$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Все процедуры, связанные с животными, были проверены местным институциональным комитетом по уходу за животными и ветеринарным наблюдательным советом JoVE.
1. Анализ посадочного места
- Настройка взлетно-посадочной полосы (Рисунок 1A)
- Разрежьте лист белой бумаги (29,7 см x 42 см x 0,09 мм) в продольном направлении на три отрезка одинаковой ширины. Положите на стол лист белой бумаги (9,9 см х 42 см).
- Положите темную коробку ворот на дистальный конец бумаги. Поставьте другие коробки (примерно такой же длины, как у бумаги) стенками по обе стороны от взлетно-посадочной полосы, не допуская побега мышей.
- Положите черные и красные чернила в отдельные чашки Петри (диаметром 35 мм).
2. Тренировочная сессия
ПРИМЕЧАНИЕ: Проводите тренировку только в возрасте 4 недель.
- Положите мышь на ближний конец листа бумаги (лицом головы к воротам). Пусть мышь идет от ближайшего конца к воротам. Уберите мышь из окна ворот. Если мышь останавливается на бумаге, аккуратно подтолкните мышь к коробке ворот пальцем.
- Удерживайте мышь, взявшись за загривок между большим и указательным пальцами, чтобы ограничить движение передних конечностей. Затем возьмитесь за спину и хвост между подушечкой большого пальца и другими пальцами, чтобы ограничить движение задних конечностей.
заметка: Недостаточное удержание мыши приводит к появлению чернильных пятен на одежде.
- Погрузите нижнюю часть передних конечностей в красные чернила, а нижнюю часть задних конечностей в черные чернила. Немедленно поместите мышь на проксимальный конец листа бумаги (лицом к воротам). Пусть мышь идет от ближайшего конца к воротам. Если мышь останавливается на бумаге, аккуратно подтолкните мышь к коробке ворот пальцем.
- Уберите мышь из окна ворот. Переходим к тестовой сессии.
3. Тестовая сессия
- После тренировки подготовьте взлетно-посадочную полосу для отпечатков ног с помощью нового вырезанного листа белой бумаги.
- Удерживайте мышь, взявшись за загривок между большим и указательным пальцами, чтобы ограничить движение передних конечностей. Затем возьмитесь за спину и хвост между подушечкой большого пальца и другими пальцами, чтобы ограничить движение задних конечностей.
- Погрузите нижнюю часть передних конечностей в красные чернила, а нижнюю часть задних конечностей в черные чернила. Сразу же поместите мышь на проксимальный конец бумаги. Пусть мышь идет от ближайшего конца к воротам.
ПРИМЕЧАНИЕ: Поскольку мыши предпочитают темноту, ходьба становится более устойчивой по мере приближения мыши к темной коробке ворот. Если мышь останавливается на бумаге, аккуратно подтолкните мышь к коробке ворот пальцем. Затем, если надежные следы для анализа не получены из-за остановки мыши, повторите тестовую сессию.
- Верните мышь в домашнюю клетку из ящика ворот. Очищайте коробку ворот с 70% этанолом после каждой пробной сессии. Высушите на воздухе бумагу для ног.
4. Анализ следов
- Получите три измерения каждого параметра (длина шага передних и задних конечностей, ширина переднего и заднего основания, перекрытие между передней и задней конечностями, рисунок 1B) с помощью линейки из бумаги для печати на ноге.
заметка: Поскольку следы проксимального и дистального отделов часто демонстрируют большие колебания из-за остановки или бега, выбирайте деталь с устойчивой походкой следов. Средняя часть бумаги, напечатанной на футпринте, обычно подходит для анализа.
- Для длины шага измерьте расстояние между одинаковыми частями лапы (например, подушечкой лапы или пальцем ноги).
- Для ширины основания передней части проведите линию между последовательными правыми (или левыми) передними посадочными местами. Затем измерьте длину вертикальной линии от контактной площадки левого (или правого) переднего посадочного места до линии, проведенной между правым (или левым) посадочным местом.
- Для ширины заднего основания проведите линию между последовательными правыми (или левыми) задними следами. Затем измерьте длину вертикальной линии от подушечки левого (или правого) заднего следа до линии, проведенной между правым (или левым) следом.
- Для перекрытия измерьте расстояние между контактными площадками левого (или правого) переднего и заднего контуров.
- Усредните три измерения для каждого человека. Для статистического анализа используйте индивидуальное среднее значение каждого параметра.
- Для длины шага используйте среднее арифметическое отдельных средних шагов левого и правого шагов.
- Для асимметрии длины шага используйте абсолютное значение разницы между индивидуальными средними значениями длины шага левой и правой конечности.
- Для статистического анализа других параметров (ширина передней базы, ширина задней базы и перекрытие) используйте индивидуальное среднее значение напрямую.
