Методическая статья

Подготовка и использование Phantom Поражения к практике изобразительного Биопсия Стремление иглы

21.2K просмотров

⸱

DOI:

10.3791/1404

⸱

29 сентября 2009 г.

 ,  ,  , 
1Department of Pathology, University of Wisconsin - Milwaukee, 2BioInnovation LLC

В этой статье

Краткое содержание

Практика тонкой иглой стремление биопсии (FNAB) стажерами является относительно сложной, из-за отсутствия легко доступны, соответствующие поражения. Подготовка А.В. поражения фантом для практикующих FNAB процедуры и освоения знаний относительно легко.

Аннотация

В настоящее время медицинские работники, включая жителей и парней нет подходящей фантомные модели на практике тонкоигольной аспирационной биопсии (FNAB) процедуры. В прошлом мы стандартизированные модели, состоящей из латекса перчатки содержащие свежей печени крупного рогатого скота для практикующих FNAB. Однако эта модель очень трудно организовать и подготовить в сжатые сроки, с получением свежей печени крупного рогатого скота является наиболее сложным аспектом. Обработка печени с загрязнением проблемы, связанные также значительное отступать. Кроме того, материала перчаток утечек через несколько игла проходит, что приводит к беспорядок.

Мы установили новый простой способ встраивания небольшой кусок колбасы или банан в коммерчески доступных конопатить силиконовой резины. Эта модель позволяет сохранение уплотнения вакуума и стремление материал из встроенных образец, напоминающий фактическая процедура FNAB на клинических поражений массы.

Атмосферный материал в иглу концентратор может быть обработан похож на образцы закуплены во время фактической процедуры FNAB, облегчая дополнительные знания в рамках подготовки мазков и пятен.

Протокол

  1. Подготовка фантомные поражения (подготовка фантом около 38 до 48 часов до фактического практикующих сессии FNA знаний (рис. 1) или использовать готовый к использованию "А. В. Фантом" от FNA Источник, США. Фантомным поражения (хранится в холодильнике без замораживания) может быть подготовлены еще 3 до 4 дней до начала тренировки.
  2. Практика FNA знания: Хотя мы продемонстрировали, процедуры с использованием THFV Shidham (в ткани комбайн с функциональными Valve) (FNA Источник, США), и любая другая система ПНС могут быть использованы для занятий (рис. 2).
  3. Распространение и обработка аспирата на стеклах (рис. 3).

Материал требуется

  1. Очистить силиконового каучука конопатить, доступны во многих строительства / дом хранит улучшения. Многие бренды доступны в том числе GETM, DAP, Red Devil, Белая Молния, и местные бренды цепи. Мы использовали Открытый силиконовой резины, продуктов из белой молнии, Кливленд, штат Огайо, США, http://www.wlcaulk.com/products/all_purpose/silicone_rubber/wl09010.html )
  2. Пистолет
  3. Кусок пластика обернуть лист (мы использовали Саран Cling Плюс Wrap, SC Johnson & Сын Inc, Расин, штат Висконсин, США http://www.saranbrands.com/plastic-wrap/index.asp
  4. Перчатки из латекса
  5. Широкий банан диаметра или колбасы.
  6. Фирмы и плоской опорной плиты (примерно 6 дюймов x 6 дюймов), изготовленные из плиты толщиной карты, акриловые пластины, или другие.
  7. FNA выполнении оборудования
    • 25 калибр иглы подкожных
    • Shidham в THFV (или другие компоненты для выполнения FNA)
    • стеклах
    • окрашивание комплекты

Шаг за шагом подробно

А. Подготовка поражения призрак (призрак подготовить 1 до 2 дней до практикующих FNA языка (рис. 2) или использовать готовый к использованию "А. В. Фантом" от FNA Источник, США.

  1. Вырезать 6 X 6 дюймов поддержки борту.
  2. Отрежьте 2,5 дюйма длиной сегмента "фантомные поражении ядра" (банан или колбасы).
  3. Выгнать 0,5 дюйма толстый слой конопатить на опорной плите.
  4. Пресс 'фантомных основной поражения "слегка в этот слой из затыкают.
  5. Добавить еще конопатить над «фантомные основным поражением", так что он полностью встроенный в насыпь конопатить, без захвата пузырьков воздуха.
  6. Настройка и формы конопатить над «фантомные поражения основных» с рукой в перчатке.
  7. Возьмите 6 х 6 дюймов кусок размером полиэтиленовой пленкой и покрывают конопатить насыпи и настройки поверхности насыпи в гладких выпуклых конфигурации с чистым, рукой в ​​перчатке.
  8. Давайте лечить конопатить курган на 6-8 часа дольше, чем время отверждения, упомянутых в инструкции продукта (обычно в течение 24 часов), в теплое место.
  9. После отверждения, конопатить должна быть твердой и полиэтиленовую пленку можно легко снимаются.
  10. Поражение FNA фантомные готова быть использованы для отработки процедуры FNA примерно через 8 часов, когда вся насыпь конопатить полностью вылечены в центр содержащей 'фантомных поражении ядра "(банан или колбасы).

