Armazenamento e transferência de imagens de alto volume seguro</td><td>200</td></tr><tr><td>Acessórios</td><td>Mouse gamer</td><td>Precisão durante a edição e navegação</td><td>50</td></tr><tr><td>Acessórios</td><td>Wacom One (tablet gráfico)</td><td>Controle fino durante a limpeza e edição da imagem</td><td>500</td></tr><tr><td><forte>Custo total</forte></td><td></td><td></td><td><forte>26.800</forte></td></tr></tbody></table>

protocolo de empilhamento de foco para fotografia de insetos em alta resolução

Focus Stacking Protocol for High-Resolution Insect Photography

Protocolo de Empilhamento de Foco para Fotografia de Insetos em Alta Resolução

Here, we present a protocol to acquire high resolution, extended depth of field images of insect specimens by photographic focus stacking using a modular ...

focus-stacking-protocol-for-high-resolution-insect-photography

Research

JoVE Journal

Environment

Ambiente

Este trabalho demonstra o uso de um microscópio confocal de varredura rápida para o comportamento das células de imagem diretamente através do pupário. Ao deixar o caso de pupa intacto, este método permite a observação e medição de processos celulares dinâmicos numa fase de desenvolvimento de Drosophila que é difícil de estudar directamente.

Imagem Através do Pupal Caso de<em&gt; Drosophila melanogaster</em

A microscopia de fluorescência à base de folha de luz é a ferramenta mais valiosa na biologia do desenvolvimento. Um grande problema em estudos comparativos é a variância ambiente. Nosso protocolo descreve uma estrutura experimental para imagens ao vivo simultâneas de múltiplos espécimes e, portanto, aborda essa questão de forma pró-ativa.

Imagens ao vivo simultâneas de embriões múltiplos de insetos em microscópios de fluorescência baseados em folha de luz da amostra

Este protocolo descreve aplicações de imobilização de amostras usando coágulos fibrinas, limitando a deriva e permitindo a adição e lavagem de reagentes durante a imagem ao vivo. As amostras são transferidas para uma gota de Fibrinogênio contendo meio de cultura na superfície de um deslizamento de cobertura, após o qual a polimerização é induzida pela adição de trombina.

Aplicações de imobilização de tecidos drosophila com coágulos fibrinas para imagem ao vivo

O protocolo aqui descreve a medição da organização espacial dos eixos visuais dos olhos de mosca-da-casa, mapeados por um dispositivo automático, utilizando o fenômeno pseudopupil e o mecanismo pupilar das células fotorreceptoras.

Gráfico automatizado do espaço visual dos olhos compostos housefly

A membrana do porão é essencial para morfogênese tecidual e órgão durante o desenvolvimento. Para entender melhor os mecanismos que levam à colocação adequada dessa estrutura, o protocolo apresentado descreve métodos para visualizar e caracterizar o tráfico intracelular e a secreção de proteínas de membrana de porão em células epiteliais utilizando microscopia confocal e super-resolução.

Imagem confocal e super-resolução de tráfico intracelular polarizado e secreção de proteínas de membrana de porão durante Drosophila Oogenesis

Aqui, apresentamos um fluxo de trabalho rápido e de baixo custo para imagens de alta resolução de olhos adultos de Drosophila para quantificar defeitos de padronização e crescimento. Descrevemos nosso protocolo para preparação de amostras por montagem em ponto, aquisição de imagem de alta resolução e análise de imagem.

Um fluxo de trabalho rápido e simples para quantificação de estruturas externas de Drosophila adulta

Este protocolo descreve imagens de lapso de tempo de C. elegans baseadas em microfluídica em todo o desenvolvimento pós-embrionário.

Imagens de C . elegans de alta resolução em todos os estágios larvais

O Spectral Iterative Bleaching Extends Multiplexity (IBEX) baseia-se na técnica básica do IBEX, adicionando bloqueio de heparina para minimizar a ligação inespecífica e aproveitando a detecção espectral com desmistura computacional para suprimir a autofluorescência. Essa abordagem acelera a aquisição de imagens enquanto reduz as fontes de fundo, permitindo análises proteômicas espaciais robustas de várias rodadas e de alto parâmetro.

Imagens de alta plexidade usando microscopia confocal espectral para minimizar a fluorescência de tecido não específico

Este protocolo detalha as aplicações avançadas de imagem e o gerenciamento de recursos compartilhados de um sistema de microscópio confocal de varredura a laser integrado a um detector de matriz multiplexada para imagens celulares e subcelulares de alta resolução. O fluxo de trabalho permite imagens multimodais desde confocal até super-resolução (~120 nm) dentro de uma única plataforma, tornando a visualização em escala nanométrica mais acessível.

Imagem de Superresolução e Gerenciamento Compartilhado: Um Protocolo para Microscopia Confocal com Detecção de Multiplex

Doença casca Beech é iniciada através da alimentação atividades do inseto escala de faia que criar pontos de entrada de fungos na casca. Árvores que são resistentes ao inseto escala também são resistentes às doenças. Aqui apresentamos o protocolo que temos desenvolvido para a tela faias individuais de resistência à escala de faia.

Uma técnica para Screen americana Beech para Resistência ao Beech Scale Insect (<em&gt; Cryptococcus fagisuga</em&gt; Lind.)

Aprenda empilhamento de foco para fotografia de alta resolução de insetos usando câmera mirrorless de 61 MP e iluminação estroboscópica. Este protocolo de baixo custo produz imagens livres de artefatos para taxonomia e digitalização da biodiversidade.

Protocolo de Empilhamento de Foco para Fotografia de Insetos em Alta Resolução

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