Name: Ensaios simples e acessíveis para eclosão de ovos em Caenorhabditis elegans: Formatos Adaptáveis para Testes de Drogas (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-07-03T14:40:00.000+00:00
Duration: 8 min 11 s
Description: Aprenda ensaios de eclosão de ovos em Caenorhabditis elegans com três configurações adaptáveis para pesquisa e ensino. Este método oferece plataformas flexíveis para triagem de drogas e toxicologia.

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</ol>

<table><tbody><tr><td>Bacteriological Agar</td><td>Britania&nbsp;</td><td>B0101406</td><td>deve ser preparado fresco (1,7 gr em 100 mL&nbsp;H2O)</td></tr><tr><td>Bleach solution</td><td>N/A</td><td>N/A</td><td>1,2 % (v/v) NaOH e 0,5 M NaOH</td></tr><tr><td>Centrifuge</td><td>ThermoScientific.&nbsp;</td><td>Sorvall ST16R.&nbsp;&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Centrifuge</td><td>BiofugePICO para tubo eppendorf</td><td>Heraeus 75003235&nbsp;&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Digital camera</td><td>ToupCam&nbsp;</td><td>TP605100A</td><td>Câmera digital industrial. Comprimento focal ajustável USB 2.0</td></tr><tr><td>DMSO</td><td>BioBasic&nbsp;</td><td>RAS#7-68-5</td><td>MW: 78,13</td></tr><tr><td>Linalil Acetate&nbsp;</td><td>SIGMA</td><td>No.CAS: 115-95-7</td><td>deve ser preparado fresco</td></tr><tr><td>Lysogeny broth (LB) medium</td><td>N/A</td><td>N/A</td><td>10 g Bacto-triptona, 5 g extrato de levedura, 10 g NaCl para 1 L de água destilada&nbsp;</td></tr><tr><td>M9 Buffer&nbsp;</td><td>N/A</td><td>N/A</td><td>3 g KH2PO4, 6 g Na2HPO4, 5 g&nbsp; NaCl, 0,25 g MgSO4 para 1 L de água destilada</td></tr><tr><td>Mini Rotator &nbsp;</td><td>BioSan</td><td>Bio RS-24</td><td></td></tr><tr><td>Nematode Growth Medium (NGM)</td><td>N/A</td><td>N/A</td><td>3 g NaCl, 17 g agar, 2,5 g&nbsp; Bacto-Peptona para 1 L de água destilada. Esterilizado por autoclavagem. Suplementado com 1 mL de colesterol (5 mg/mL),&nbsp; 1 mL de CaCl2 (1 M), 25 mL de tampão de fosfato de potássio (1 M, pH 6,0) e 1 mL&nbsp; MgSO4 (1 M)</td></tr><tr><td>Petri Dish (3 - 5 mm)</td><td>ThermoScientific. Nunclon DeltaSurface&nbsp;</td><td>153066</td><td></td></tr><tr><td>Petri Dish (90 mm x 15 mm)</td><td>ExtraGene&nbsp;</td><td>1026160305</td><td>Apenas para uso laboratorial, Poliestireno.&nbsp;</td></tr><tr><td>Pipette</td><td>Fisherbrand</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>SigmaPlot 12.0</td><td>Systat Software</td><td>N/A</td><td>Versão 12.0</td></tr><tr><td>Stereomicroscope</td><td>ARCANO</td><td>ZTX-T 1:4 LED</td><td>Estereomicroscópio trinocular (10x&ndash;40x magnificação total; iluminação incidente e transmitida por LED)</td></tr><tr><td>Sucrose&nbsp;</td><td>Laboratorio Cicarelli&nbsp;</td><td>Art 841</td><td>60 % (v/v) sacarose&nbsp;</td></tr><tr><td>Tissue culture plate 96 well&nbsp;</td><td>Biofil&nbsp;</td><td>TCP 012096</td><td>Poliestireno, Tampa de Baixa Evaporação.&nbsp;</td></tr><tr><td>ToupView&nbsp;</td><td>ToupTek Photonics</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Transcinnamaldehyde (TCA)</td><td>Santa Cruz Biotechnology&nbsp;</td><td>J1712</td><td>Deve ser preparado fresco</td></tr></tbody></table>

ensaios simples e acessíveis para eclosão de ovos em caenorhabditis elegans: formatos adaptáveis para testes de drogas

Simple and Accessible Egg-Hatching Assays in Caenorhabditis elegans: Adaptable Formats for Drug Screening

Ensaios simples e acessíveis para eclosão de ovos em Caenorhabditis elegans: Formatos Adaptáveis para Testes de Drogas

Egg-hatching assays (EHA) are widely used to evaluate the effects of chemical compounds on early developmental stages of nematodes, particularly in ...