Б. Практика FNA знания о поражении А. В. Phantom.

Любой подход в получении высокого качества, адекватного аспиратов FNA с хорошим качеством прямых мазках цитологии следует рассмотреть следующие критические точки-

  1. Иглой, как это подразумевается в названии процедуры, тонкие иглы (калибр выше номера) дают лучшие всасывает с минимальными разбавления крови. Для критических баланс преимуществ и недостатков с 22 по 25 игл калибровочных предпочтительным для оптимальной механической устойчивости иглы, не влияя на качество FNA аспирации.
  2. Управление соответствующей последовательности в применении вакуума и выпуска во время процедуры FNA-Это очень важно для того, чтобы заранее отобранных клеток с каждым взмахом иглы, игла в направлении центра. Тем не менее, атмосферный материал не должно быть позволено достичь в области сборки аспирационная со шприцем. Если это не помешало, материал может быть трудно получить для приготовления мазков (этот материал, однако, могут быть использованы для сотовых подготовка блока или для концентрации таких методов, как цитоспина, фильтр методов, или последние жидких препаратов на основе цитология).
  3. Разработка соответствующих навыков в обработке атмосферный образца, в том числе непосредственная подготовка мазков и на месте адекватности оценки с соответствующей сортировке для вспомогательных тестов, таких как сотовые блок подготовки к выборной иммуноцитохимия, выборные проточной цитометрии для иммунофенотипирования лимфопролиферативных поражений, представив стерильной пропусков для микробиологии исследований, и матриала для молекулярных тестов (цитогенетики и т.д.).

Ба Выполнение FNA процедуры (показано с THFV Shidham [1] (FNA Источник, США), однако любая другая система ПНС могут быть использованы для занятий). (Рис. 3,4,5).

  1. Подготовка сборки FNA при закрытом клапане.
  2. Найдите поражения и вставить иглы в поражении.
  3. Откройте клапан для подключения вакуума, через иглу, чтобы его кончик, для аспирации представитель клеточных компонентов поражения с каждого туда и сюда инсульта в поражении.
  4. Поддерживать вакуум и образцы различных областях поражения, вставив иглу в поражении в разных направлениях.
  5. Закройте клапан для отключения вакуума в иглу просвет.
  6. Выравнивание давления окружающей среды (например, отсоединив шприц-клапанный с иглы на короткое время и восстановить. Если специальное устройство со встроенным шагов, таких как «THFV 'используется, этот и другие шаги с Ba1 через Ba6 являются согласованные автоматически с помощью следующих шагов в различных клапан системы) [1].
  7. Удалите иглу из поражения с клапана закрыты, чтобы предотвратить потерю образца под действием капиллярных сил на поражение, если не будет небольшое отрицательное давление на хаб конца.
  8. Выбить атмосферный содержимого на предметное стекло для подготовки прямых мазка (см. ниже) (рисунок 6).

Bb. Обработка атмосферный образца с соответствующей сортировки
Распространение аспирата на стеклах и подготовка хорошего качества прямых мазках (рис. 6) с последующим надлежащим окрашивания и сортировки (рис. 7,8).

  1. Капля аспирата выбили на стекле распространяется на различные подходы, как показано на (рис. 6) [2]. Обычным подходом является ". Однако, если образец крови разводят некоторые микрофрагментов, избыточная кровь иссякла, наклоняя слайд, а затем микрофрагментов распределены между этим слайд-вторых предметное стекло подобные '. Если аспирация, в основном, отстранение от работы без микрофрагментов, например, из лимфопролиферативных поражений, он распространяется подобные 'б' или 'с'.
  2. Мазки могут быть обработаны и зафиксирована в разному для различных методов окрашивания во время на месте адекватности оценки. Тем не менее, лучшим подходом является воздушно-сухой всех мазков. Сушат на воздухе мазки могут быть окрашены пятнами Романовски (таких, как Difff-Quik пятно, пятно Райт) после фиксации метанолом или Пап пятна после регидратации физиологическим раствором и после фиксации (в 95% этанола или предпочтительно в 95% этанола с 5 % уксусной кислоты) [3]. Ликвидация вмешательства из-за затемнения кровь значительную выгоду [3].
  3. В зависимости от исходного cytomorphologic результаты во время на месте адекватности оценки, дополнительные сортировки (например, выборный блок ячейки, электронной микроскопии, микробиологии культур, проточной цитометрии, молекулярной цитогенетики-тесты и т.д.) рекомендуется, как указано.

