Name: Um método otimizado para isolar epitélio uretral feminino de camundongos para análise de células únicas e imunofluorescência (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-06-12T14:30:00.000+00:00
Duration: 11 min 2 s
Description: Aprenda a isolar epitélio uretral feminino de camundongos para análise de células únicas e imunofluorescência. Este método otimizado permite estudos detalhados sobre defesa imunológica no trato urinário inferior.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<table><tbody><tr><td>#5 fine forceps</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>10% neutral buffered formalin</td><td>Sigma Aldrich</td><td>HT501128</td><td></td></tr><tr><td>10X HBSS</td><td>Sigma Aldrich</td><td>H4641</td><td></td></tr><tr><td>12-well plate</td><td>Corning</td><td>3513</td><td></td></tr><tr><td>30-micron pre-separation filter&nbsp;</td><td>Miltenyi Biotec</td><td>130-041-407</td><td></td></tr><tr><td>A83-01</td><td>Sigma Aldrich</td><td>SML0788</td><td></td></tr><tr><td>Accutase</td><td>Sigma Aldrich</td><td>SCR005</td><td></td></tr><tr><td>Adobe Illustrator</td><td>Adobe</td><td></td><td>Para fazer painéis de figuras</td></tr><tr><td>Adobe Photoshop</td><td>Adobe</td><td></td><td>Para fazer painéis de figuras</td></tr><tr><td>Advanced DMEM/F12</td><td>Gibco</td><td>12634010</td><td></td></tr><tr><td>Antibiotic/antimycotic</td><td>Sigma Aldrich</td><td>A5955</td><td></td></tr><tr><td>Anti-CD326 (EpCAM)</td><td>Invitrogen</td><td>17-5791-82</td><td>1:20 diluição, para citometria de fluxo</td></tr><tr><td>Anti-CD45</td><td>Tonbo</td><td>35-0451-U100</td><td>1:20 diluição, para citometria de fluxo</td></tr><tr><td>Anti-CDH1 (Rabbit)</td><td>Cell Signalling Technology</td><td>3195S</td><td>1:200 diluição</td></tr><tr><td>Anti-F4/80</td><td>Tonbo</td><td>50-4801-U100</td><td>1:20 diluição, para citometria de fluxo</td></tr><tr><td>Anti-F4/80 (Rat)</td><td>Invitrogen</td><td>14-4801-82</td><td>1:200 diluição</td></tr><tr><td>Anti-Keratin 13 (Rabbit)</td><td>Abcam</td><td>ab92551</td><td>1:200 diluição</td></tr><tr><td>Anti-Keratin 4 (Mouse)</td><td>Abcam</td><td>ab9004</td><td>1:200 diluição</td></tr><tr><td>Anti-Keratin 5 (Chicken)</td><td>Biolegend</td><td>905904</td><td>1:800 diluição</td></tr><tr><td>Anti-Keratin 5 (Rabbit)</td><td>Cell Signaling Technology</td><td>71536</td><td>1:200 diluição</td></tr><tr><td>Anti-p63 (Mouse)</td><td>Biocare medical</td><td>CM163A</td><td>1:200 diluição</td></tr><tr><td>Axioobserver 7</td><td>Zeiss</td><td>431007-9904-000</td><td></td></tr><tr><td>B27 supplement</td><td>Invitrogen</td><td>12587010</td><td></td></tr><tr><td>Bovine serum albumin (BSA), fraction V</td><td>Genetix</td><td>PG-2330</td><td></td></tr><tr><td>CD-1 Mice</td><td>Charles River, USA</td><td>Crl:CD1(ICR)</td><td></td></tr><tr><td>Cultrex BME</td><td>R&amp;D systems</td><td>3445-005-01</td><td></td></tr><tr><td>DAPI solution&nbsp;</td><td>Sigma Aldrich</td><td>D5942</td><td></td></tr><tr><td>D-Glucose</td><td>Qualigens</td><td>Q15405</td><td></td></tr><tr><td>Dimethyl sulfoxide (DMSO)</td><td>Himedia</td><td>MB058</td><td></td></tr><tr><td>di-Sodium Hydrogen Ortophosphate (Na2HPO4)</td><td>Qualigens</td><td>Q15825</td><td></td></tr><tr><td>DNase