Методическая статья

Водный лабиринт с перемещением платформы: метод оценки рабочей памяти

30 апреля 2023 г.

В этой статье

Аннотация

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Источник: Hausser, N., et al. Выявление поведенческих дефицитов у крыс после черепно-мозговой травмы.J. Vis. Exp (2018).

В этом видео мы описываем испытание водного лабиринта Морриса с перемещением платформы, навигационную задачу, используемую для изучения рабочей памяти у грызунов.

Протокол

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Все процедуры, связанные с животными, были проверены местным институциональным комитетом по уходу за животными и ветеринарным наблюдательным советом JoVE.

1. Водный лабиринт рабочей памяти

  1. оборудование
    1. Используйте бак, наполненный водой на высоту 28 см и поддерживаемый при температуре 26 ± 1 °C.
    2. Используйте платформу из прозрачного акрилового стекла диаметром 10 см на подставке высотой 26 см><. заметка: Верхняя поверхность платформы должна быть покрыта силиконом в форме круга с крестиком поперек. Это позволяет крысам забраться на платформу и обеспечивает им сцепление, чтобы они не соскользнули.
    3. Возьмите с собой секундомер, тепловую лампу, одноразовые полотенца, впитывающие прокладки, дополнительные клетки и небольшую сачок для аквариумных рыб с длинной ручкой. Используйте компьютеризированную систему видеослежения, подключенную к видеокамере, чтобы записать плавание крысы и отправить данные на компьютер. Сохраните видео и данные на компьютере для последующего анализа.
  2. Тестирование водного лабиринта с рабочей памятью
    1. Проводите для крыс четыре пары испытаний каждый день в течение пяти дней подряд, поместите платформу в каждый из четырех секторов и начните работу крыс с каждой из четырех начальных точек (N, S, E, W), как описано ниже.
    2. Во-первых, определите пары «начальное местоположение-платформа», которые будут использоваться на протяжении всего эксперимента.
      ПРИМЕЧАНИЕ: Порядок квадрантов, в которых расположена платформа и используемая начальная точка, должен быть в разном порядке для каждого из пяти дней плавания, но одинаковым для каждой крысы.
      1. Используйте четыре начальные точки (север, юг, восток или запад) и четыре местоположения платформы (квадранты 1, 2, 3 или 4; Рисунок 1). Например, (N, 2; Е, 4; С, 1; Ш, 3; см. Рисунок 1). Планируйте сбалансированный порядок (не случайный), чтобы не располагаться слишком близко к платформам начальным точкам (Ни одна начальная точка не совпадает с квадрантом местоположения платформы). Настройте таблицу данных, используя квадранты платформы и четыре начальные точки.
      2. Напишите протокол для программного обеспечения для видеослежения, которое будет использоваться для того, чтобы снимать на видео плавание крыс и собирать определенные данные (например, продолжительность плавания, скорость, пройденное расстояние, прежде чем найти платформу).
        заметка: Программное обеспечение для слежения автоматически остановит запись по истечении указанного времени. В протоколе должно быть указано, где расположена платформа, сколько испытаний должно быть проведено на одном животном и сколько животных будет протестировано за сеанс, а также максимально допустимая продолжительность (например, 120 с).
      3. Тестируйте 4–6 крыс за сеанс.
        заметка: Более 6 крыс создают проблему во времени между крысами и могут привести к ошибке со стороны обработчика. Согревающие боксы также становятся переполненными.
    3. Пробное испытание 1
      1. Откройте программу для отслеживания видео и загрузите правильный протокол, включая карту водного лабиринта.
      2. Разместите платформу в назначенном месте (например, 2; Рисунок 1) и проверьте, что она совпадает с картой в программном обеспечении. Подготовьте программное обеспечение для слежения, которое будет запускаться, когда крыса войдет в поле зрения видеокамеры.
      3. Поместите крысу в резервуар лицом к стене в назначенном месте (например, N; Рисунок 1) и сразу запустить таймер.
      4. Дайте крысе 120 с найти платформу. Когда крыса найдет платформу, остановите таймер и запишите время на листе. Если крысе не удается найти платформу, подведите ее к платформе вручную и запишите 120 секунд. Дайте крысе 15 с оставаться на платформе.
    4. Испытание 2
      1. Убедитесь, что программное обеспечение готово к пробной версии 2. Поместите крысу обратно в аквариум в ту же исходную позицию (N). Повторите шаг 1.2.3.4.
    5. После испытания 2 поместите крысу в отапливаемый вольер на 4 мин. Переместите платформу на второе место (4; Рисунок 1) и убедитесь, что он соответствует карте в программном обеспечении.
    6. Повторяйте процедуры испытаний 1 и 2 (шаги 1.2.3–1.2.4) до тех пор, пока не будут завершены все четыре сопряжения начального места/платформы.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

figure-results-1
Рисунок 1. Схема водного лабиринта.На этой схеме показаны возможные местоположения платформ (1, 2, 3, 4) и начальные точки (N, S, E, W) для водного лабиринта Морриса с рабочей памятью. Крысам разрешается по два испытания с каждой стартовой точки/сопряжения платформы. Интервал между попытками составляет 15 секунд и отдых в согревающей камере между парами попыток, всего четыре пары попы...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
Конфликт интересов не декларируется.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
крысы Спрэг-ДоулиЛаборатории Чарльза РиверсаCD-IGS rats код штамма 001Кобель-альбинос 300-350г по прибытии
Бассейн из стекловолокнаПроизводитель неизвестен72 дюйма в диаметре x 30 дюймов в глубину (~ 500 галлонов)
PlexiglassРучная работа Мэгги ПарслиДиаметр 10 см 26 дюймов в высоту с силиконом, нанесенным на поверхность платформы для обеспечения поверхности захвата
Ящики для животных из плексигласа с крышкамиМеханический цех UTMB2 коробки 10" Ш x 16" Д x 9" В
Точечные светильники/тепловые лампыХоум Депо3 вокруг бассейна 2 над ящиками для сушки животных
AnyMazeИнструменты Сан-Диего9001http://www.sandiegoinstruments.com/any-maze-video-tracking/
<тр > <тр > <тр > Платформа <тр > <тр > <тр >

Перепечатки и разрешения

Запросить разрешение на повторное использование текста или иллюстраций этой статьи JoVE

Запросить разрешение

Теги

Похожие статьи