Name: Visualizando a Ativação do Genoma Zigótico em Células Individuais de Embriões Iniciais (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-04-03T13:10:00.000+00:00
Duration: 7 min 30 s
Description: Aprenda a visualizar a ativação do genoma zigótico em células individuais de embriões iniciais usando Xenopus laevis. Este método permite rastrear a dinâmica espacial e temporal da transcrição durante a embriogênese.

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<ol><li>Kojima, M. L., Hoppe, C., Giraldez, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+maternal-to-zygotic+transition%3A+Reprogramming+of+the+cytoplasm+and+nucleus%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Genet%22%5BJournal%5D)">The maternal-to-zygotic transition: Reprogramming of the cytoplasm and nucleus.</a> Nat Rev Genet. 26 (4), 245-267 (2025).</li>
<li>Vastenhouw, N. L., Cao, W. X., Lipshitz, H. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+maternal-to-zygotic+transition+revisited%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">The maternal-to-zygotic transition revisited.</a> Development. 146 (11), dev161471(2019).</li>
<li>Jukam, D., Shariati, S. A. M., Skotheim, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Zygotic+genome+activation+in+vertebrates%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Cell%22%5BJournal%5D)">Zygotic genome activation in vertebrates.</a> Dev Cell. 42 (4), 316-332 (2017).</li>
<li>Palfy, M., Joseph, S. R., Vastenhouw, N. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+timing+of+zygotic+genome+activation%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Genet+Dev%22%5BJournal%5D)">The timing of zygotic genome activation.</a> Curr Opin Genet Dev. 43, 53-60 (2017).</li>
<li>Chen, H., Einstein, L. C., Little, S. C., Good, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spatiotemporal+patterning+of+zygotic+genome+activation+in+a+model+vertebrate+embryo%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Cell%22%5BJournal%5D)">Spatiotemporal patterning of zygotic genome activation in a model vertebrate embryo.</a> Dev Cell. 49 (6), 852-866.e7 (2019).</li>
<li>Chen, H., Good, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nascent+transcriptome+reveals+orchestration+of+zygotic+genome+activation+in+early+embryogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Biol%22%5BJournal%5D)">Nascent transcriptome reveals orchestration of zygotic genome activation in early embryogenesis.</a> Curr Biol. 32 (19), 4314-4324.e7 (2022).</li>
<li>Chen, H., Good, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Imaging+nascent+transcription+in+whole-mount+vertebrate+embryos+to+characterize+zygotic+genome+activation%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Enzymol%22%5BJournal%5D)">Imaging nascent transcription in whole-mount vertebrate embryos to characterize zygotic genome activation.</a> Methods Enzymol. 638, 139-165 (2020).</li>
<li>Jao, C. Y., Salic, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exploring+RNA+transcription+and+turnover+in+vivo+by+using+click+chemistry%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Exploring RNA transcription and turnover in vivo by using click chemistry.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 105 (41), 15779-15784 (2008).</li>
<li>Chan, S. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Brd4+and+P300+confer+transcriptional+competency+during+zygotic+genome+activation%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Cell%22%5BJournal%5D)">Brd4 and P300 confer transcriptional competency during zygotic genome activation.</a> Dev Cell. 49 (6), 867-881.e8 (2019).</li>
<li>Adar-Levor, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cytokinetic+abscission+is+part+of+the+midblastula+transition+in+early+zebrafish+embryogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Cytokinetic abscission is part of the midblastula transition in early zebrafish embryogenesis.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 118 (15), e2021210118(2021).</li>
<li>Chen, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantifying+nascent+transcription+in+early+embryogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Quantifying nascent transcription in early embryogenesis.</a> Methods Mol Biol. 2923, 143-162 (2025).</li>