I</td><td>Sigma Aldrich</td><td>10104159001</td><td></td></tr><tr><td>Donkey anti-Chicken IgG (H+L) (AF488)</td><td>Jackson Immunoresearch&nbsp;</td><td>703-545-155</td><td>1:500 diluição</td></tr><tr><td>Donkey anti-Mouse IgG (H+L) (AF488)</td><td>Jackson Immunoresearch&nbsp;</td><td>715-545-151</td><td>1:500 diluição</td></tr><tr><td>Donkey anti-Mouse IgG (H+L) (AF594)</td><td>Jackson Immunoresearch</td><td>715-585-151</td><td>1:500 diluição</td></tr><tr><td>Donkey anti-Rabbit IgG (H+L) (AF594)</td><td>Jackson Immunoresearch</td><td>711-585-152</td><td>1:500 diluição</td></tr><tr><td>Donkey anti-Rabbit IgG (H+L) (AF647)</td><td>Jackson Immunoresearch&nbsp;</td><td>711-605-152</td><td>1:500 diluição</td></tr><tr><td>Donkey anti-Rat IgG (H+L) (AF647)</td><td>Jackson Immunoresearch&nbsp;</td><td>712-605-153</td><td>1:500 diluição</td></tr><tr><td>Donkey anti-Rat IgG (H+L) (AF594)</td><td>Jackson Immunoresearch&nbsp;</td><td>712-585-153</td><td>1:500 diluição</td></tr><tr><td>EGF</td><td>PeproTech</td><td>AF-315-09</td><td></td></tr><tr><td>Eosin</td><td>Himedia</td><td>GRM938</td><td></td></tr><tr><td>Ethanol</td><td>Supelco</td><td>1.00983</td><td></td></tr><tr><td>Eukitt mounting media&nbsp;</td><td>Sigma Aldrich</td><td>3989</td><td></td></tr><tr><td>FGF10</td><td>PeproTech</td><td>450-61</td><td></td></tr><tr><td>Filter cap sorting tubes</td><td>&nbsp;Falcon/Corning</td><td>352235</td><td></td></tr><tr><td>Ghost Dye&trade; Violet 450</td><td>Tonbo biosciences</td><td>13-0863-T100</td><td></td></tr><tr><td>Glutamax</td><td>Invitrogen</td><td>35050061</td><td></td></tr><tr><td>Glycerol anhydrous</td><td>Merck</td><td>DA1P692899</td><td></td></tr><tr><td>Hematoxylin</td><td>Polysciences</td><td>24243</td><td></td></tr><tr><td>HEPES</td><td>Gibco</td><td>15630080</td><td></td></tr><tr><td>Horse serum</td><td>Gibco</td><td>26050088</td><td></td></tr><tr><td>Kaluza Analysis</td><td>Beckman Coulter</td><td>Kaluza Analysis 2.4</td><td>Análise de dados de citometria de fluxo</td></tr><tr><td>Magnesium chloride (MgCl2)</td><td>Qualigens</td><td>Q15535</td><td></td></tr><tr><td>Mouse TruStain FcX (anti-mouse CD16/32 )</td><td>Biolegend</td><td>101320</td><td></td></tr><tr><td>N-acetyl cysteine</td><td>Sigma Aldrich</td><td>A9165</td><td></td></tr><tr><td>Nicotinamide&nbsp;</td><td>Sigma Aldrich</td><td>N0636</td><td></td></tr><tr><td>Noggin&nbsp;</td><td>PeproTech</td><td>AF-250-38</td><td></td></tr><tr><td>n-Propyl gallate</td><td>Sigma Aldrich</td><td>P3130</td><td></td></tr><tr><td>Paraffin wax&nbsp;</td><td>Qualigens</td><td>Q19215</td><td></td></tr><tr><td>Potassium chloride (KCl)</td><td>Qualigens</td><td>Q13305</td><td></td></tr><tr><td>Potassium dihydrogen orthophosphate (KH2PO4)</td><td>Qualigens</td><td>19465</td><td></td></tr><tr><td>Primocin</td><td>Invivogen</td><td>ant-pm-05</td><td></td></tr><tr><td>RBC Lysis Buffer (10X)</td><td>Tonbo biosciences</td><td>TNB-4300-L100</td><td></td></tr><tr><td>Retinoic acid</td><td>Sigma Aldrich</td><td>R2625</td><td></td></tr><tr><td>Rocki&nbsp; (Y-27632)</td><td>Cell Signalling Technology</td><td>13624S</td><td></td></tr><tr><td>R-spondin 1</td><td>PeproTech</td><td>315-32</td>

