Name: Caracterização funcional de parceiros pré e pós-sinápticos individuais no sistema nervoso central larvar de Drosophila usando CaMPARI (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-06-16T13:20:00.000+00:00
Duration: 8 min 5 s
Description: Aprenda a caracterizar conectividade sináptica funcional em larvas de Drosophila usando CaMPARI e optogenética. Este método valida conexões neurais em animais intactos, fornecendo dados funcionais para estudos de conectoma.

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<table><tbody><tr><td>0.1 M Phosphate Buffered Saline (PBS)</td><td>Sigma Aldrich</td><td>P5368-10PAK</td><td>Produto químico usado na solução para hidratar e montar larvas</td></tr><tr><td>All-trans-retinal (ATR)&nbsp;</td><td>Sigma Aldrich</td><td>R2500-500mg</td><td>Produto químico adicionado à comida para ativar ferramentas optogenéticas</td></tr><tr><td>Microscópio confocal</td><td>ZEISS&nbsp;</td><td>LSM900 Confocal</td><td>Microscópio confocal, Lente objetiva (40&times;/1.2 NA), Fonte de luz/laser (405, 488, 561 nm)</td></tr><tr><td>Lâminas de vidro (18x18mm)</td><td>VWR</td><td>48366-205</td><td>Usado para montar animais para imagem</td></tr><tr><td>Etanol (95%)</td><td>Sigma Aldrich</td><td>E7023</td><td>Usado como solvente para o pó ATR</td></tr><tr><td>Fiji (ImageJ)</td><td>Código aberto</td><td>RRID:SCR_002285&nbsp;</td><td>Usado para análise de imagem</td></tr><tr><td>Prism versão 10.4.1</td><td>GraphPad Software Inc.</td><td>RRID:SCR_002798</td><td>Usado para análise estatística</td></tr><tr><td>Lâminas de microscópio</td><td>VWR</td><td>&nbsp;48300-041</td><td>Usado para montar animais para imagem</td></tr><tr><td>Massa de modelar</td><td>Flinn scientific</td><td>FB0600</td><td>Usado para segurar a lâmina de vidro no slide de microscópio com larvas entre elas</td></tr><tr><td>Pincel&nbsp;</td><td>Genesee scientific</td><td>59-204</td><td>Usado para transferir larvas entre locais</td></tr><tr><td>Meio padrão de ágar de farinha de milho</td><td>Genesee scientific</td><td>66-123</td><td>A comida também pode ser preparada usando receitas e ingredientes padrão semelhantes</td></tr><tr><td>Frascos plásticos padrão para Drosophila (frasco estreito Drosophila de 25mm x 95mm)</td><td>Genesee scientific</td><td>32-109</td><td>Frascos ou garrafas grandes também podem ser usados</td></tr><tr><td>Prato de micro manchas de três poços</td><td>Electron Microscopy Sciences&nbsp;</td><td>71561-01</td><td>Prato usado para separar e limpar larvas individuais</td></tr><tr><td>Estoque de Drosophila (genótipo: w; Basin4-LexA/CyO-TwGFP; ppk-GAL4/ppk-GAL4)&nbsp;</td><td>Bloomington Drosophila Stock Center</td><td>RRID:BDSC_54899 &amp; RRID:BDSC_32079</td><td>Obtido da recombinação de RRID:BDSC_54899 e RRID:BDSC_32079</td></tr><tr><td>Estoque de Drosophila (genótipo: w, UAS-IVS-CsChrimson.mVenus, LexAOp-CaMPARI2; Sp/CyO)</td><td>Bloomington Drosophila Stock Center</td><td>RRID:BDSC_81085</td><td>Obtido da recombinação de RRID:BDSC_81085 com marcadores do segundo cromossomo</td></tr></tbody></table>

caracterização funcional de parceiros pré e pós-sinápticos individuais no sistema nervoso central larvar de drosophila usando campari

Functional Characterization of Individual Pre- and Postsynaptic Partners In the Drosophila Larval Central Nervous System Using CaMPARI

Caracterização funcional de parceiros pré e pós-sinápticos individuais no sistema nervoso central larvar de Drosophila usando CaMPARI

Connectome studies have greatly expanded understanding of synaptic connectivity in the nervous systems of various species. While characterization of ...

functional-characterization-individual-pre-postsynaptic-partners

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Neurociência

Gravação eletrofisiológicas na Drosophila Embrião

Dissecção e imagem das Zonas de Ativos no Drosophila Junção neuromuscular

Análise de microarrays foi conduzido para determinar perfis de expressão genética...

