Электрофизиология цельноклеточного зажима: метод изучения электрических свойств нейронов

Аннотация

Источник: Рой, Б., и др. Patch Clamp Recordings из эмбриональных клеток данио-рерио Маутнера. J. Vis. Exp. (2013).

Этот протокол описывает технику, называемую электрофизиологией зажима целых клеток, которая представляет собой метод изучения электрических свойств нейронов Маутнера и других ретикулоспинальных клеток в эмбрионах рыбок данио.

Протокол

1. Запись с помощью патч-клетка (режим всей ячейки)

1. Все записи выполняются в режиме clamp whole cell patch. Записывающие камеры размещаются на предметном столике микроскопа в электрофизиологической установке. Наши столики закреплены, а вертикальный микроскоп с накладным зажимом прикреплен болтами к подвижной платформе микроскопа или транслятору микроскопа.
2. Патч-клемовые пипетки натягиваются на горизонтальный съемник (-97; Саттер Инструментс Ко.) из тонкостенного, боросиликатного стекла, полученного из WPI. Диаметр наконечника пипетки составляет порядка 0,2-0,4 мкм после огневой полировки до гладкого края, а длина конуса хвостовик....

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье

Имя	Компания	Каталожный номер	Комментарии
Съемник пипеток	Саттер Инструментс Ко	-97
Вертикальный патч-зажимной микроскоп	Leica Microsystems	DMLFSA
усилитель	Молекулярные приборы	200В
микроманипулятор	Siskiyou Inc.	МХ7500