um método otimizado para isolar epitélio uretral feminino de camundongos para análise de células únicas e imunofluorescência

An Optimized Method To Isolate Female Mouse Urethral Epithelium For Single-Cell And Immunofluorescence Analysis

Um método otimizado para isolar epitélio uretral feminino de camundongos para análise de células únicas e imunofluorescência

The urethra, lined by epithelial cells, serves as the conduit for urine outflow from the body. The epithelial lining of the urethra comprises distinct ...

an-optimized-method-to-isolate-female-mouse-urethral-epithelium-for

Research

JoVE Journal

Biology

Biologia

Este vídeo vai demonstrar os métodos para induzir transurethrally infecções do trato urinário do mouse e quantificar a extensão das infecções resultantes.

Indução transuretral de rato infecção urinária

Aqui, descrevemos uma produção eficiente de...

A High Throughput In situ Método de hibridização para caracterizar padrões de expressão de mRNA no Rato Fetal Trato urogenital inferior

Uma maneira eficiente de isolar linfócitos a partir do tracto genital rato é descrito. Este método tira vantagem da digestão enzimática e separação por gradiente de Percoll para permitir o isolamento eficaz. Esta técnica é também adaptável para utilização em espécies de...

O isolamento de linfócitos de rato Genital Tract Mucosa

Fonte: Yang, E., et al. Isolamento de comunidades bacterianas intracelulares individuais geradas a partir de um modelo murino de infecção urinária para análise de células únicas a jusante. J. Vis. Exp. (2019)Este vídeo demonstra o isolamento manual de células epiteliais individuais contendo comunidades bacterianas intracelulares a partir da bexiga de camundongos infectados usando micropipetamento oral, possibilitando a análise subsequente de células únicas de populações viáveis de E. coli...

Isolamento de Células Epiteliais da Bexiga de Camundongo Contendo Comunidades Bacterianas Intracelulares

Neste vídeo, descrevemos o procedimento para a dissecção do sistema urogenital ou UGS de um modelo de camundongo macho. Este UGS é posteriormente dissecado ex vivo para isolar a próstata e estudar seu papel no desenvolvimento do câncer de próstata.

Extraindo a próstata do sistema urogenital de camundongo: uma técnica para separar a próstata de outros órgãos do sistema urinário e genital em camundongos machos

O modelo estabelecido de transuretral cateterismo de ratos permite o estudo das patologias de bexiga, incluindo a infecção do trato urinário, mas só pode ser realizado nas fêmeas. Um novo modelo de instilação transuretral masculino, apresentado aqui, permitirá a pesquisa em uma área marcada por fortes diferenças clínicas e epidemiológicas entre os sexos.

Infecção do trato urinário em um modelo Animal de pequeno porte: transuretral cateterismo de ratos machos e fêmeas

Este protocolo descreve um método simples de isolar células epiteliais única, infectados-bexiga de um modelo murino de infecção do trato urinário.

Isolamento de comunidades de bacterianas intracelulares único gerado a partir de um modelo murino de infecção do trato urinário para análise de célula única a jusante

Este protocolo descreve a microdisseção assistida pela transilação de segmentos de túbulos seminiferos adultos representando estágios específicos do ciclo epitelial seminiferante, e tipos de células, e posterior imunossuagem de preparações de abóbora e segmentos de tubulações intactas.

Dissecção assistida por transilluminação de etapas específicas do ciclo epitelial seminifero do rato para análises de imunostaining a jusante

Um método de microdisseção do oviduto do camundongo que permite a coleta dos segmentos individuais, mantendo a integridade do RNA, é apresentado. Além disso, é descrito o procedimento de dissociação de células oviducais não enzimáticas. Os métodos são apropriados para análise genética e proteica subsequente dos segmentos oviductais funcionalmente diferentes e células oviductais dissociadas.

Microdisseção e Dissociação do Ovídeo Murine: Identificação do Segmento Individual e Isolamento de Célula Única

Este protocolo descreve metodologias para estabelecer organoides epiteliais endometriais de camundongos para expressão gênica e análises histológicas.

Estabelecendo organoides endometriais 3D do útero do rato

Este protocolo descreve um método de um dia para o isolamento de células epiteliais da trompa de Falópio humana. As células epiteliais isoladas podem ser plaqueadas em cultura bidimensional (2D) ou dissociadas em suspensões de célula única e utilizadas em experimentos a jusante, incluindo citometria de fluxo e sequenciamento de RNA de célula única.

Um método eficiente para extrair o epitélio da trompa de Falópio humano para análises de célula única

Aprenda a isolar epitélio uretral feminino de camundongos para análise de células únicas e imunofluorescência. Este método otimizado permite estudos detalhados sobre defesa imunológica no trato urinário inferior.

Um método otimizado para isolar epitélio uretral feminino de camundongos para análise de células únicas e imunofluorescência

Explorar mais vídeos