Техника, необходимые для визуализации бьющееся сердце в личинок и взрослых Drosophila Представлены. Каждая стадия развития требует иной методологии.
Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.
Методическая статья
Визуализация бьющееся сердце в Drosophila
В этой статье
Краткое содержание
Протокол
Перед тем как начать
Взрослые сердца
- Недавно подготовить искусственные гемолимфы (АГ) раствор, содержащий 108 Na +, 5 мМ К +, 2 мМ Ca 2 +, 8 мм MgCl 2, 1 мМ NaH 2 4 PO, 4мм NaHCO 3, 10 мМ сахарозы, 5 мМ трегалозы, 5 мМ HEPES (рН 7,1, все реагенты из Sigma Chemicals). Сахарозы и трегалозу должны быть добавлены к AH из холодильника растворы непосредственно перед использованием, чтобы предотвратить бактериальное загрязнение.
- Принесите AH до комнатной температуры и кислородом раствор воздух-барботажных в течение 15 мин.
- Потяните несколько тонких капиллярах (на....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Обсуждение
Модель Drosophila оказался мощный генетический инструмент, который был использован для решения различных научных вопросов, начиная от эмбрионального развития к обучению и память. В последнее время этот универсальный организм модели был использован для исследования генетики функции сердца в лету. Количество попыток количественно сердце физиологии во взрослой дрозофилы полагались на наблюдениях, сделанных в интактных летит через брюшную кутикулы. Большинство из этих подходов не полагались на визуальном наблюдении или запи.......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Благодарности
КО проводится при поддержке гранта от Американской ассоциации сердца.
....Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Материалы
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| Микродиссекционные пружинные ножницы (изогнутые) | Roboz Surgical Instruments Co. | RS-5611 | Подходят для грубых разрезов (шаг 3) |
| Микродиссекционные пружинные ножницы (прямые) | Roboz Surgical Instruments Co. | RS-5620 | |
| Пинцет Dumont #55 | Fine Science Tools | 11295-51 | |
| Пинцет Dumont #5 | Fine Science Tools | 11295-10 | |
| Стеклянные капилляры, 100ul | VWR international | 53432-921 | |
| Стеклянные капилляры, тонкие | Science Products | GB100T8P | |
| Пипет-пуллер | Sutter Equipment | P-97 | Подходят как горизонтальные, так и вертикальные пипет-пуллеры |
| Пластиковая трубка | Tygon | 1/16” внутренний диаметр | для капилляров 100μl |
| Пластиковая трубка | Tygon | 1/32” внутренний диаметр | для малых капилляров |
| Тканевый клей Histoacryl® | B. Braun Medical |
Ссылки
- Ocorr, K., Reeves, N., Wessells, R. J., Fink, M., Chen, H. -S. V., Akasaka, T., Yasuda, S., Metzger, J., Giles, W., Posakony, J. W., Bodmer, R. KCNQ potassium channel mutations cause cardiac arrhythmias in Drosophila that mimic the effects of aging. Proc Natl Acad Sci U S A. 104, 3943-3948 (2007).
- Broadie, K. S., Bate, M.
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Перепечатки и разрешения