<li>Harland, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+situ+hybridization%3A+An+improved+whole-mount+method+for+Xenopus+embryos%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">In situ hybridization: An improved whole-mount method for Xenopus embryos.</a> Methods Cell Biol. 36, 685-695 (1991).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>16% Paraformaldeído (PFA)</td><td>EMS</td><td>15710-S</td><td>Para fazer a solução fixativa</td></tr><tr><td>20 e vezes; SSC</td><td>Mediatech</td><td>MT46-020-CM</td><td>Para fazer a solução de branqueamento</td></tr><tr><td>Misturador nutador 3D</td><td>VWR</td><td>76595-802</td><td>Para nutação de embriões</td></tr><tr><td>Frascos rosqueados de 9 mm (2 mL)</td><td>VWR</td><td>46610-722</td><td>Para processamento de embriões</td></tr><tr><td>Anticorpo anti-Histona H3</td><td>Abcam</td><td>ab1791</td><td>Para imunocoloração</td></tr><tr><td>Ácido ascórbico</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A7506</td><td>Para fazer a reação de clique</td></tr><tr><td>Álcool benzílico</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>305197</td><td>Para limpar embriões</td></tr><tr><td>Benzoato de benzo-benzo-mecana</td><td>ACROS Organics</td><td>105860010</td><td>Para limpar embriões</td></tr><tr><td>Albumina sérica bovina (BSA)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A3059</td><td>Para fazer a solução de bloqueio</td></tr><tr><td>Tampas para frascos rosqueados de 9 mm (2 mL)</td><td>VWR</td><td>46610-712</td><td>Para processamento de embriões</td></tr><tr><td>Vidro coberto (24 mm e vezes 40 mm)</td><td>VWR</td><td>48393-060</td><td>Para fabricar câmara de imagem</td></tr><tr><td>CuSO4</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>61230</td><td>Para fazer a reação de clique</td></tr><tr><td>Etilenebídeo (oxietilennitrilo)ácido tetraacético (EGTA)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>AC409915000</td><td>Para fazer a solução fixativa</td></tr><tr><td>Fiji ImageJ</td><td>NIH</td><td></td><td>Para processamento de imagem</td></tr><tr><td>Formamida</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>AC181090010</td><td>Para fazer a solução de branqueamento</td></tr><tr><td>Pipetas Pasteur de vidro</td><td>VWR</td><td>14673-010</td><td>Para transferir o BABB</td></tr><tr><td>Anticorpo secundário anti-coelho Alex Fluor 488</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>A27034</td><td>Para imunocoloração</td></tr><tr><td>Soro de cabra</td><td>Abcam</td><td>ab7481</td><td>Para fazer a solução de bloqueio</td></tr><tr><td>Peróxido de hidrogênio</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>H1009</td><td>Para fazer a solução de branqueamento</td></tr><tr><td>Sulfato de magnésio (MgSO4)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>M65-500</td><td>Para fazer a solução fixativa</td></tr><tr><td>Metanol</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>A4524</td><td>Para desidratar embriões</td></tr><tr><td>Metanol, anidro</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>322415</td><td>Para desidratar embriões</td></tr><tr><td>MOPS</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>AC172631000</td><td>Para fazer a solução fixativa</td></tr><tr><td>Misturador nutador multimodo</td><td>VWR</td><td>76595-812</td><td>Para nutação de embriões</td></tr><tr><td>Pipeta de transferência plástica</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>13-711-9AM</td><td>Para transferir embriões</td></tr><tr><td>Lâmina de barbear</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>18-100-970</td><td>Para cortar fitas</td></tr><tr><td>Água livre de RNase</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>BP561-1</td><td>Para criar soluções livres de Rnase</td></tr><tr><td>Roto-Mini PLUS (rotador)</td><td>VWR</td><td>470313-912</td><td>Para roar embriões</td></tr><tr><td>Tetrametilrodamina (TAMRA)-azida</td><td>Abcam</td><td>ab146486</td><td>Para fazer a reação de clique</td></tr><tr><td>TO-PRO-3</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>T3605</td><td>Para coloração de DNA</td></tr><tr><td>Triton X-100</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>10789704001</td><td>Para fazer o buffer de lavagem</td></tr><tr><td>Base Trizma (Base Tris)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>T1503</td><td>Para fazer o tampão Tris</td></tr><tr><td>Fitas VHB 3M GPH-110GF (45 mil.)</td><td>VWR</td><td>76524-608</td><td>Para fabricar câmara de imagem</td></tr><tr><td>Microscópio confocal Zeiss LSM 700</td><td>Zeiss</td><td></td><td>Para imagem confocal</td></tr></tbody></table>

visualizando a ativação do genoma zigótico em células individuais de embriões iniciais

