Name: Obtenção de ovos de Xenopus laevis fêmeas (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2008-08-20T20:12:00.000+00:00
Duration: 4 min 47 s
Description: Aprenda a obter e preparar ovos de Xenopus laevis para estudos de biologia celular e desenvolvimento. Este protocolo demonstra indução da postura, coleta e seleção de ovos viáveis para pesquisa.

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O protocolo de texto completo para essa abordagem experimental está disponível em <a href="http://mrw.interscience.wiley.com/emrw/9780471143031/cp/cpcb/article/cb1110/current/abstract?hd=author,Powers]">protocolos atuais em biologia celular</a> .

Os autores não têm nada a declarar.

obtenção de ovos de xenopus laevis fêmeas

Obtaining Eggs from Xenopus laevis Females

Os ovos de Xenopus laevis intacta, lisadas, e / ou fracionados são úteis para uma ampla variedade de experimentos. Este protocolo mostra como induzir a postura de ovos, coletar e dejelly os ovos, e classificar os ovos para remover quaisquer ovos danificados.

Obtenção de ovos de Xenopus laevis fêmeas

Os ovócitos de Xenopus laevis intactos, lisados e/ou fracionados são úteis para uma ampla variedade de experimentos. Este protocolo demonstra como induzir a postura de ovos, ...

Extratos de ovos de Xip Labis são úteis como fontes de material citoplasmático e de organelas para a reconstituição in vitro de eventos celulares, como montagem do núcleo e importação de proteínas nucleares. É claro que, antes de poder usar extratos de ovos, é necessário obter os ovos de rãs fêmeas. Olá, meu nome é Marie Cross e sou aluna de pós-graduação no laboratório da Dra. Maureen Power, do Departamento de Biologia Celular da Universidade Emory, em Atlanta, Geórgia.Hoje vamos mostrar como obter ovos de ágar-ágar D de fêmeas adultas de opus lavis. Este procedimento inclui os seguintes passos: preparo dos sapos para a postura de ovos com soro de gonadotrofina de rã prenhe, indução da postura de ovos com gonadotrofina coriônica humana e seleção de ovos ou cistos defeituosos. Então, vamos começar.Para produzir ovos, rãs fêmeas maduras são primeiramente sensibilizadas com gonadotrofina de soro de égua prenhe. Para iniciar o procedimento de sensibilização, prepare um tanque contendo cloreto de sódio de cem milimolares para acomodar as rãs. Após a injeção, as rãs sensibilizadas devem ser mantidas numa densidade de aproximadamente uma rã por litro.A produção ideal de ovos é mantida ma

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Research

JoVE Journal

Biology

Biologia

Fertilização de Oócitos Xenopus Utilizando o método de transferência do host

Xenopus embrionárias epitélios são um sistema modelo ideal para estudar os comportamentos das células, como o desenvolvimento de polaridade e mudar de forma durante a morfogênese epitelial. Histologia tradicional de amostras fixa é cada vez mais sendo complementado por live-célula de imagem confocal. Aqui nós demonstrar os métodos para isolar os tecidos de rã e visualizar ao vivo as células epiteliais e seus citoesqueleto usando live-célula microscopia confocal.

Em células vivas, Imagem e Análise Quantitativa de células embrionárias epiteliais em Xenopus laevis</em

Xenopus egg extracto é um sistema modelo útil para investigar o checkpoint danos no DNA. Este protocolo é para a preparação de extractos de ovos de Xenopus e os danos do ADN reagentes indutores de ponto de verificação. Estas técnicas são adaptáveis ​​a uma variedade de abordagens que danificam o ADN no estudo da sinalização checkpoint danificam o DNA.

Estudo da Checkpoint Dano ao DNA usando<em&gt; Xenopus</em&gt; Os extratos de ovos

Produção de<em&gt; Xenopus tropicalis</em&gt; Egg Extrai identificar RNAs associada aos microtúbulos

Um método é descrito para a análise de degradação de proteínas utilizando radiolabeled e proteínas luciferase de fusão em Xenopus extrato do ovo e sua adaptação para high-throughput screening para modulares de degradação de proteínas.

Reconstituição de β-catenina degradação na<em&gt; Xenopus</em&gt; Extrato de ovo

Descrevemos métodos de manipulação de oócitos imaturos de Xenopus laevis, maturação in vitro de oócitos em óvulos e injeção intracitoplasmática de espermatozoides. Este protocolo permite a degradação de algumas proteínas maternas e a superexpressão de genes de interesse na fertilização e, portanto, é valioso para estudar papéis de fatores específicos no desenvolvimento embrionário inicial.

Manipulação e<em&gt; In Vitro</em&gt; Maturação<em&gt; Xenopus laevis</em&gt; Oócitos, seguido de injeção intracitoplasmática de espermatozóide, para estudar o desenvolvimento embrionário

O controle da síntese proteica ocorre principalmente na etapa de iniciação da tradução, cujas deficiências estão ligadas a diversos distúrbios. Para melhor entender sua etiologia, descrevemos aqui um protocolo usando oócitos de Xenopus laevis avaliando a tradução do transcrito mos na presença de um mutante do fator de iniciação da tradução eIF4G1.

Xenopus laevis como um modelo para identificar Tradução Impairment

Os mecanismos de escalonamento celular e intracelular permanecem indescritíveis. O uso de extratos de embriões de Xenopus tem se tornado cada vez mais comum para elucidar mecanismos de regulação do tamanho das organelas. Este método descreve a preparação do extrato de embrião e um novo ensaio de escala nuclear através do qual os mecanismos de regulação do tamanho nuclear podem ser identificados.

Um ensaio-Free Cell Usando<em&gt; Xenopus laevis</em&gt; Embryo Extrai para estudar mecanismos de regulação Tamanho Nuclear

Este protocolo demonstra um método baseado em fluorescência para visualizar a vasculatura e quantificar sua complexidade em Xenopus tropicalis . Os vasos sanguíneos podem ser visualizados minutos após a injecção de um corante fluorescente no coração batendo de um embrião após manipulações genéticas e / ou farmacológicas para estudar o desenvolvimento cardiovascular in vivo .

Visualização e Análise Quantitativa da Angiogênese Embrionária<em&gt; Xenopus tropicalis</em

Descrevemos um método para a preparação e imagem ao vivo de extratos citoplasmáticos não diluídos de ovos de Xenopus laevis .

Xenopus laevis Preparação de extrato de ovo e métodos de imagem vivos para visualização da organização citoplasmática dinâmica

Quando as proteínas precursoras do Fator de Crescimento Transformador são expressas em embriões xenopus laevis, elas escurecem, são cortadas e são secretadas na blastocoele, que começa no final da blastula até o estágio gastrula inicial. Descrevemos um método para aspirar produtos de decote da cavidade blastocoele para análise de imunoblot.

Análise do Fator de Crescimento Transformador ß Produtos de Decote Familiar Secretados Na Blastocoele de Embriões Xenopus laevis

Aprenda a obter e preparar ovos de Xenopus laevis para estudos de biologia celular e desenvolvimento. Este protocolo demonstra indução da postura, coleta e seleção de ovos viáveis para pesquisa.

Obtenção de ovos de Xenopus laevis fêmeas

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