Name: Morris Experiment Maze Água (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2008-09-24T00:00:00.000+00:00
Duration: 4 min 45 s
Description: Aprenda a realizar o teste do labirinto aquático de Morris para avaliar memória espacial e função hipocampal em roedores. Este método permite investigar processos cognitivos e aprendizagem em mamíferos.

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Configurando o labirinto aquático <ol><li> O principal componente do labirinto aquático criado deve ser uma piscina redonda, de cerca de 6 metros de diâmetro e cerca de 3 metros de profundidade. Se você estiver gravando a tarefa com uma câmera de vídeo, certifique-se todos os lados do labirinto estão dentro de campo da câmera de vista. </li><li> Preencha o labirinto de água com água da torneira, que deve ser perto de 26 ° C. Isso pode levar várias horas, por isso deve ser feito com bastante antecedência. Verificar periodicamente a temperatura da água de modo que seja dentro de um grau de 26 ° C. </li><li> Coloque a plataforma de fuga no centro da piscina. Durante o treinamento, deve ser exposta, um centímetro acima da água. Isto ensina o rato que há uma plataforma, e que é o caminho para sair da água. Mais tarde, depois que o animal é treinado e pronto para testes, a plataforma de fuga será logo abaixo da superfície da água, e não serão visíveis porque a água será feito opaco com leite ou tinta não tóxica. Agora, o labirinto de água está pronta para o treinamento dos animais. </li></ol> Pré-treinamento para o labirinto de água <ol><li> Para a formação labirinto de água, a plataforma deve estar no centro da piscina e expôs uma polegada acima da superfície, de modo que o animal sabe que ele está lá. A água deve ser dentro de um grau de 26 ° C. </li><li> Cada animal será submetido três ensaios consecutivos. Primeiro, coloque o animal na plataforma de 20 segundo. </li><li> O labirinto de água tem 4 posições de partida: norte, sul, leste ou oeste. Levar o animal a uma dessas posições. Menor o animal na água, apoiando-o com a mão e trazendo-a para baixo suavemente na água rabo-final em primeiro lugar. Não se estresse do animal por dunking-lo de cabeça. </li><li> Deixe a nadar animal / pesquisa para a plataforma para um máximo de 60 segundos. Na primeira, o animal pode nadar em torno da borda da piscina à procura de uma saída. Eventualmente, o animal vai aprender a pesquisa para a plataforma e suba. </li><li> Uma vez que o roedor atinge a plataforma, parar o cronómetro, e registrar o tempo. Se não encontrar a plataforma em 60 segundos, em seguida, registrar o tempo para este julgamento como um minuto. Não pegue o animal se não conseguir alcançar a plataforma. Ensinar o animal que ele deve nadar até a plataforma. Portanto, gentilmente orientar o animal para a plataforma com a mão. Deixe o animal sentar-se na plataforma por 15 segundos. Se ele cai ou pula fora, delicadamente guiá-la de volta. Isso irá treinar o animal que ele deve ficar na plataforma a ser resgatada da piscina. </li><li> Repita o mesmo procedimento para mais dois ensaios, a partir de uma direção diferente para cada julgamento. </li><li> Uma vez que o animal tenha completado todos os três ensaios, seque-o com uma toalha. Repita o processo de formação de três julgamento por todos os animais de forma consecutiva. Mantenha as direções o mesmo para todas elas, e registrar seus tempos. </li><li> Agora que os animais são treinados, eles estão prontos para realizar o teste de labirinto aquático. </li></ol> Testes de labirinto aquático <ol><li> Para começar a ensaios experimentais com o labirinto de água, encher o tanque para que a plataforma é uma polegada abaixo da superfície da água. Não uso leite em pó desnatado, ou 125 mililitros de tinta não tóxica tempera branca, para tornar a água opaca. </li><li> A temperatura de iluminação e de água deve ser o mesmo que no processo de formação. Cada animal será submetido 12 estudos, que serão três ensaios para cada direção de partida. Cada processo irá durar 60 segundos. Antes de começar, escolher a ordem das direções de partida. Não use a direção começar a mesma duas vezes seguidas, e também não repita a mesma ordem para qualquer uma das direções </li><li> Frente para a parede da piscina, o manipulador animal vai colocar o animal na água, e então passo para trás a partir da piscina e se sentar em um local designado, enquanto o animal executa a tarefa de labirinto. Um sistema de rastreamento de comportamento animal, como o sistema SMART (Instruments San Diego) pode ser usado para monitorar o caminho, assim como outras variáveis. Filmando cada ensaio é menos caro, e perfeitamente adequado alternativa. </li><li> Monitorar o animal até atingir a plataforma, e gravar o tempo que levou. Se o animal não alcançar a plataforma em 60 segundos, o handler irá guiá-lo para a plataforma, como em treinamento. De qualquer maneira, deixe o animal sentar-se por 10 segundos, e depois seca-lo e devolver o animal para uma gaiola de exploração. </li><li> Continue com cada animal para todos os 12 ensaios, com o tratador de animais retornando ao mesmo local designado durante cada ensaio. A ordem dos testes devem ser: um teste para todos os animais, ensaio 2 para todos os animais, ensaio de 3 para todos os animais, etc Deve haver um intervalo inter-julgamento de pelo menos 2 minutos. Periodicamente, limpe a piscina, certifique-se a plataforma está em vigor, e verificar que a temperatura da água é a mesma. </li><li> Depois de todos os animais tenham completado 12 testes, cada um irá realizar um ensaio sonda, em which a plataforma é removida do pool. O julgamento da sonda é realizada para verificar a compreensão do animal do local da plataforma, e observar a estratégia que o animal segue quando se descobre a plataforma não está lá. O manipulador irá liberar o animal a partir do norte. Registrar o número de vezes que o animal atravessa o centro da piscina durante os 30 segundos. </li><li> Quando todos os ensaios da sonda são completos, secar os animais e drenar a piscina. </li></ol>

