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	<li>Horvath, P., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Screening+out+irrelevant+cell-based+models+of+disease.">Screening out irrelevant cell-based models of disease.</a> Nat Rev Drug Discov. 15 (11), 751-769 (2016).</li><li>Hatt, L. P., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Standard+in+vitro+evaluations+of+engineered+bone+substitutes+are+not+sufficient+to+predict+in+vivo+preclinical+model+outcomes.">Standard in vitro evaluations of engineered bone substitutes are not sufficient to predict in vivo preclinical model outcomes.</a> Acta Biomater. 156, 177-189 (2023).</li><li>Kozlowski, M. T., Crook, C. J., Ku, H. 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T. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progress+in+3D+bioprinting+technology+for+tissue/organ+regenerative+engineering.">Progress in 3D bioprinting technology for tissue/organ regenerative engineering.</a> Biomaterials. 226, 119536 (2020).</li><li>Sun, Q., Choudhary, S., Mannion, C., Kissin, Y., Zilberberg, J., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ex+vivo+replication+of+phenotypic+functions+of+osteocytes+through+biomimetic+3D+bone+tissue+construction.">Ex vivo replication of phenotypic functions of osteocytes through biomimetic 3D bone tissue construction.</a> Bone. 106, 148-155 (2018).</li><li>Metzger, W., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expansion+and+differentiation+of+human+primary+osteoblasts+in+two-+and+three-dimensional+culture.">Expansion and differentiation of human primary osteoblasts in two- and three-dimensional culture.</a> Biotech Histochem. 88 (2), 86-102 (2013).</li><li>Walsh, C. M., Wychowaniec, J. K., Costello, L., Brougham, D. F., Dooley, D. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+In+vitro+and+ex+vivo+analysis+of+the+potential+of+GelMA+hydrogels+as+a+therapeutic+platform+for+preclinical+spinal+cord+injury.">An In vitro and ex vivo analysis of the potential of GelMA hydrogels as a therapeutic platform for preclinical spinal cord injury.</a> Adv Healthc Mater. 12 (26), e2300951 (2023).</li><li>Smith, C. A., Board, T. N., Rooney, P., Eagle, M. J., Richardson, S. M., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+decellularized+bone+scaffolds+from+aged+donors+show+improved+osteoinductive+capacity+compared+to+young+donor+bone.">Human decellularized bone scaffolds from aged donors show improved osteoinductive capacity compared to young donor bone.</a> PLoS One. 12 (5), e0177416 (2017).</li><li>Ryan, S. L., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drug+discovery+approaches+utilizing+three-dimensional+cell+culture.">Drug discovery approaches utilizing three-dimensional cell culture.</a> Assay Drug Dev Technol. 14 (1), 19-28 (2016).</li><li>Sittampalam, S., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Three-dimensional+cell+culture+assays:+Are+they+more+predictive+of+in+vivo+efficacy+than+2D+monolayer+cell-based+assays?.">Three-dimensional cell culture assays: Are they more predictive of in vivo efficacy than 2D monolayer cell-based assays?.</a> Assay Drug Dev Technol. 13 (5), 254-261 (2015).</li><li>Knight, A. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Systematic+reviews+of+animal+experiments+demonstrate+poor+human+clinical+and+toxicological+utility.">Systematic reviews of animal experiments demonstrate poor human clinical and toxicological utility.</a> Altern Lab Anim. 35 (6), 641-659 (2007).</li><li>Crapo, P. M., Gilbert, T. W., Badylak, S. F. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+overview+of+tissue+and+whole+organ+decellularization+processes.">An overview of tissue and whole organ decellularization processes.</a> Biomaterials. 32 (12), 3233-3243 (2011).</li><li>Schlander, M., Hernandez-Villafuerte, K., Cheng, C. Y., Mestre-Ferrandiz, J., Baumann, M. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=How+Much+Does+It+Cost+to+Research+and+Develop+a+New+Drug?+A+Systematic+Review+and+Assessment.">How Much Does It Cost to Research and Develop a New Drug? A Systematic Review and Assessment.</a> Pharmacoeconomics. 39 (11), 1243-1269 (2021).</li><li>Shah, K. M., Stern, M. M., Stern, A. R., Pathak, J. L., Bravenboer, N., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Osteocyte+isolation+and+culture+methods.">Osteocyte isolation and culture methods.</a> Bonekey Rep. 5, 838 (2016).</li><li>Zhang, W., Lee, W. Y., Siegel, D. S., Tolias, P., Zilberberg, J. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Patient-specific+3D+microfluidic+tissue+model+for+multiple+myeloma.">Patient-specific 3D microfluidic tissue model for multiple myeloma.</a> Tissue Eng Part C Methods. 20 (8), 663-670 (2014).</li><li>Jiang, Q., Nagano, K., Moriishi, T., Komori, H., Sakane, C., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Roles+of+Sp7+in+osteoblasts+for+the+proliferation,+differentiation,+and+osteocyte+process+formation.">Roles of Sp7 in osteoblasts for the proliferation, differentiation, and osteocyte process formation.</a> J Orthop Translat. 47, 161-175 (2024).</li></ol>