Determinar perfis de expressão genética em C. elegans Usando Microarray e PCR em tempo real

A arborização dendrítica de neurônios sensoriais...

Análise morfológica de Drosophila Larval sensorial periférica Dendrites Neuron e axônios Usando Mosaicos Genéticos

Este protocolo demonstra como Ensaio de Proximidade A ligadura pode ser utilizada para detectar em interacções proteína-proteína in situ na junção neuromuscular, de larvas de Drosophila. Com esta técnica, os discos grande e Hu-li Shao tai são apresentados para formar um complexo na região pós-sináptica, uma associação previamente identificado por meio de co-imunoprecipitação.

Detecção de In Situ Complexos proteína-proteína no Drosophila Larval Junção Neuromuscular Usando Proximity Ligation Assay

Aqui nós mostramos como quantificar o número ea distribuição espacial das zonas ativas sinápticas em fotorreceptores de Drosophila melanogaster, destacou com um marcador molecular geneticamente codificado, e sua modulação após a exposição prolongada à luz.

Analisando Synaptic Modulação da<em&gt; Drosophila melanogaster</em&gt; Fotorreceptores após exposição à luz prolongada

Aqui, nós apresentamos um protocolo para uma técnica de marcação de mosaico que permite a visualização dos neurónios derivados de uma célula progenitora comum em duas cores distintas. Isso facilita a análise de linhagem neural com a capacidade de neurônios individuais-datando de nascimento e função do gene estudar nos mesmos neurônios de diferentes indivíduos.

Análises celular linhagem e estudos da função de genes utilizando marcm Twin-ponto

Correntes sinápticas podem ser gravadas focally de boutons sinápticas visualizados na drosófila terceiro ínstar larvas junção neuromuscular. Esta técnica permite monitorar a atividade de um único bouton sináptica.

Macropatch focal gravações das correntes sinápticas da junção Neuromuscular Larval da drosófila

Aqui nós apresentamos um protocolo com que o cálcio pre-e/ou pós-sináptica pode ser visualizado no contexto da aprendizagem e da memória de Drosophila . A imagem latente in vivo do cálcio que usa sensores synaptically localizados do cálcio é combinada com um paradigma olfactory clássico do condicionamento tal que a plasticidade sináptica subjacente este tipo de aprendizagem associativa possa ser determinada.

In vivo Optical cálcio Imaging de aprendizagem induzida por plasticidade sináptica em Drosophila melanogaster

Descrevemos um método para rastreamento retrógrado dos neurônios motores embrionários Drosophila usando corantes fluorescentes lipofílicos.

Rastreamento retrógrado de neurônios motores embrionários drosophila usando corantes fluorescentes lipofílicos

Descrevemos um protocolo para medir contatos entre células em camadas epiteliais adjacentes em discos imaginários de asas de Drosophila vivos usando uma abordagem baseada em reconstituição GFP.

Um sistema de expressão dupla baseado em complementação GFP para avaliar o contato célula-célula mediado por citonemas em discos imaginais de asas de Drosophila vivas

Aprenda a caracterizar conectividade sináptica funcional em larvas de Drosophila usando CaMPARI e optogenética. Este método valida conexões neurais em animais intactos, fornecendo dados funcionais para estudos de conectoma.

Caracterização funcional de parceiros pré e pós-sinápticos individuais no sistema nervoso central larvar de Drosophila usando CaMPARI (Vídeo) | JoVE Journal

Caracterização funcional de parceiros pré e pós-sinápticos individuais no sistema nervoso central larvar de Drosophila usando CaMPARI

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