Ортотопическая инъекция: имплантация тканеспецифических раковых клеток взрослой мыши

Аннотация

Источник: Katsuta, E., et al. создание мышиной ортотопической модели метастатического рака молочной железы и выполнение мышиной радикальной мастэктомии.J. Vis. Exp.(2018).

Видео демонстрирует технику ортотопической инокуляции рака молочной железы на мышиной модели. Этот метод обеспечивает высокую скорость онкогенеза с меньшей вариабельностью размера и формы опухоли по сравнению с подкожной или нехирургической инъекцией.

Протокол

1. Подготовка клеток (для 10 мышей)

ПРИМЕЧАНИЕ: Клетки должны быть инокулированы в течение 1 часа после отделения от чашки, чтобы избежать снижения жизнеспособности клеток. В частности, клеточную суспензию следует смешивать со смесью студенистого белка в течение 15 мин после отделения клеток от чашки для поддержания их жизнеспособности.

1. Культивирование клеток 4T1-luc2, клеточной линии аденокарциномы молочной железы мыши, экспрессирующей люциферазу, в среде RPMI 1640 с 10% FBS в увлажненном инкубаторе при 37 °C и 5%_CO2.
2. Промойте адгезивные клетки 4T1-luc2 в 10-см посуде с фосфатно-соевым буф....

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье

Имя	Компания	Каталожный номер	Комментарии
Ножницы для микродиссекции	Робоз	РС-5983	Для инокуляции раковых клеток и мастэктомии
5-0 шелковые шовные материалы	смотреть	774B F
Мемориальный институт Розуэлл-Парка 1640	Gibco	11875093	Для культивирования клеток
Фетальная бычья сыворотка	Gibco	10437028	Для культивирования клеток
Трипсин-ЭДТА (0,25%)	Gibco	25200056	Для культивирования клеток
Сухой стерилизатор (Germinator 500)	Брейнтри Сайентиал	ГЕР 5287-120В	Для инокуляции раковых клеток и мастэктомии
Иглодержатель	Робоз	РС-7830	Для инокуляции раковых клеток и мастэктомии
Щипцы Адсона	Робоз	РС-5233	Для инокуляции раковых клеток и мастэктомии
клипер	Валь	9908-717	Для инокуляции раковых клеток и мастэктомии
Матригель	Корнинг	354234	Для иннокуляции раковых клеток