Хоботок ответ продление или PER является анализ вкус поведения, которые были использованы в мух, а также в пчел. Когда хоботок вступает в контакт с привлекательной вещество, летают расширяет свою хоботок потреблять вещества. Решения различных сахаров очень привлекательны для летать.
Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.
Методическая статья
Хоботок Расширение отклика (PER) Пробирной у дрозофилы
В этой статье
Краткое содержание
Аннотация
Хоботок расширение ответа (PER) является анализ вкус поведения, которые были использованы в мух, а также в пчел.
На поверхности рта мухи (labellum), Есть похожие на волосы структуры, называемые сенсиллы в котором находится вкус нейронов. Когда привлекательным вещество вступает в контакт с labellum, летать расширяет свою хоботок потреблять материала. Хоботок Расширение отклика (PER) анализ мер этот ответ вкус поведения, и это полезный метод, чтобы узнать о пищевых предпочтениях в одной летать. Решения различных сахаров, таких как сахароза, глюкоза и фруктоза, очень привлекательны для летать. Влияние веществ отвращение можно также проверить, как снижение PER при смешивании в сладкий раствор.
Несмотря на простоту основной процедуры, Есть много вещей, которые могут помешать ему работать. Одним из факторов, который требует внимания управляемое состояние мухи. Требуемое время голода принести лететь в надлежащее управляемое состояние существенно меняется от 36 до 72 часов. Мы создали серию контроля для оценки состояния мухи и скрининга, который позволяет из не отвечающих или гипер проблематику отдельных животных. Другим важным фактором является уровень влияния и положения контакта с labellum, который будет трудно описать словами. Это видео презентация демонстрирует все это вместе с рядом других усовершенствований, которые повысили бы воспроизводимость этого метода.
Протокол
Голодание
- Во-первых, голодать летать.
- Положите небольшой кусочек Ким-протрите пропитанной водой в пустой флакон.
- Передача 20-30 сытых летит в пустой флакон.
- Проверка каждые 12 -24 часов, чтобы убедиться, бумага влажная.
- Голодать лететь 36-72 часов.
Fix летать
- Возьмите одну летать в аспиратор.
- Место 200 мкл желтый опрокинуться открытия. Одновременно листать и дует на нее, вы можете сжать взлететь в желтый наконечник.
- Осторожно применять некоторые воздуха подтолкнуть летать до точки, где она не может двигаться.
- С помощью бритвы, необходимо поставить галочку примерно в глаза, а мухи, то сосать лететь обратно и отрезал кончик.
- Аккуратно удар лететь обратно в положение, но только до достижения самого конца, сделать уклон сократить на позиции, где хоботком будет расположен. Вы можете обойтись без этой наклонной порез, но это, несомненно, делает следующий процесс проще.
Подготовка сахарозы фитилей
- Твист 6 мм шириной полосы Kimwipes ® бумаги в потоке, и растащить на мелкие куски в шишках формы фитиль (<1 см).
- Эти маленькие фитили, погрузились в сахарозу растворов или воды и представлены хоботок, делая контакт.
Подготовка управления и экспериментальных животных
- Перед тестированием любая tastants, дают 4% раствором сахарозы в лету. Это действует как положительный контроль. Не использовать летать, что не ответил.
- Затем тест дН 2 0 на лету. Этот акт в качестве отрицательного контроля. Отменить лету, если он отвечает.
- Испытание этих элементов управления после тестирования вашей tastants.
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Обсуждение
В этой презентации, мы прошли через все шаги для хоботок анализа ответа расширение. Метод кажется довольно простым, но как и во многих других анализов поведения, многие малые вещи могут предотвратить анализа от работы. Мы прошли через много таких шагов, которые требуют тщательного внимания. Здесь я еще раз подчеркнуть некоторые из наиболее важных факторов.
Одним из таких факторов является форма фитиль. Я показал некоторые очень хорошие примеры, но, конечно, на самом деле все было бы непрерывный спектр между очень хорошим и очень пло...
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Благодарности
Мы благодарим Пола Грэма для обслуживания, как камера человек в видео-презентацию.
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Материалы
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии | |
|---|---|---|---|---|
| HDR-HC1 | Камера | Sony Corporation | ||
| SMZ800 | Микроскоп | Nikon Instruments | ||
| P-IBSS | Адаптер для камеры | Nikon Instruments | ||
| 1x DC10LN | Адаптер для камеры | Optem, Qioptiq Inc. | ||
| 257010 | Адаптер для камеры | Optem, Qioptiq Inc. | ||
| TREKKER Mk2 | Штатив | BENBO | ||
| Gorillapod SLR | Штатив | Joby | ||
| iMac G5 | Компьютер | Apple | ||
| Power Mac G5 | Компьютер | Apple | ||
| iMovie | Программное обеспечение | Apple | ||
| MPEG Streamclip | Программное обеспечение | SQUARED 5 |
Ссылки
- Dethier, V. G. The Hungry Fly. , Harvard University Press. Cambridge. (1976).
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Перепечатки и разрешения
Теги