<table><tbody><tr><td>2-Hydroxy-4&prime;-(2-hydroxyethoxy)-2-methylpropiophenone (Irgacure 2959)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>410896-10G</td><td>Fotoiniciador de polimerização de hidrogel</td></tr><tr><td>AlamarBlue reagente de viabilidade celular&nbsp;</td><td>Invitrogen</td><td>DAL1100</td><td>Para ensaio de viabilidade quantitativo</td></tr><tr><td>Antibiótico-Antimícotico (100&acute;)&nbsp;</td><td>Gibco</td><td>15240-062</td><td>Componente do meio de cultura</td></tr><tr><td>Frasco de cultura celular (T75)</td><td>SPL Life Sciences</td><td>70075</td><td>Para cultura de osteocitos</td></tr><tr><td>Colagenase Tipo 1</td><td>Gibco</td><td>17100-017</td><td>Para digestão enzimática de amostras ósseas</td></tr><tr><td>Tubo cônico, 15 mL</td><td>SPL Life Sciences</td><td>50015</td><td>Para preparação de hidrogel</td></tr><tr><td>DarkDawn D15-365 nm</td><td>DarkDawn</td><td>-</td><td>Para reticulação UV de hidrogel</td></tr><tr><td>DPBS, pó, sem cálcio, sem magnésio</td><td>gibco</td><td>21600069</td><td>Solvente de hidrogel, solvente do kit LIVE/DEAD</td></tr><tr><td>EDTA Disódio Sal 2-HID</td><td>Winkler</td><td>ED-0760</td><td>Para digestão enzimática de amostras ósseas</td></tr><tr><td>Centrífuga Eppendorf 5702</td><td>Eppendorf</td><td>5702000010</td><td>Para preparação de micropartículas ósseas</td></tr><tr><td>Etanol absoluto para análise</td><td>Supelco</td><td>1,00,98,32,511</td><td>Para descelularização óssea (diluído a 70%), solvente de fotoiniciador</td></tr><tr><td>Soro bovino fetal</td><td>Gibco</td><td>A52567-01</td><td>Componente do meio de cultura</td></tr><tr><td>Gelatin da pele de porco</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>G1890-500G</td><td>Componente de hidrogel</td></tr><tr><td>HBSS (10&acute;)</td><td>Gibco</td><td>14185-052</td><td>Para lavagem de amostras de medula óssea</td></tr><tr><td>Ácido L-Ascórbico 2-fosfato</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A8960-5G</td><td>Componente do meio de cultura</td></tr><tr><td>Kit de viabilidade/citotoxicidade LIVE/DEAD</td><td>Invitrogen</td><td>L3224</td><td>Para ensaio qualitativo de viabilidade/citotoxicidade</td></tr><tr><td>MEM Alpha (1&acute;)</td><td>Gibco</td><td>12571-063</td><td>Componente do meio de cultura</td></tr><tr><td>Anidrido metacrilático</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>276685-500G</td><td>Componente de hidrogel</td></tr><tr><td>Tubo de microcentrífuga</td><td>Citotest</td><td>4610-1844</td><td>Para preparação dos corantes alamarBlue e LIVE/DEAD</td></tr><tr><td>NuncIon delta surface&nbsp;</td><td>Thermoscientific</td><td>150628</td><td>Placa de 12 poços para semeadura de amostras</td></tr><tr><td>Fonte de luz de fluorescência OLYMPUS BX43 Olympus U- LH100HG</td><td>Evident</td><td>U- LH100HG</td><td>Fonte de luz de análise de fluorescência</td></tr><tr><td>Centrífuga RC-6 Plus</td><td>Thermo Scientific Sorvall</td><td>46910</td><td>Para descelularização óssea e preparação de micropartículas ósseas</td></tr><tr><td>Leitor multimodo Synergy HTX</td><td>BioTek Instruments</td><td>-</td><td>Espectrofotometro&nbsp;</td></tr><tr><td>Seringa com agulha</td><td>NIPRO</td><td>SY3-WN-R-03</td><td>Para filtragem de hidrogel</td></tr><tr><td>Placa de cultura de tecido 96 poços</td><td>Jet Biofil</td><td>TCP001096</td><td>96 poços para ensaio de viabilidade alamarBlue.</td></tr><tr><td>Limpador ultrassônico</td><td>VWE</td><td>97043-958</td><td>Para sonicação de amostras ósseas</td></tr></tbody></table>