<ol><li>de Bruin, J. P., Swinkels, W. A., de Brabander, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Response+learning+of+rats+in+a+Morris+water+maze%3A+involvement+of+the+medial+prefrontal+cortex%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Response learning of rats in a Morris water maze: involvement of the medial prefrontal cortex.</a> Behav. Brain Res. 85, 47-55 (1997).</li>
<li>Redish, A. D., Touretzky, D. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+the+hippocampus+in+solving+the+Morris+water+maze%5BTitle%5D)+AND+%22Neural.+Comput%22%5BJournal%5D)">The role of the hippocampus in solving the Morris water maze.</a> Neural. Comput. 1, 73-111 (1998).</li>
<li>D'Hooge, R., De Deyn, P. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Applications+of+the+Morris+water+maze+in+the+study+of+learning+and+memory%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res.+Rev%22%5BJournal%5D)">Applications of the Morris water maze in the study of learning and memory.</a> Brain Res. Rev. 36, 60-90 (2001).</li>
<li>Kallai, J., Makany, T., Karadi, K., Jacobs, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spatial+orientation+strategies+in+Morris-type+virtual+water+task+for+humans%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Spatial orientation strategies in Morris-type virtual water task for humans.</a> Behav. Brain Res. 159, 187-196 (2005).</li>
<li>Morris, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Developments+of+a+water-maze+procedure+for+studying+spatial+learning+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci.+Methods%22%5BJournal%5D)">Developments of a water-maze procedure for studying spatial learning in the rat.</a> J. Neurosci. Methods. 11, 47-60 (1984).</li>
<li>Brandeis, R., Brandys, Y., Yehuda, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+use+of+the+Morris+Water+Maze+in+the+study+of+learning+and+memory%5BTitle%5D)+AND+%22Int.+J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">The use of the Morris Water Maze in the study of learning and memory.</a> Int. J. Neurosci. 48, 26-69 (1989).</li>
<li>Kesner, R. P., Exans, R. B., Hunt, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Further+evidence+in+support+of+the+neurobiological+bases+of+an+attribute+model+of+memory%3A+role+of+the+hippocampus%5BTitle%5D)+AND+%22Int.+J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Further evidence in support of the neurobiological bases of an attribute model of memory: role of the hippocampus.</a> Int. J. Neurosci. 21-22, 21-22 (1987-8).</li>
<li>Jarrard, L. E., Okaichi, H., Steward, O., Goldschmidt, R. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((On+the+role+of+hippocampal+connections+in+the+performance+of+place+and+cue+tasks%3A+comparisons+with+damage+to+the+hippocampus%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">On the role of hippocampal connections in the performance of place and cue tasks: comparisons with damage to the hippocampus.</a> Behav. Neurosci. 98, 946-954 (1984).</li>
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<li>Shumake, J., Gonzalez-Lima, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Brain+systems+underlying+susceptibility+to+helplessness+and+depression%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Cogn.+Neurosci.+Rev%22%5BJournal%5D)">Brain systems underlying susceptibility to helplessness and depression.</a> Behav. Cogn. Neurosci. Rev. 2, 198-221 (2003).</li>
<li>Owen, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Physiology+of+the+menstrual+cycle%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Clin.+Nutr%22%5BJournal%5D)">Physiology of the menstrual cycle.</a> Am. J. Clin. Nutr. 28, 333-338 (1975).</li>
<li>Everett, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neurobiology+of+reproduction+in+the+female+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Monogr.+Endocrinol%22%5BJournal%5D)">Neurobiology of reproduction in the female rat.</a> Monogr. Endocrinol. 32, 1-133 (1989).</li>
<li>Warren, S. G., Humphreys, A. G., Juraska, J. M., Greenough, W. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((LTP+varies+across+the+estrous+cycle%3A+enhanced+synaptic+plasticity+in+proestrus+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res%22%5BJournal%5D)">LTP varies across the estrous cycle: enhanced synaptic plasticity in proestrus rats.</a> Brain Res. 703, 26-30 (1995).</li>
<li>Warren, S. G., Juraska, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spatial+and+nonspatial+learning+across+the+rat+estrous+cycle%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Spatial and nonspatial learning across the rat estrous cycle.</a> Behav. Neurosci. 111, 259-266 (1997).</li>
</ol>