Nós desenvolvemos ensaios simples e escalonáveis de eclosão de ovos de C. elegans para avaliar os efeitos de compostos no desenvolvimento embrionário. Os métodos existentes carecem de um fluxo de trabalho padronizado e adaptável. Este protocolo fornece uma abordagem escalonável e padronizada, adequada tanto para triagem de baixo quanto de alto rendimento.Inicie com três a cinco placas de meio de crescimento para nematoides contendo culturas confluentes de adultos grávidos. Selecione placas com grande número de vermes grávidos e ovos visíveis, indicando reprodução ativa. Adicione água destilada a cada placa e transfira suavemente os vermes para um tubo cônico de 15 mililitros. Evite raspar a superfície do ágar para minimizar detritos. Centrifugue a 266 g durante três minutos para sedimentar os vermes, remova o sobrenadante contendo bactérias e repita a etapa de lavagem três vezes. Para isolar os ovos, re-suspenda o sedimento de vermes em solução de hipoclorito recém-preparada. Agite vigorosamente o tubo para promover a desintegração dos corpos adultos e a liberação dos ovos. Não exceda cinco minutos de incubação. Confirme ao microscópio que os corpos adultos estão majoritariamente d

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Research

JoVE Journal

Biology

Biologia

Um procedimento para líquidos baseados em cultura e distribuição...

Alto rendimento Triagem e Biossensoriais com Fluorescente C. elegans Cepas

C. elegans O comportamento de postura de ovos pode fornecer informações importantes em estudos de desenvolvimento, reprodutivos e anatômicos. Este vídeo apresenta as etapas importantes de um ensaio de postura de ovos e mostra um experimento de amostra no qual um medicamento é testado quanto à toxicidade reprodutiva.

Ensaio de postura de ovos: um método para quantificar o comportamento de postura de C. elegans

Fonte: Anderson, Q. L. et al. Um patossistema de C. elegans de alto rendimento, alto conteúdo e base líquida. J. Vis. Exp. (2018)Este vídeo demonstra um método de triagem de alto rendimento usando Caenorhabditis elegans para estudar knockdowns de genes durante interações patógeno-hospedeiro. Ele descreve o procedimento para preparar vermes knockdown e transferi-los para placas de ensaio para avaliar os efeitos da morte de vermes induzida por patógenos.

Um ensaio multipoço à base de líquido para triagem de knockdowns de C. elegans

Um método para avaliar quantitativamente a resposta quimiotáctica...

C. elegans Chemotaxis Assay

Descrevemos as etapas detalhadas de um ensaio químico de alto rendimento no nematóide Caenorhabditis elegans usado para avaliar a toxicidade da linha germinativa. Neste ensaio, a interrupção da função germinativa após a exposição química é monitorada usando um repórter fluorescente específico para embriões aneuploides.

Avaliação Compreensiva de Germline Chemical Toxicity Usando o Nemátodo<em&gt; Caenorhabditis elegans</em

Apresentamos uma configuração e protocolo de gravação de comportamento que permitem análise automatizada do nematóide, preferência de Caenorhabditis elegans por compostos solúveis em um ensaio populacional. Este artigo descreve a construção de uma câmara de comportamento, o protocolo de ensaio comportamental e o uso de software de análise de vídeo.

Análise automatizada de um ensaio de preferência quimiossensorial baseado na população de um nematodo

Aqui descrevemos um protocolo simples para produzir rapidamente centenas de ágar de mídia de crescimento nematoide, placas de cultura de 96 poços, com números consistentes de Caenorhhabditis elegans por bem. Estas culturas são úteis para a seleção fenotípica de organismos toda. Nós focamos usando essas culturas para produtos químicos de tela para efeitos de pro-longevidade.

Um método simples para High Throughput Screening químico em Caenorhabditis Elegans

Para estudar as interações acompanhante-acompanhante e acompanhante-substrato, realizamos telas de interação sintética em elegans caenorhabditis usando interferência de RNA em combinação com mutações leves ou sobre-expressão de acompanhantes e monitorar disfunção proteica específica do tecido no nível do organismo.

Usando elegans caenorhabditis para tela para interações de acompanhantes específicas de tecido

O nematode geneticamente tratável Caenorhabditis elegans pode ser usado como um modelo simples e barato para a descoberta de drogas. Descrito aqui é um protocolo para identificar terapêutica anticancerígenas que inibem a sinalização a jusante das proteínas RAS e EGFR.

Identificação de Inibidores EGFR e RAS utilizando elegans caenorhabditis

Aqui, apresentamos um método geral para determinar a viabilidade embrionária e o número total de embriões produzidos (ninhada) usando o organismo modelo C. elegans.

Mensuração da Viabilidade Embrionária e do Tamanho da Ninhada em Caenorhabditis elegans

Esse protocolo oferece um procedimento simples e de baixo custo para quantificar a taxa de letalidade embrionária em Caenorhabditis elegans. Ele permite a detecção direta de anomalias embrionárias em populações, sem equipamentos especializados ou expertise em coleta de vermes. O protocolo pode ser usado para quantificar os efeitos de mutações genéticas, derrubamentos gênicos mediados por interferência de RNA e dieta.

Quantificando a Taxa de Letalidade Embrionária em Caenorhabditis elegans

Aprenda ensaios de eclosão de ovos em Caenorhabditis elegans com três configurações adaptáveis para pesquisa e ensino. Este método oferece plataformas flexíveis para triagem de drogas e toxicologia.

Ensaios simples e acessíveis para eclosão de ovos em Caenorhabditis elegans: Formatos Adaptáveis para Testes de Drogas

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