uma plataforma de cultura óssea 3d usando osteócitos humanos e matriz extracelular descelularizada para modelagem de doenças musculoesqueléticas

A 3D Bone Culture Platform Using Human Osteocytes and Decellularized Extracellular Matrix for Modeling Musculoskeletal Diseases

Uma plataforma de cultura óssea 3D usando osteócitos humanos e matriz extracelular descelularizada para modelagem de doenças musculoesqueléticas

Modeling musculoskeletal diseases such as osteoporosis requires in vitro platforms that accurately reproduce key features of human bone biology. ...

a-3d-bone-culture-platform-using-human-osteocytes-decellularized

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Bioengenharia

Um sistema 3D de condrócitos articular humana cultivo em altos níveis de líquido sinovial é descrita. Líquido sinovial reflete o microambiente mais natural para a cartilagem articular, e pode ser facilmente obtido e armazenado. Esse sistema, portanto, pode ser usado para estudar a regeneração da cartilagem e para terapêutica de triagem para tratamento da artrite.

Um Sistema de 3D para condrócitos Cultivar Humanos Articular no líquido sinovial

Nos métodos padrão de cultura de células são retiradas do seu ambiente fisiológico e cultivadas na superfície de plástico de um prato. Para estudar o comportamento de células de medula óssea humana primária foi criado um sistema de cultura de 3-D, onde as células são cultivadas sob condições sintetizando o microambiente nativa do tecido.

A Cultura de Tecidos modelo tridimensional para estudar primária da medula óssea humana e suas Malignancies

O reparo da cartilagem representa um desafio médico não atendido e as abordagens baseadas em células para projetar a cartilagem articular humana são uma solução promissora. Aqui, descrevemos os hidrogéis biomiméticos tridimensionais (3D) como uma ferramenta ideal para a expansão e maturação de condrócitos articulares humanos.

