Контрастность расширенной визуализации небольших судна животного microCT является быстрое, экономически эффективное и высокой пропускной способностью техники для серийного На месте Экзамен для развития опухоли, для анализа сети кровеносных сосудов, которые питают их, и для следующего ответа опухоли в доклинической терапевтического вмешательства (ы).
Методическая статья
Контрастность Enhanced Imaging судна использованием MicroCT
1Greehey Children's Cancer Research Institute, University of Texas Health Science Center at San Antonio , 2Small Animal Imaging Resources facility, University of Texas Health Science Center at San Antonio , 3Department of Cellular and Structural Biology, University of Texas Health Science Center at San Antonio , 4Department of Pediatrics, University of Texas Health Science Center at San Antonio
Открывается в новой вкладке
В этой статье
Краткое содержание
Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Аннотация
Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Микроскопические компьютерной томографии (microCT) предлагает высокое разрешение объемной визуализации анатомии жизни мелких животных. Однако контраст между различными мягких тканях и жидкостях организма изначально бедные в микро-КТ изображений 1. В этих условиях, визуализация кровеносных сосудов становится почти невыполнимой задачей. Чтобы преодолеть это, и для улучшения визуализации сосудов экзогенных контрастных средств могут быть использованы. Здесь мы представляем методологии для визуализации сосудистой сети в грызунах. С помощью длительного действия водного коллоидного полидисперсных йодированной кровью бассейн контрастное вещество, Exia 160XL, мы оптимизировали получения изображений параметров и объема оказания методы поиска кровеносных сосудов в живых животных. Наши результаты показывают, что для достижения великолепный контраст между костей и мягких тканей с судна, несколько-кадров (по крайней мере 5-8 / фреймов за просмотр) и 360-720 представлений (360 ° вращение) приобретения были обязательными. Мы также продемонстрировали использование двумерных передаточной функции (где воксела цвет и прозрачность была назначена пропорционально КТ значение и градиент величины), в визуализации анатомии и выделение структуры интересов, сеть кровеносных сосудов. Это перспективная работа закладывает основу для качественной и количественной оценки анти-ангиогенеза доклинических исследований с использованием трансгенных или ксенотрансплантата опухоли мышей.
Протокол
Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
1. Животное Инъекции
До внутривенной инъекции вены хвоста, хвост кожа должна быть очищена с изопропилового спирта скрабы для стерилизации целей. Мыши должны затем быть введен с 0,2 mL/20 г 20 мг йода / мл йодированного контрастного вещества bloodpool (Exia 160XL; Binito Биомедицинская, Inc Оттаве, Онтарио, Канада) при помощи дистального хвостовую вену с использованием низких мертвое пространство ½ U CC -100 28G ½ инсулиновые шприцы (продукт # 329461, Becton Dickinson и компании, штат Нью-Джерси, США).
2. Подготовка животных
Через 10 минут раствор для инъекций, животные должны быть готовы к microCT изображений. Во-первых, животное должно быть под наркозом в коробке с использованием 2% изофлуран в 100% кислород со скоростью 2,5 литра в минуту. Мазь глазная смазочных должны применяться для предотвращения высыхания роговицы во время анестезии. Температура тела должна поддерживаться на уровне 37 ° С тепла колодки.
3. MicroCT изображений
Мыши, то должны быть отсканированы на microCT единица, способная выступать с концертами сканирует животное. Чтобы свести к минимуму артефакты движения и стабильности, мыши могут быть помещены в коммерчески доступных мульти-модальности камеры (Numira Biosciences, Солт-Лейк-Сити, Юта) с предоставлением для воздуха и выхлопных газов. Для того чтобы избежать гипотермии эпизод на животное в течение microCT сканирования, гель колодки (Hot холодной Брейс терапия, CVS Фармация Вунсокет, Род-Айленд), Toe теплые (Heat Factory, Виста, Калифорния) или Thermipaq колодки Клей (термионика, Спрингфилд, штат Иллинойс) может быть используется. Поместите эти грелки под кровать пены для поддержания мыши при 37 ° С, избегая прямого контакта с животным. Vital признаки животных, таких как температура тела, дыхания и частоты сердечных сокращений должна контролироваться с помощью малого Мониторинг животных и литниковых систем, таких как С. А. Инструменты (Стони-Брук, штат Нью-Йорк).
