Введение терапевтического агента в мозг бодрствующего грызуна с помощью микроинъекций

Аннотация

Источник: Poland, R. et al. Микроинъекция мозга грызунов для изучения молекулярных субстратов мотивированного поведения. J. Vis. Exp. (2015)

В этом видео для точной доставки лекарств используется наполненная водой установка для микроинъекций, состоящая из шприца и трубки микроинжектора. Крысе с предварительно имплантированной направляющей канюлей проводят целенаправленную микроинъекцию в мозг, что позволяет точно вводить терапевтические агенты бодрствующим животным с минимальным повреждением тканей.

Протокол

Все процедуры, связанные с животными моделями, были рассмотрены местным институциональным комитетом по уходу за животными и ветеринарным советом JoVE.

1. Подготовка шприца для микроинъекций и микроинъектора к инъекции:
   1. Зафиксируйте каждый газонепроницаемый шприц для микроинъекций в стойке насоса для микроинъекций.
   2. Поместите кончик газонепроницаемого шприца в стерильную воду, содержащуюся в небольшой лодке для взвешивания, и осторожно взмахните поршнем, чтобы смазать внутреннюю проволоку. Равномерно потяните поршень до упора на насосе, чтобы наполнить его водой.
   3. Наденьте трубку PE20, подключенную к микроинъектору, на иглу 26 G....

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье

Имя	Компания	Каталожный номер	Комментарии
Канюля-трубка	Amazon Supply/ мелкие детали	HTXX-26T-60	26 калибра, гипотрубка S/S 316-TW 26GA
обтюратор	Amazon Supply/ мелкие детали	GWXX-0080-30-05	33 калибра, провод S/S 316LVM 0.008 IN
Провод микроинъектора	MicroGroup	33RW 304	33 калибр
Super Glue	Loctite	3924AC	Жидкость, не гель, можно автоклавный
микроинъектор Пластиковая трубка	Becton Dickson	427406	PE20
Средний вес Гемостатики	World Precision Instruments	501241-G
Линейка	Fisher	09-016	150 мм
Щипцы	Toelting	52100-77	Dumont, Dumostar
Ротационный инструмент	Dremmel	285	Двухскоростной
отрезной диск	McMaster Carr	3602	15/16" x 0.025"
Микроинъекционный насос	Harvard Apparatus	PhD 2000
мкл стеклянный шприц	Hamilton	7001KH	Тип иглы: 25s/2.75"/3
Аппликатор	с хлопковым наконечникомFisher	23-400-101
Lab Wipes	Kimwipes	34133
Operant Software	Coulbourn	Graphic State
Operant Chambers	Coulborun	habitest

1