$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
1. Предоперационная подготовка
- Запишите массу тела каждого кролика. Как и во всех доклинических исследованиях, регулярно контролируйте вес животных для оценки потенциальной токсичности.
- Перед обезболиванием кролика заполните коническую пробирку объемом 50 мл коммерчески доступным гелем для ультразвука и вращайте при давлении 500 x g в течение 30 с; после завершения центрифугирования в геле не должно быть видимых пузырьков.
- Вводят гликопирролат подкожно в дозе 0,1 мг/кг и ацепромазин внутримышечно в дозе 0,75 мг/кг. Подождите 15-20 минут, пока успокоительное не подействует, контролируя жизненно важные показатели и поведение><.
заметка: Гликопирролат является антихолинергическим средством, предотвращающим брадикардию и уменьшающим секрецию дыхательных путей и желудочно-кишечного тракта. Ацепромазин – седативное средство, которое служит премедикацией для анестезии.
- Введите 35 мг/кг кетамина и 5 мг/кг ксилазина подкожно в качестве анестетика. Однако, по мере того как оператор становится более опытным и может осуществлять внутрипротоковую доставку быстрее, уменьшите дозы препарата до 15 мг/кг кетамина и 3 мг/кг ксилазина подкожно; Это сократит время введения анестезии и время, необходимое для восстановления животного после анестезии.
- Проверяйте и документируйте частоту сердечных сокращений, SPO2, температуру, частоту дыхания и цвет слизистой оболочки каждые 15 минут. Нанесите глазную смазку на оба глаза><.
заметка: Только персонал, прошедший соответствующее обучение и одобренный IACUC своего учреждения, должен проводить анестезию или контролировать ее. Использование ветеринарного монитора для анестезии может помочь в приобретении жизненно важных показателей и рекомендуется. Ветеринарный монитор для анестезии, однако, не заменяет необходимости вручную проверять животное каждые 15 минут. Смотрите инструкцию производителя по правильному использованию ветеринарного монитора.
- Проверьте начало анестезии, слегка ущипнув палец ноги; кролик должен не реагировать на происходящее, прежде чем продолжить.
- Тщательно выбрейте хвостовую полость брюшка кролика в области вокруг третьей и четвертой пар паховых сосков.
- Когда большая часть волос удалена, нанесите на выбритую область безрецептурный крем для удаления волос. Удалите крем через 10 минут после нанесения с помощью влажных бумажных полотенец, смоченных теплой водой.<бр/>
заметка: Кроличья кожа очень хрупкая/чувствительная. Крем для удаления волос следует использовать не более 10 минут. На самом деле, безопаснее попробовать «тестовое место» через 5 минут и оставить его на более длительный срок только в том случае, если тестовое место указывает на необходимость более длительного периода времени.
- Протрите эту область марлевыми салфетками, смоченными в спирте, чтобы очистить место инъекции.
- Поместите кролика на спину в V-образное корыто, выстланное рециркуляционным одеялом из теплой воды и абсорбирующей прокладкой.
2. Приготовление контрастного вещества
- Восстановите нецелевой контрастный реактив в соответствии с инструкциями производителя. Осторожно вяжите пипеткой вверх и вниз, чтобы перемешать.
заметка: Контрастное вещество, используемое в этом протоколе, стабильно при комнатной температуре в течение 4-6 часов после восстановления. Осторожно покачивайте флакон между каждым извлечением.
ПРИМЕЧАНИЕ: Требуемый объем раствора будет зависеть от количества вводимых протоков. Кролик имеет 4 протоковых отверстия на сосок, и 0,2 мл раствора достаточно, чтобы заполнить одно протоковое дерево взрослого новозеландского белого кролика (Oryctolaguscuniculus). Таким образом, в одну молочную железу может быть доставлено в общей сложности 0,8 мл.
3. Внутрипротоковая доставка
- Найдите подходящие соски для инъекции; рекомендуется использовать3-ю и4-ю пары паховых сосков, так как они легко визуализируются, когда животное находится на спине.
- Загрузите 0,2 мл стерильного 0,9% физиологического раствора в туберкулиновый шприц с люэровским замком объемом 1 мл иглой 22 G. Правильно утилизируйте иглу 22 G, как только физиологический раствор окажется в шприце, и замените ее стерильной иглой 25-го калибра. Аккуратно протрите участок 85% изопропиловым спиртом на марлевой салфетке.
- Со скосом иглы вверх и шприцем, параллельным телу животного, введите скос иглы в сторону соска и медленно введите 0,1-0,2 мл физиологического раствора; это позволит лучше визуализировать отверстия протоков.
- Загрузите 0,2 мл раствора для инъекций в туберкулиновый шприц с люэровским замком объемом 1 мл.
- Осторожно держите сосок большим и указательным пальцами и слегка приподнимите его, чтобы расположить для внутрипротоковой инъекции; носимая глазная лупа может помочь в визуализации протоковых отверстий.
- Сохраняя приподнятое положение соска, осторожно канюлируйте интересующий проток с помощью иглы с тупым концом 25 G.
- После канюляции осторожно поверните шприц Luer-lock на ступице инфузионной иглы с тупым концом до упора.
- Поднимите соску и медленно вводите раствор, чтобы свести к минимуму потенциальное повреждение, вызванное быстро движущейся жидкостью внутри канала; ни в коем случае не следует оказывать сопротивление при введении раствора.