Следующий протокол визуализации может быть использована в качестве ориентира для определения соответствующих параметров сканирования для любого microCT единиц. Животных, используемых в этом эксперименте были отсканированы при 93 мкм резолюции по объемной КТ сканер GE исследовать Locus (GE Healthcare, Лондон, Онтарио). Этот объемный сканер использует 3500 x 1750 CCD детектор для Фельдкамп конусе лучей реконструкции. Платформа независимых параметров времени тока, напряжения и воздействия оставалось постоянным на уровне 450 мкА, 80 КВП и 100 мс соответственно. Стандартные параметры выдержки, число кадров в просмотр и ряд мнений может быть разнообразна и может быть 100 мс, 5-8 и 360-720, соответственно, общее время сканирования примерно 20 минут. Изображения были реконструированы с запатентованным программным обеспечением EVSBeam производителя.
4. Изображение Оказание
Восстановленные данные microCT могут быть использованы для продвинутых изоповерхности, одномерные или двумерные передаточной функции рендеринга изображений с помощью программного обеспечения Seg3D обработки изображений (Seg3D, http://www.sci.utah.edu/cibc/software ).
5. Представитель Результаты
Пожалуйста, см. прилагаемую фигуру дикого типа мышь отсканированы с eXIA160XL с настройками, упомянутых в разделе методов.
Рисунок 1. Двумерные передаточной функцией (2DTF) оказание образ дикого типа создаются с помощью мыши Seg3D программное обеспечение для обработки изображений (Seg3D, http://www.sci.utah.edu/cibc/software ). Животных вводили eXIA160XL и через 10 минут microCT отсканированы при 93 мкм изометрической разрешения с настройками, упомянутых в разделе методов.
Видео 1. Двумерные передаточной функцией (2DTF) оказание основан 360 ° вращение фильм дикого типа создаются с помощью мыши Imagevis3D программное обеспечение для обработки изображений (Imagevis3D, http://www.sci.utah.edu/cibc/software). Животных вводили eXIA160XL и через 10 минут microCT отсканированы при 93 мкм изометрической разрешения с настройками, упомянутых в разделе методов.
Нажмите здесь, чтобы посмотреть видео
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Обсуждение
Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Цель всего этого метода контраста Enhanced Imaging судна использованием microCT является обеспечение оптимального метода для получения высокой наборов данных для анализа качества сосудистой сети в живых мышей. Для microCT изображений, лучшее отношение сигнал-шум мягких тканей достигается за счет больше время сканирования с увеличением числа просмотров и количество кадров за просмотр 2.
Судно идентификации в решающей степени зависит от точности идентификации мягких тканей и диффере...
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Раскрытие информации
Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Все животные процедуры были проведены в соответствии с Руководством по уходу и использованию лабораторных животных и были одобрены Институциональные уходу и использованию животных комитета (IACUC) при Техасском университете здоровья Научного центра в Сан-Антонио.
Благодарности
Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Эта работа была выполнена при частичной поддержке NCI награду 5R01CA133229-03.
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Материалы
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| eXIA 160XL | Binito Biomedical, Inc. | ЭКСИА160XL-01 |
Ссылки
Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
- Holdsworth, D. W., Thornton, M. M. Micro-CT in small animal and specimen imaging. Trends in Biotechnology. 20, 417-424 (2002).
- Kindlmann, G. L., Weinstein, D. M., Jones, G. M., Johnson, C. R., Capecchi, M. R., Keller, C. Practical Vessel Imaging by Computed Tomography in Live Transgenic Mouse Models for Human Tumors. Molecular Imaging. 4, 417-424 (2005).
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Перепечатки и разрешения
Запросить разрешение на повторное использование текста или иллюстраций этой статьи JoVE
Запросить разрешение