Method Article

Оценка Иммунологически Соответствующие Динамическая третичный Структурные особенности ВИЧ-1 петли V3 Последовательность R2 короны на Неэмпирических Складные

DOI:

10.3791/2118

September 15th, 2010

In This Article

Summary

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Корона области различных петли V3 последовательности гликопротеина поверхности оболочки (gp120) ВИЧ-1 может быть структурно характеризуется во многих случаях в кремнии складывания позиции 10 по 22 цикле, используя состоянии современных Неэмпирических Складной алгоритма. Здесь мы показываем, складные и оценки этой области петли V3 от R2 штамма ВИЧ-1, однозначно нейтрализации чувствительного штамма с загадочным функциональными свойствами.

Abstract

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Антигенного разнообразия ВИЧ-1 уже давно препятствием для вакцины дизайн, и эта изменчивость особенно проявляется в цикле V3 поверхностных гликопротеинов конверт вируса. Ранее мы предложили корону петля V3, хотя динамичной и последовательность переменной, ограничивается для всего населения ВИЧ-1, вирусов на иммунологически соответствующих β-шпильки третичной структуры. Важно отметить, что Существуют тысячи различных последовательностей петля V3 корону в циркулирующих ВИЧ-1, вирусов, что делает 3D-структурные характеристики тенденции в разнообразие вирусов трудно или невозможно по кристаллографии или ЯМР. Наши предыдущие успешные исследования с переносом V3 корона 1, 2, используемый алгоритм неэмпирических 3 доступны в ICM-Pro молекулярной пакет программного обеспечения для моделирования (Molsoft LLC, Ла-Хойя, Калифорния) и предложил корону петли V3, в частности, от должности от 10 до 22, льгот достаточно от гибкости и длина его стеблей фланговые вести себя в значительной степени, как если бы это было неограниченным пептид свободно складывающиеся в растворе. Таким образом, быстрое неэмпирического складывания только эта часть петли V3 любого человека штамм 60000 + циркулирующих ВИЧ-1 штаммы могут быть информативными. Здесь мы сложенном петли V3 R2 напрягаться, чтобы вникнуть в структурную основу его уникальные свойства. R2 медведи редкими последовательность петля V3 считается ответственным за изысканной чувствительности этого штамма к нейтрализации сывороток пациентов и моноклональных антител, 4, 5. Напряжение посредником CD4-независимых инфекции и, похоже, вызывают широко нейтрализующих антител. Мы показываем, как оценка результатов складывания может быть информативным для связывания наблюдаемые структуры в складной с иммунологическими деятельности наблюдается R2.

Protocol

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. Методология

  1. Первый шаг протокола, чтобы выбрать V3 последовательность корону вы желаете сдаться в кремнии. Для R2 напряжения, последовательность для этого фрагмента KSIPMGPGRAFYT.
  2. 3D атомной структуры пептид, соответствующий этой последовательности должен быть построен в виртуальное пространство компьютера. Команда ICM для этого:
    buildpep "KSIPMGPGRAFYT"
    или Файл: Новое: пептид может быть выбран под выпадающим меню
  3. Несколько параметров процедуры, затем установить, в том числе количество поисковых шагов (длина поиска), моделирование температуры, стратегию поиска параметров, включая переменную ограничений для смещения в напра....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

НЕЭМПИРИЧЕСКОЕ складной показывает третичного структурные свойства, последствия которых не может быть видно из изучения отдельных аминокислот последовательно. Несколько ранее неясных структурные свойства R2 петли V3 корону выявлены путем складывания моделирования. Эти наблюдаются структурные предпочтения могут коррелировать с наблюдаемыми функциональные свойства R2 напряжения, а именно чувствительность к нейтрализации и hyperinfectivity 5.

Во-первых, ясно β-цепи тенденция.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
Нет конфликта интересов объявлены.

Acknowledgements

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Работа выполнена при поддержке грантов от Фонда Билла и Мелинды Гейтс (# 38631) и NIH, в том числе DP2 OD004631 и R01 AI084119.

....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
ООО «ИКМ-Про Молсофт»

References

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Almond, D., Kimura, T., Kong, X., Zolla-Pazner, S. &, Cardozo, T. Dynamic characterization of the V3 loop crown. Antiviral Therapy. 12, 13-31 (2007).
  2. Almond, D., Kimura, T., Kong, X., Swetnam, J., Zolla-Pazner, S., Cardozo, T. Structural conservation....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

HIV 1 V3 LoopAb Initio FoldingICM Pro SoftwareBeta Hairpin StructureNeutralization SensitivityMolecular DynamicsPeptide FoldingStructural AnalysisR2 StrainImmunological Relevance

Related Articles