Радикальная мастэктомия: хирургическое удаление всей молочной железы у мыши для изучения прогрессирования рака

Аннотация

Источник: Katsuta, E., et al. Создание мышиной ортотопической модели метастатического рака молочной железы и выполнение мышиной радикальной мастэктомии. J. Vis. Exp (2018).

Это видео описывает технику радикальной мастэктомии, которая используется для хирургического удаления всей молочной железы у мыши для изучения прогрессирования рака.

Протокол

1. Мастэктомия

ПРИМЕЧАНИЕ: Время проведения мастэктомии очень важно. Если это сделать слишком рано, метастазирование в легкие не происходит. Если это сделать слишком поздно, первичная опухоль проникла в крупные кровеносные сосуды, что затрудняет полную онкологическую резекцию. Таким образом, для мастэктомии было проверено несколько временных точек, чтобы определить, какая временная точка обеспечивает соответствующий баланс в ожидании метастазирования, прежде чем резекция станет слишком сложной. После проведения таких экспериментов на более чем 50 мышах было продемонстрировано, что мастэктомия через 8 дней после инокуляции раковых клеток (или когда размер опухоли достигает 5 мм) является идеальной временной точкой для достижения этого баланса.

1. Обезболивайте мышь 2-4% изофлураном и 0,2 л/мин потоком кислорода до тех пор, пока мыши не начнут спокойно дышать (2-3 мин) и подкожно вводите ей в плечо 0,05 мг/кг бупренорфина.
2. Зафиксируйте конечности мыши с помощью лабораторной ленты и простерилизуйте ее кожу с помощью хлоргексидина, йода и 75% этанола с помощью ватных палочек.
3. С помощью ножниц для микродиссекции сделайте разрез кожи толщиной 5 мм в 2 мм левее от хирургического рубца, который был сделан при первичной инокуляции раковых клеток. Распространите разрез по направлению к корню передней конечности, чтобы удалить опухоль, кожу, включая операционный рубец, и поражение, контактирующее с опухолью, а также бассейн подмышечных лимфатических узлов, в котором большую часть времени не существует видимых лимфатических узлов во время мастэктомии. Следите за тем, чтобы не повредить подмышечную вену.
4. Закройте дефекты кожи швами, используя стерильные 5-0 нерассасывающиеся нити в форме буквы «Y».
5. Верните мышь в чистую клетку и следите за ней до тех пор, пока она не придет в себя и не начнет свободно двигаться (через ~1–2 мин). Если животное не выглядит здоровым в течение 24 ч после операции, введите бупренорфин (0,2 мг/кг).
6. Снять швы под наркозом (с 2-4% изофлураном и 0,2 л/мин потока кислорода) через 7 дней после операции.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье

Имя	Компания	Каталожный номер	Комментарии
Ножницы для микродиссекции	Робоз	РС-5983	Для инокуляции раковых клеток и мастэктомии
Щипцы Адсона	Робоз	РС-5233	Для инокуляции раковых клеток и мастэктомии
Иглодержатель	Робоз	РС-7830	Для инокуляции раковых клеток и мастэктомии
5-0 шелковые шовные материалы	смотреть	774В	Для инокуляции раковых клеток и мастэктомии
Сухой стерилизатор (Germinator 500)	Брейнтри Сайентиал	ГЕР 5287-120В	Для инокуляции раковых клеток и мастэктомии
клипер	Валь	9908-717	Для инокуляции раковых клеток и мастэктомии