Внутривенное введение терапевтических наночастиц на модели мышиной глиобластомы

Аннотация

Источник: Kim, B. D., et al. Доставка олигонуклеотидной полезной нагрузки наночастицами в животной модели мультиформной глиобластомы. J. Vis. Exp. (2024)

В этом видео демонстрируется внутривенное введение терапевтических наночастиц мыши-носителю с глиобластомой. Метод обеспечивает адресную доставку через гематоэнцефалический барьер и поддерживает неинвазивную визуализацию для оценки биораспределения наночастиц и терапевтической эффективности при опухолях головного мозга.

Протокол

Все процедуры, связанные с животными моделями, были рассмотрены местным институциональным комитетом по уходу за животными и ветеринарным советом JoVE.

1. Введение MN-anti-miR10b

ПРИМЕЧАНИЕ: В этом исследовании инъекции делались один раз в неделю в течение 6 недель, начиная с 7 дней после имплантации, но один и тот же протокол может быть использован для различных частот инъекций.

1. Взвесьте мышь и рассчитайте объем MN (магнитных наночастиц)-анти-miR10b для введения мыши. Дозы MN-anti-miR10b назначаются в концентрации 20 мг Fe (железа)/кг на мышиных моделях GBM (мультиформная глиобластома). Например, мышь массой 20 г получает дозу 80 мкл 5 мг Fe/мл MN-anti-miR10b. Контрольные мыши получают равный объем PBS (фосфатно-солевой буфер), соответствующий этой схеме дозирования.
2. Приготовьте шприц 28G с дозой MN-anti-miR10b и убедитесь, что в растворе для инъекций нет пузырьков.
3. Обезболивайте мышь в дозе 2%-4% изофлурана для индукции и 1,5%-2% для поддержания со скоростью потока 1,5 л/мин в индукционной коробке. Переместите мышь к носовому конусу и продолжайте вводить анестезию. Проверьте глубину анестезии и нанесите ветеринарную мазь.
4. Простерилизуйте хвост салфеткой с 70% изопропанолом и дайте лишнему спирту высохнуть.
5. Поверните хвост, чтобы расположить боковые хвостовые вены в верхней части хвоста. Затем, нацелившись на вену, введите иглу в хвост и установите вакуум, оттянув поршень назад.
6. Вводите иглу до тех пор, пока кровь не поступит в шприц, что свидетельствует об успешном поступлении в вену.
7. Медленно введите MN-anti-miR10b и втяните иглу после полного введения. Надавите на место инъекции марлей до тех пор, пока кровотечение не остановится.
8. Снимите мышь с носового конуса. Наблюдайте за мышью до полного выздоровления и амбулаторного состояния.
   ПРИМЕЧАНИЕ: Болюсное введение наночастиц может вызвать респираторный дистресс. Внимательно следите за мышью и немедленно накладывайте легкие компрессии в грудную клетку, если есть признаки респираторного дистресса.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье

Имя	Компания	Каталожный номер	Комментарии
Athymic nude "J:NU" мыши	Laboratory	RRID:IMSR_JAX:007850	Модель мыши с ослабленным иммунитетом
70% изопропоиловая спиртовая салфетка	Cardinal	MW-APL	Местная антисептическая салфетка для имплантации опухоли и инъекции в хвостовую вену
Изофлуран	Covetrus	11695067772	Анестезия
Исофруран Вапорайзер	SOMNI Scientific	VS6002	Аппарат для анестезии
Инсулиновый шприц 1CC 29G X 1/2"	Becton, Dickinson	324704	Шприц для инъекции D-люциферина и инъекции наночастиц в хвостовую вену

Jackson