30 de julho de 2008
O microscópio de luz é uma ferramenta básica para a biologia celular, que deve ter um entendimento completo de como ele funciona, como ele deve ser alinhado para diferentes aplicações, e como ele deve ser mantido como necessário para obter a capacidade máxima de formação da imagem e resolução. Os componentes do microscópio são descritos em detalhes aqui.
Os microscópios de luz são ferramentas essenciais na pesquisa biomédica. Os componentes ópticos permitem uma resolução de imagem muito maior do que a visualização a olho nu. Ao combinar microscopia com processamento digital de imagens, os pesquisadores podem aumentar a visibilidade da imagem e fazer medições quantitativas precisas.
Este vídeo irá guiá-lo através do microscópio, principais componentes e suas funções. Olá, sou Victoria Sanon Frolic, do Core Optical Imaging Facility do Centro de Ciências da Saúde da Universidade do Texas, em San Antonio. Hoje vou mostrar os principais componentes do seu microscópio de vida e suas funções básicas.
Então, vamos fazer um tour pelo seu microscópio. Antes de usar um microscópio, é melhor se familiarizar com seus componentes e suas funções. Este é um microscópio de luz composto invertido Nikon eclipse TI equipado para microscopia de luz transmitida e epifluorescente.
A direção ao longo do eixo do microscópio será chamada de eixo Z e as direções perpendiculares como eixo X e Y. Primeiro, examinaremos o tubo do corpo da ocular, a peça do nariz contendo as objetivas e o palco. Estes são os principais componentes formadores de imagem do microscópio.
As peças são a interface entre o observador e o microscópio. Ao segurar a base dos tubos da ocular binocular, você pode ajustar a distância interpupilar aproximando-os ou afastando-os. Isso permite que você visualize confortavelmente com os dois olhos.
Simultaneamente, o foco da ocular também pode ser ajustado para cada olho de forma independente. A ampliação da ocular está marcada no cano. As câmeras são rotineiramente montadas em microscópios para aquisição de imagens.
Este osciloscópio específico usa um adaptador de montagem C para conectar uma câmera CCD à porta lateral do corpo do microscópio. Um botão no microscópio é girado para posicionar um prisma para direcionar a imagem formando raios de luz para longe das oculares e em direção à câmera, que é montada na porta da câmera. As diferentes objetivas, que ditam a maior parte da ampliação e resolução, são montadas em uma peça de nariz giratória.
Cada objetiva é marcada com especificações como ampliação, abertura numérica, meio de imersão necessário, como glicerina de óleo ou espessura da lamínula da cobertura de ar, e outros recursos especiais, como o modo de iluminação, a luz que deixa a ocular e as peças do nariz desfocadas ou projetadas ao infinito. O tubo do corpo contém uma lente de foco positivo que foca a luz de imagem para a ocular ou câmera. Agora que mostrei os componentes de formação de imagem do osciloscópio, vamos dar uma olhada nos componentes que nos ajudarão a focar em uma imagem e fazer ajustes na luz transmitida.
Em seguida, examinaremos o estágio da amostra, que é o transportador mecânico que segura a lâmina da amostra. Girando os botões, você pode ajustar as amostras nas direções x e y. Na configuração do microscópio invertido, a platina é fixa e a amostra é focada movendo as objetivas para cima e para baixo ao longo dos Z AEs usando botões de foco fino e de curso no corpo do microscópio.
Agora vamos examinar os componentes de transiluminação do microscópio de luz, que fornecem a luz para visualizar seus espécimes. Primeiro, temos a lâmpada e a carcaça, que fornece a luz para iluminar a amostra Para microscopia de luz, a lâmpada é normalmente uma lâmpada halógena de baixa tensão com um filamento de tungstênio que pode ser ajustado para controlar a intensidade da luz. Um obturador pode ser colocado após a fonte de luz para controlar a duração da iluminação.
Logo após a fonte de luz ser um ajuste do diafragma de campo do campo, o diafragma controla a área ou campo da amostra a ser iluminada. Em seguida está o componente conhecido como condensador, cuja principal função é focar a iluminação uniforme e brilhante na amostra. O condensador ou diafragma de íris localizado na parte inferior do condensador controla o ângulo do cone do condensador de iluminação da amostra.
O ajuste deste diafragma controla o tamanho e a abertura numérica do cone de luz direcionado para a amostra, resultando em iluminação correta, contraste e profundidade de campo O ajuste óptico do diafragma do condensador resulta no preenchimento adequado do elemento da lente frontal da lente objetiva. Idealmente, esse ajuste deve ser feito para cada objetiva, a fim de realizar todo o potencial da lente. Para iluminação epifluorescente, a fonte de luz é normalmente uma lâmpada de arco de xenônio ou mercúrio.
Em nosso escopo, temos uma lâmpada de arco de fonte de luz à base de mercúrio que deve ser manuseada com cuidado, pois pode explodir. Se maltratado. Certifique-se de usar luvas ao instalar a lâmpada, pois impressões digitais e detritos podem criar pontos quentes e fazer com que a lâmpada rache, é altamente recomendável não deixar uma lâmpada de arco elétrica por mais tempo do que o número de horas para o qual ela é classificada.
O caminho da luz fluorescente inclui um diafragma de campo e um diafragma de abertura. Semelhante ao caminho da luz de transmissão. Além desses diafragmas, a luz encontrará um conjunto de filtros que selecionam a largura de banda da luz e direcionam a iluminação para a objetiva para alcançar a amostra na via de iluminação epi, a objetiva atua tanto como condensador quanto como objetiva.
Acabamos de mostrar os principais componentes do seu microscópio óptico. Comecei mostrando os componentes formadores de imagem do microscópio, ou seja, as oculares, a objetiva e a câmera CCD. Em seguida, revisamos a manipulação do palco, os botões de ajuste de foco e o condensador.
Então é isso. Obrigado por assistir e boa sorte com sua microscopia.
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O microscópio óptico é um instrumento fundamental na pesquisa biomédica, proporcionando resolução de imagem aprimorada em comparação com o olho nu. Este artigo detalha os principais componentes dos microscópios ópticos e suas funções, essenciais para pesquisadores da área.
Compreender os componentes do microscópio óptico é fundamental para a obtenção confiável de imagens celulares em fluxos de trabalho de descoberta inicial. O alinhamento e a manutenção adequados garantem qualidade de imagem reprodutível, apoiando a validação de alvos e o desenvolvimento de ensaios. Esse conhecimento reduz a variabilidade técnica e aumenta a confiança preditiva em modelos pré-clínicos.
O microscópio óptico auxilia a biologia da descoberta por meio da verificação de hipóteses e da clarificação de vias, permitindo a redução de riscos biológicos em estágios iniciais.