Visualizing Zygotic Genome Activation In Single Cells of Early Embryos

Visualizando a Ativação do Genoma Zigótico em Células Individuais de Embriões Iniciais

Early embryogenesis requires the maternal-to-zygotic transition (MZT) that necessitates the zygotic genome activation (ZGA). During ZGA, hundreds to ...

visualizing-zygotic-genome-activation-in-single-cells-of-early-embryos

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Biologia do Desenvolvimento

Neste vídeo, demonstramos um método pelo qual para analisar o cérebro em desenvolvimento em embriões vertebrados zebrafish viver em resolução única célula por microscopia confocal. Isso inclui o método pelo qual injetamos o embrião do zebrafish de uma única célula e, posteriormente, montar e imagem do cérebro em desenvolvimento.

Vivem de imagem do cérebro Zebrafish embrionárias por microscopia confocal

Este protocolo descreve imagens de neurônios individuais ou de células da crista neural em embriões vivos zebrafish. Este método é usado para examinar comportamentos e localização celular actina microscopia de fluorescência usando lapso de tempo confocal.

Imagens ao vivo da motilidade celular e citoesqueleto de actina de neurônios individuais e células da crista neural em embriões Zebrafish

O vídeo atual demonstra um método que tira proveito da combinação de eletroporação e microscopia confocal para realizar imagens ao vivo em células individuais progenitoras neurais no cérebro anterior zebrafish em desenvolvimento.

Lapso de tempo de imagens ao vivo de relação clonal células progenitoras neurais no desenvolvimento Zebrafish Encéfalo anterior

Este artigo descreve uma técnica para a visualização dos eventos iniciais da embriogênese do...

Lapso de tempo Microscopia de embriogênese inicial em Caenorhabditis elegans

acompanhamento ao vivo de células progenitoras da retina WT individuais em fundos genéticos distintos permite a avaliação da contribuição das células de sinalização não autónomo durante a neurogênese. Aqui, uma combinação de silenciamento de genes, através de transplante de geração quimera embrião e na imagiologia de lapso de tempo in vivo confocal foi utilizada para este propósito.

In vivo de imagens de Gene Transgenic Expressão em Individual Retinal Progenitores em embriões Zebrafish Quimérico para estudar celular Influências não-autônomos

Este manuscrito descreve um in vitro ovule cultivo método que permite que a imagem latente da viver-pilha de Arabidopsis zigotos e embriões. Este método é utilizado para visualizar a dinâmica intracelular durante a polarização de zigoto e a especificação do destino de célula no desenvolvimento de embriões.

In Vitro Ovule cultivo para viver-pilha de imagem do zigoto polarização e padronização do embrião em Arabidopsis thaliana

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Fóton multi tempo lapso imagem para visualizar o desenvolvimento em tempo real: visualização de migrar as células da crista Neural em embriões de peixe-zebra

Este trabalho descreve um protocolo semi-alta de supressão que permite imagens simultâneas de lapso de tempo 3D de embriaênese embrionária em embriões de 80-100 C. elegans em uma única corrida noturna. Além disso, as ferramentas de processamento e visualização de imagens são incluídas para simplificar a análise de dados. A combinação destes métodos com tensões personalizadas do repórter permite a monitoração detalhada do embryogenesis.

Um método de imagem semi-alta-fonte e um kit de ferramentas de visualização de dados para analisar o desenvolvimento embrionário de C. elegans

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Imagem de microscopia de folha de luz e estratégias de montagem para embriões iniciais de peixe-zebra

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Sequenciamento de RNA de célula única de embriões de camundongos inteiros mutantes: do epiblasto ao fim da gastrulação

Fornecemos métodos detalhados para marcar metabolicamente e purificar transcritos nascentes para análise do transcriptoma em embriões iniciais de Xenopus usando 5-etinil-uridina (5-EU).

Marcagem Metabólica do Transcriptoma Nascente em Xenopus : Embriogênese Precoce

Aprenda a visualizar a ativação do genoma zigótico em células individuais de embriões iniciais usando Xenopus laevis. Este método permite rastrear a dinâmica espacial e temporal da transcrição durante a embriogênese.

Visualizando a Ativação do Genoma Zigótico em Células Individuais de Embriões Iniciais

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