Мышечная пластика как хирургическая стратегия восстановления притока крови к мозгу мыши после инсульта

Аннотация

Источник: Paro, M. R., et.al. Модель лечения энцефаломиосинангиоза после инсульта, вызванного окклюзией средней мозговой артерии у мышей. J. Vis. Exp. (2022).

В этом видео показана хирургическая процедура по пересадке васкуляризированной мышцы на поверхность мозга после транзиторной окклюзии средней мозговой артерии. Трансплантат способствует образованию новых кровеносных сосудов в ишемизированной области, усиливая снабжение кислородом и питательными веществами. Со временем интегрированная мышца поддерживает выживание нейронов и помогает в восстановлении после инсульта.

Протокол

Все процедуры с использованием животных моделей были рассмотрены местным комитетом по уходу за животными и ветеринарным наблюдательным советом JoVE.

1. Encephalomyosynangiosis (EMS) surgery
   1. После 60 минут окклюзии средней мозговой артерии (MCAo) рандомизируйте мышей в группы только MCAo или MCAo + EMS. Выполните EMS через 4 часа после MCAo (MCAo + группа EMS) или фиктивной операции для отдельных экспериментов (группа EMS). Переоденьтесь в новую пару стерильных хирургических перчаток перед операцией.
      ПРИМЕЧАНИЕ: Мыши восстановились после анестезии после 60 минут MCAo и были повторно обезболены перед операцией EMS.
   2. Для групп, получающих EMS (MCAo + EMS или группы только EMS), сделайте ножницами разрез кожи 10-15 мм, простирающийся от 1-2 мм рострально до правого уха до 1-2 мм каудально до правого глаза.
      ПРИМЕЧАНИЕ: Стерильные ножницы использовались для предотвращения случайного повреждения височных мышц под ними.
   3. Втяните кожные лоскуты с помощью зажимов и визуально определите височную мышцу и череп.
   4. Тупо рассеките височную мышцу в сторону от черепа с помощью ножниц с техникой растопыривания. Выполните миотомию 2-3 мм, направленную вентрально вдоль каудальной границы мышцы для облегчения вентрального отражения.
   5. Выполните трепанацию черепа диаметром ~5 мм в черепе под отраженной височной мышцей с помощью микросверла.
   6. Удалите твердую мозговую оболочку пинцетом, чтобы обнажить пиальную поверхность мозга. Соблюдайте особую осторожность, чтобы избежать случайной травмы головного мозга.
   7. Зашить дорсальную границу височной мышцы к подкожной клетчатке тыльного кожного лоскута 6-0 моноакриловыми нитями, заставляя ее смываться с обнаженной корой головного мозга.
   8. Закройте разрез кожи швом из мононити 6-0. Поместите мышь обратно в клетку и наблюдайте за ней до тех пор, пока она не оправится от анестезии. Верните мышь в помещение для ее содержания.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье

Имя	Компания	Каталожный номер	Комментарии
6-0 моноакриловый шовный материал	Ethilon	697G
70% этанол для дезинфекции рабочей поверхности	Walgreen
Bupivacaine 0,25% раствор	Midwest Vet
Зажимы для ретракции тканей	Roboz
Doccal шовный материал с нейлоновым покрытием	Doccal corporation Sharon MA	602145PK10Re
Электрическая грелка для операционной поверхности
Изофлуран анестезия	Piramal Critical Care Inc
Аппарат для доставки изофлурана	-- B6Surgivet (Isotech 4)
Микродрель	Гарвардский аппарат
Микродиссекционный пинцет, изогнутый x2	Piramal Critical Care Inc
Мышиный ангиогенез панель arrat	R&D biotech	ARY015
Игловодителя	Ethilon
Operating микроскоп	Olympus
Операционная поверхность	Olympus
Хирургические ножницы	Roboz