Name: Isolando Células Individuais de Embriões Precoces de Xenopus e Classificando-os por Tamanho (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-03-20T14:05:00.000+00:00
Duration: 4 min 33 s
Description: Aprenda a isolar e classificar células individuais de embriões precoces de Xenopus laevis por tamanho. Este método permite separar blastômeros intactos para análises de ciclo celular e sequenciamento.

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<ol><li>Ginzberg, M. B., Kafri, R., Kirschner, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cell+biology.+On+being+the+right+%28cell%29+size%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Cell biology. On being the right (cell) size.</a> Science. 348 (6236), 1245075(2015).</li>
<li>Xie, S., Swaffer, M., Skotheim, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Eukaryotic+cell+size+control+and+its+relation+to+biosynthesis+and+senescence%5BTitle%5D)+AND+%22Annu+Rev+Cell+Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">Eukaryotic cell size control and its relation to biosynthesis and senescence.</a> Annu Rev Cell Dev Biol. 38, 291-319 (2022).</li>
<li>Chadha, Y., Khurana, A., Schmoller, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Eukaryotic+cell+size+regulation+and+its+implications+for+cellular+function+and+dysfunction%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Rev%22%5BJournal%5D)">Eukaryotic cell size regulation and its implications for cellular function and dysfunction.</a> Physiol Rev. 104 (4), 1679-1717 (2024).</li>
<li>Chen, H., Einstein, L. C., Little, S. C., Good, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spatiotemporal+patterning+of+zygotic+genome+activation+in+a+model+vertebrate+embryo%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Cell%22%5BJournal%5D)">Spatiotemporal patterning of zygotic genome activation in a model vertebrate embryo.</a> Dev Cell. 49 (6), 852-866.e7 (2019).</li>
<li>Hubatsch, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+cell+size+threshold+limits+cell+polarity+and+asymmetric+division+potential%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Phys%22%5BJournal%5D)">A cell size threshold limits cell polarity and asymmetric division potential.</a> Nat Phys. 15 (10), 1075-1085 (2019).</li>
<li>Fung, H. F., Bergmann, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Function+follows+form%3A+How+cell+size+is+harnessed+for+developmental+decisions%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Function follows form: How cell size is harnessed for developmental decisions.</a> Eur J Cell Biol. 102 (2), 151312(2023).</li>
<li>Chen, H., Qian, W., Good, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Integrating+cellular+dimensions+with+cell+differentiation+during+early+development%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Integrating cellular dimensions with cell differentiation during early development.</a> Curr Opin Cell Biol. 67, 109-117 (2020).</li>
<li>Clute, P., Masui, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regulation+of+the+appearance+of+division+asynchrony+and+microtubule-dependent+chromosome+cycles+in+Xenopus+laevis+embryos%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">Regulation of the appearance of division asynchrony and microtubule-dependent chromosome cycles in Xenopus laevis embryos.</a> Dev Biol. 171 (2), 273-285 (1995).</li>
<li>Venkataraman, T., Dancausse, E., King, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PCR-based+cloning+and+differential+screening+of+RNAs+from+Xenopus+primordial+germ+cells%3A+Cloning+uniquely+expressed+RNAs+from+rare+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">PCR-based cloning and differential screening of RNAs from Xenopus primordial germ cells: Cloning uniquely expressed RNAs from rare cells.</a> Methods Mol Biol. 254, 67-78 (2004).</li>
<li>Sive, H. L., Grainger, R. M., Harland, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Xenopus+laevis+in+vitro+fertilization+and+natural+mating+methods%5BTitle%5D)+AND+%22CSH+Protoc%22%5BJournal%5D)">Xenopus laevis in vitro fertilization and natural mating methods.</a> CSH Protoc. 2007, (2007).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>16% Paraformaldeído (PFA)</td><td>EMS</td><td>15710-S</td><td>Para fazer a solução fixativa</td></tr><tr><td>Placas de Petri Descartáveis de 60 mm</td><td>VWR</td><td>25384-092</td><td>Para incubar embriões</td></tr><tr><td>Estereoscópios Zoom ACCU-SCOPE 3075</td><td>VWR</td><td>470351-130</td><td>Para visualizar embriões</td></tr><tr><td>Agarose</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A-9414</td><td>Para revestir placas de Petri</td></tr><tr><td>Filtro de células, 100 e micro; m</td><td>VWR</td><td>76327-102</td><td>Para ordenar células por tamanho</td></tr><tr><td>Cell Strainer, 40 & micro; m</td><td>VWR</td><td>76327-098</td><td>Para ordenar células por tamanho</td></tr><tr><td>Filtro de células, 70 & micro; m</td><td>VWR</td><td>76327-100</td><td>Para ordenar células por tamanho</td></tr><tr><td>Pipetas de Transferência Descartáveis</td><td>VWR</td><td>414004-035</td><td>Para transferência de embriões</td></tr><tr><td>Pinça Dumont, Estilo 5</td><td>Ciências da Microscopia Eletrônica</td><td>72701-D</td><td>Para remover membrana vitelina</td></tr><tr><td>Placa de Petri de vidro, 60 e mais vezes; 15 mm</td><td>VWR</td><td>75845-542</td><td>Para incubar embriões</td></tr></tbody></table>

isolando células individuais de embriões precoces de xenopus e classificando-os por tamanho

Isolating Single Cells from Xenopus Early Embryos and Sorting Them by Size

Isolando Células Individuais de Embriões Precoces de Xenopus e Classificando-os por Tamanho

Early embryogenesis requires an exponential decrease in cell size, while the embryo remains constant in size at the earliest stages of development. The ...

isolating-single-cells-from-xenopus-early-embryos-sorting-them

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Biologia do Desenvolvimento

Nós relatamos um método eficiente e simples para isolar os embriões em estágios iniciais de desenvolvimento...