3D Hidrogel Andaimes para articular de condrócitos Cultura e Geração de cartilagem

Este protocolo descreve o desenvolvimento de uma em vitro humana pré-clínicos modelo de osteoclastogenesis de monócitos do sangue periférico cultivados com linhas de células de câncer de mama para simular a interação de osteoclasto-célula de câncer. O modelo pode ser usado para promover nossa compreensão da formação de metástase óssea e melhorar as opções terapêuticas.

Desenvolvimento de um modelo humano pré-clínicos de Osteoclastogenesis de monócitos do sangue periférico co cultivados com linhas de células de câncer de mama

O modelo de matriz extracelular (BEM) de osso de osteossarcoma (OS) é bem estabelecida e mostrado aqui. Ele pode ser usado como um andaime apropriado para simulando tumor primário crescimento em vitro e fornecendo um modelo ideal para o estudo da heterogeneidade de mutagénese e histológica do sistema operacional.

Modelo de matriz extracelular óssea tridimensional para osteossarcoma

Descrevemos um sistema de cultura in vitro de matriz extracelular em 3D que permite a dissecação dos papéis da matriz e dos adipócitos em contribuir para o fenótipo metabólico do tecido adiposo.

Um modelo de cultura de matriz-adipócito extracelular humano para estudar crosstalk metabólico de matriz e células

Aqui, apresentamos protocolos para analisar a remodelagem óssea dentro de uma plataforma lab-on-a-chip. Um dispositivo de carregamento mecânico impresso em 3D pode ser emparelhado com a plataforma para induzir a mechanostransdução de osteócitos, deformando a matriz celular. A plataforma também pode ser usada para quantificar os resultados funcionais de remodelação óssea de osteoclastos e osteoblastos (reabsorção/formação).

Uma plataforma lab-on-a-chip para estimular a mecanotransdução de osteócitos e analisar resultados funcionais da remodelagem óssea

Apresentamos aqui um protocolo para cultivo de células IDG-SW3 em uma matriz extracelular tridimensional (3D).

Cultivo de Células IDG-SW3 em Matriz Tridimensional Extracelular

Aqui, descrevemos um sistema microfisiológico padronizado e fácil de implementar que reflete a complexidade da estrutura in vivo da medula óssea humana, fornecendo um modelo pertinente para estudar finamente uma ampla gama de eventos normais e patológicos.

Um modelo 3D de medula óssea humana para investigar a dinâmica e as interações entre células residentes em contextos fisiológicos ou tumorais

Um modelo in vitro do nicho vascular da medula óssea é estabelecido pela semeadura de células mesenquimais e endoteliais em hidrogéis pré-moldados de PEG 3D. As redes endoteliais, os componentes da MEC e a atividade da FA dos nichos variam dependendo do fator de crescimento utilizado. A plataforma pode ser usada para modelos avançados de câncer.

Estabelecimento simples de um nicho osteogênico vascularizado da medula óssea usando hidrogéis pré-moldados de poli(etilenoglicol) (PEG) em uma microplaca de imagem

Aqui, apresentamos um protocolo integrado para gerar lesões osteocondrais controladas nos joelhos de ovelha, a fim de estabelecer um modelo experimental adequado para estudos de regeneração óssea e cartilaginosa. O protocolo descreve um método para induzir um defeito osteocondral de espessura total no côndilo femoral, utilizando técnicas que minimizam os impactos no bem-estar animal e a variabilidade nos resultados.

Estabelecimento e Avaliação de um Modelo Ovino de Defeito Osteocondral de Espessura Total

Universidad San Sebastián.  Este protocolo descreve a fabricação de construções ósseas 3D utilizando osteócitos humanos embutidos em hidrogéis de gelatina metacrilada (GelMA) suplementados com matriz extracelular descelularizada. O método é de baixo custo, escalável e compatível com equipamentos laboratoriais básicos, fornecendo uma plataforma translacional para o estudo dos processos de doenças musculoesqueléticas.

Uma plataforma de cultura óssea 3D usando osteócitos humanos e matriz extracelular descelularizada para modelagem de doenças musculoesqueléticas

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