Os autores não têm nada a declarar.

A tarefa de labirinto aquático de Morris foi desenvolvimento pela 5. Esta tarefa pode ser alterada de várias maneiras para investigar a memória de trabalho de memória de referência, ea estratégia a tarefa 6. O procedimento descrito aqui contém duas variáveis ​​críticas que representam um desvio de outras versões do labirinto de água: pré-treinamento e testes em um único dia. Pré-treinamento - o hipocampo está envolvida na memória espacial / relacional 7-8. O labirinto de água, especi...

<table><tbody><tr><td>Sistema SMART</td><td>San Diego Instruments</td><td></td><td></td><td>Este sistema não é obrigatório &amp;#8211; existem muitos outros sistemas comportamentais disponíveis no mercado.</td></tr></tbody></table>

morris experiment maze Água

Morris Water Maze Experiment

O labirinto aquático de Morris é amplamente utilizado para estudar a memória espacial e de aprendizagem. Animais são colocados em uma piscina de água que é colorido opaco com leite desnatado em pó ou tinta não tóxica têmpera, onde devem nadar até uma plataforma escapar escondidos. Porque eles estão na água opaca, os animais não pode ver a plataforma, e não pode contar com cheiro para encontrar a rota de fuga. Em vez disso, eles devem confiar no externo / labirinto extra-pistas. Como os animais se tornam mais familiarizados com a tarefa, eles são capazes de encontrar a plataforma mais rapidamente. Desenvolvido por Richard G. Morris, em 1984, este paradigma tornou-se um dos &quot;padrões ouro&quot; de neurociência comportamental.

O labirinto aquático de Morris é uma ferramenta bem aceita utilizado para documentar o envolvimento do hipocampo em uma tarefa comportamental.

Morris Experiment Maze Água

O labirinto aquático de Morris é amplamente utilizado para estudar a memória espacial e o aprendizado. Os animais são colocados em um tanque de água que é colorida para ficar opaca com pó de...