Isolamento eficiente e rápida de embriões em início de carreira a partir de<em&gt; Arabidopsis thaliana</em&gt; Sementes

Nós relatamos um dispositivo e um novo método para estudar células e embriões. células individuais são precisamente ordenados em matrizes microcavidade. Seu confinamento 3D é um passo para ambientes 3D encontrados em condições fisiológicas e permite a orientação organela. Ao controlar a forma da célula, esta configuração minimiza variabilidade relatados em ensaios convencionais.

Ordenando células individuais e único embriões em 3D Confinamento: Um novo dispositivo de alta Screening conteúdo

Este protocolo descreve um método para isolar células únicas de embriões de peixe-zebra, enriquecendo para células de interesse, capturando células de peixe-zebra em sistemas multiplex de célula única baseados em microfluídica e avaliando a expressão gênica de células únicas.

Isolamento e caracterização de células individuais de embriões Zebrafish

células-tronco e progenitoras hematopoiéticas (HSPC) derivam de células endoteliais especializadas (hegemônicos) durante o desenvolvimento, mas pouco se sabe sobre o processo pelo qual algumas células endoteliais especificar a tornar-se sangue formando. Nós demonstramos um método baseado citometria de fluxo que permite o isolamento de células endoteliais em simultâneo hegemônicos e HSPC de tecidos embrionários de murídeo.

Isolamento de células embrionárias de murino hegemônicos endoteliais

Os mecanismos de escalonamento celular e intracelular permanecem indescritíveis. O uso de extratos de embriões de Xenopus tem se tornado cada vez mais comum para elucidar mecanismos de regulação do tamanho das organelas. Este método descreve a preparação do extrato de embrião e um novo ensaio de escala nuclear através do qual os mecanismos de regulação do tamanho nuclear podem ser identificados.

Um ensaio-Free Cell Usando<em&gt; Xenopus laevis</em&gt; Embryo Extrai para estudar mecanismos de regulação Tamanho Nuclear

Descrevemos as etapas que permitem rápida situ em amostragem de uma pequena porção de uma célula individual com alta precisão e mínima invasão usando microamostragem baseada em capilar, para facilitar a caracterização química de um instantâneo da atividade metabólica em viver de embriões utilizando uma plataforma de espectrometria de massa e eletroforese capilar Custom-Built única célula.

Microsonda eletroforese capilar espectrometria de massa para célula única Metabolomics em embriões de viver rã (Xenopus laevis)

Descrevemos uma técnica para traçar perfis de microRNAs em embriões de camundongos primitivos. Este protocolo supera o desafio da baixa entrada celular e do pequeno enriquecimento do RNA. Este ensaio pode ser usado para analisar alterações na expressão miRNA ao longo do tempo em diferentes linhagens celulares do embrião do camundongo primitivo.

Preparação de Pequenas Bibliotecas de RNA para Sequenciamento de Embriões de Camundongos Primitivos

Descrevemos um protocolo simples para desenvolver organoides epiteliais mucociliais a partir de células ectoderm profundas isoladas dos embriões Xenopus laevis. Os progenitores multipotentes regeneram precursores de células de cálice epitelial e permitem o acompanhamento ao vivo da iniciação e progressão das transições celulares na superfície dos organoides.

Organoides epiteliais mucociliais de células embrionárias xenopus: geração, cultura e imagem ao vivo de alta resolução

Descrevemos aqui uma caracterização proteômica baseada em espectrometria de massa de linhagens celulares com destino tecidual conhecido no embrião do vertebrado Xenopus laevis .

Proteômica por Espectrometria de Massas Guiada por Linhagem Celular no Embrião em Desenvolvimento (Rã)

Este artigo estabelece um pipeline para suspensões de células e núcleos únicos de alta qualidade de embriões de camundongos gastrulados para sequenciamento de células e núcleos únicos.

Sequenciamento de RNA de célula única de embriões de camundongos inteiros mutantes: do epiblasto ao fim da gastrulação

Descrevemos um método de constrição física para produzir mini embriões a partir de embriões de célula única de Xenopus laevis .

Manipulação Física para Gerar Embriões Mini de Xenopus

Aprenda a isolar e classificar células individuais de embriões precoces de Xenopus laevis por tamanho. Este método permite separar blastômeros intactos para análises de ciclo celular e sequenciamento.

Isolando Células Individuais de Embriões Precoces de Xenopus e Classificando-os por Tamanho

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