Представитель Результаты:

figure-protocol-1
Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию рисунке 1 .
Рисунок 1. Материал, необходимых для подготовки А. В. Phantom для практикующих FNA языка (* Мы используем Саран полиэтиленовой пленкой, которая не прилипает к конопатить в конце, удаляя при этом после полного отверждения затыкают.)

figure-protocol-2
Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию рисунке 2.
Рисунок 2. Подготовка А.В. Phantom поражения

figure-protocol-3
Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию рисунке 3.
Рисунок 3. Критические шаги в процедуре FNA.

figure-protocol-4
Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию рисунке 4.
Рисунок 4. EUS-ПНС-Резюме Критические шаги * (см. рис 3)

figure-protocol-5
Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию рисунке 5.
Рисунок 5. Ловушки, связанные с критических шагов в FNA процессыedure.

figure-protocol-6
Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию рисунке 6.
Рисунок 6. Подготовка прямых мазках FNA образца между двумя горками.

figure-protocol-7
Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию рисунке 7.
Рисунок 7. Влажные фиксированные по сравнению с воздушно-сухой мазков.

figure-protocol-8
Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию рисунке 8.
Рисунок 8. Влажные фиксированные по сравнению с воздушно-сухой мазков.

Обсуждение

Тонкая игла стремление биопсии (FNAB) широко осуществляется как экономичный, безопасный и быстрый минимально инвазивной техники для тканевой диагностики различных опухолей и поражений. Во время этой процедуры от 18 до 27 игла вставляется в поражении, переехал туда и обратно несколько раз в различных областях поражения в контролируемых вакуума (всасывания) различной интенсивности, начиная от минимальной в форме только капиллярного действия примерно до 10 мл вакуум в шприце для получения диагностического материала ткани. Иглы тонкие датчик с большим числом является предпочтительным для получения хорошего материала цитологии подготовить прямых мазков. Более широкие иглы 18G извлекает из более подходящего образца для мобильного блока, проточной цитометрии, электронной микроскопии, цитогенетики, микробиологии культур и т.д. Хотя процедура проста, контролирующих различные этапы при правильном применении и выпуск вакуумного на соответствующих шагов в согласованно крайне важно для достижения оптимальных результатов.

Из-за отсутствия специально разработанных высокодоходные иглы, обычные шприцы или их модификации используются для выполнения этой процедуры. Однако иглы для подкожных инъекций имеют множество ограничений, ведущих к низкой доходности образца, если используется обычным образом. Требование специальной ручки шприца обычно добавляет к сложности процедуры. Таким образом, из-за отсутствия коммерчески доступных подходящего устройства иглу FNAB, это универсальный порядок страдает частой проблемой недостаточного извлечения образца. В последнее время устройство повышения урожайности с воспроизводимостью В работе [1].

Кроме того, в настоящее время наблюдается отсутствие подходящей моделью для практикующих знания при выполнении FNAB медицинским персоналом, в том числе обучение жителей и товарищей. У нас были стандартизированные модели с кусочком свежей печени крупного рогатого скота чучела в латексных перчаток для практикующих FNAB языком. Однако эта модель трудно организовать в кратчайшие сроки. Закупка свежей печени крупного рогатого скота, как правило, предельное положение. Кроме того, обработка печени может ввести загрязнения связанных факторов, как значительный отступать. Тенденция латексные перчатки течь после нескольких уколов иглой приводит к потенциальной путаницы во время тренировки.

Мы сообщаем и описать роман, но простой способ встраивания небольшой кусочек банана (или колбаса) в коммерчески доступных силиконовые затыкают резиновой и других легко доступных материалов. FNAB фантомные сохраняет вакуумное уплотнение что позволяет стремление материал из встроенных образца, эквивалентное фактическая процедура FNAB на поражение в клинических условиях. В этом видео, мы демонстрируем порядок внесения FNAB фантомные поражения и практикующих FNAB процедуры. Он также демонстрирует, вкратце обработки полученных образцов в том числе подготовка мазков и пятен [2,3].

Потому что конопатить нужно время, чтобы вылечить, поражение фантомные должны быть подготовлены заранее о 24 до 48 часов до практикующих сессии. Сопоставимые готовы к использованию фантомного поражения может быть получена из коммерческих источников (FNA Источник, США).

Фантомные поражение для практикующих FNAB знания могут быть использованы для обучения жителей и парней до начала FNAB производительность на пациентах в клинических условиях.

Ссылки

  1. Shidham, V. B., Pandit, A. W., Rao, R. N., Basir, Z., Shidham, A. Tissue Harvester with Functional Valve (THFV): Shidham's device for reproducibly higher specimen yield by fine needle aspiration biopsy with easy to perform steps. BMC Clinical Pathology. 7 (2), (2007).
  2. Shidham, V. B., Epple, J. AppendiX I: Collection and processing of effusion fluids for cytopathologic evaluation. Shidham, V. B., Atkinson, B. F. , 'Cytopathologic Diagnosis of Serous Fluids' First edition, Elsevier; W.B. Saunders Company. Chapter 15 207-235 (2007).
  3. Shidham, V., Kampalath, B., England, J. Routine air drying of all the smears prepared during fine needle aspiration and intraoperative cytology studies: An opportunity to practice a unified protocol, offering the flexibility of choosing variety of staining methods. Acta Cytologica. (45), 60-68 (2001).

Перепечатки и разрешения

Запросить разрешение на повторное использование текста или иллюстраций этой статьи JoVE

Запросить разрешение

Теги

Похожие статьи