No labirinto aquático de Morris, os animais são colocados em piscinas com água onde precisam nadar até uma plataforma de escape. Durante o treinamento, a plataforma pode ser exposta cerca de 2,5 cm acima do nível da água. O animal deve aprender a nadar até a plataforma e permanecer nela para ser resgatado da piscina.Após o animal ser treinado, a água é aumentada e tornada opaca com leite ou tinta não tóxica. Assim, a plataforma fica oculta. O animal deve então confiar na memória para encontrar a plataforma de escape.Olá, meu nome é Joseph Nunez. Sou membro do corpo docente do programa de neurociência da Michigan State University. Hoje demonstrarei o labirinto aquático de Morris.Vou mostrar como montar o labirinto aquático, como treinar os animais e como testar os animais. Ok, vamos começar. O componente principal da montagem do labirinto aquático deve ser uma piscina circular, com cerca de seis pés de diâmetro e aproximadamente três pés de profundidade.Se você estiver gravando a tarefa com uma câmera de vídeo, certifique-se de que todos os lados do labirinto estejam dentro do campo de visão da câmera. Encha o labirinto aquático com água da torneira, que deve estar próxima a 26 graus Celsius. Isso pode levar várias horas, portanto, deve ser feito com bastante antecedência.Verifique periodicamente a temperatura da água para mantê-la dentro de mais ou menos um grau de 26 graus Celsius. Coloque a plataforma de escape no centro da piscina. Durante o treinamento, ela pode ficar exposta cerca de 2,5 cm acima do nível da água.Isso ensina a ratazana. Há uma plataforma, e essa é a maneira de sair da água. Agora estamos prontos para iniciar o treinamento dos animais no labirinto aquático.O labirinto aquático possui quatro posições iniciais: norte, sul, leste ou oeste. Leve o animal até uma dessas posições. Baixe o animal na água sustentando-o com a mão e introduza-o suavemente na água pela extremidade da cauda.Primeiro, não estresse o animal mergulhando sua cabeça na água. Deixe o animal nadar por até 60 segundos. Inicialmente, o animal pode nadar pelas bordas da piscina procurando uma saída.Eventualmente, o animal alcançará uma plataforma e subirá. Assim que o roedor atingir a plataforma, pare o cronômetro e registre o tempo. Se ele não encontrar a plataforma em 60 segundos, registre então o tempo da tentativa.Por um minuto. Não pegue o animal. Se ele não conseguir alcançar a plataforma, ensine-o que deve nadar até a plataforma.Guie o animal até a plataforma com sua mão, de maneira bastante suave. Deixe o animal sentado por 15 segundos. Se ele cair ou pular, guie-o novamente com cuidado.Isso treinará o animal para que ele permaneça na plataforma a fim de ser resgatado da piscina. Repita o mesmo procedimento em mais dois ensaios, iniciando em um local diferente a cada vez. Após a conclusão de todos os três ensaios, seque o animal com uma toalha.Repita o processo de treinamento com três tentativas para todos os animais. Mantenha as direções iguais para todos e registre seus tempos. Agora que os animais estão treinados, eles estão prontos para realizar o teste do labirinto aquático.Para iniciar os ensaios experimentais com a água Mae, complete o enchimento do tanque, de modo que a plataforma fique cerca de um centímetro abaixo da superfície da água. Utilize leite em pó desnatado ou tinta guache branca não tóxica para tornar a água opaca.A iluminação e a temperatura da água devem ser as mesmas do processo de treinamento. Cada animal realiza 12 ensaios, três a partir de cada direção inicial. Cada ensaio terá duração de 60 segundos.Antes de começar. Escolha a ordem das direções iniciais. Não use as mesmas direções iniciais duas vezes seguidas e também não repita a mesma ordem para nenhuma das direções.Acompanhe o animal até que ele alcance uma plataforma e registre o tempo que levou. Se o animal não alcançar a plataforma em 60 segundos, o manipulador o guiará até a plataforma como no treinamento. De qualquer forma, deixe o animal sentado por 10 segundos, depois seque-o.Continue com cada animal para todas as 12 tentativas, com o manipulador retornando ao mesmo local designado. Durante cada tentativa, limpe diretamente a piscina, certifique-se de que a plataforma está no lugar e verifique se a temperatura da água é a mesma. Você pode usar o sistema de software de rastreamento de vídeo inteligente para detectar e analisar o comportamento durante as tentativas de teste. É isso. Mostrarei como treinar e testar os animais. Este é um paradigma comportamental muito bem estabelecido. Bom sucesso com os experimentos.

Research

JoVE Journal

Biology

Biologia

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