Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.
Методическая статья
2.7K просмотров
⸱
30 апреля 2023 г.
Источник: Zink, K. E. et al. Захват коммуникации малых молекул между тканями и клетками с помощью визуализационной масс-спектрометрии. J. Vis. Exp. (2019)
Этот протокол описывает технику подготовки образцов путем совместного культивирования эксплантов яичников с раковыми клетками фаллопиевых труб. Эти образцы визуализируются с помощью масс-спектроскопии изображения, или IMS, для обнаружения обмена малыми молекулами между клетками и тканями, приводящего к развитию опухоли.
Все процедуры, связанные с животными, были рассмотрены местным комитетом по уходу за животными и ветеринарным советом JoVE.
1. Настройка и инкубация обработанного ITO слайда для кокультур
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Рисунок 1: Рабочий процесс пробоподготовки неразделенной кокультуры. (A) Приклейте 8-луночную камеру к проводящей стороне предметного стекла с покрытием ITO. (B) Поместите разрезанные пополам завязи в центр лунок для условий совместного выращивания. (C) Добавьте 300 μL агарозной/клеточной суспензии непосредственно в лунки. Убедитесь в.......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| Денвилл | С1017-О | Сбор ячеек | |
| Многородность | PEZGS0816 | Перепрофилирован из Millipore Millicell Затвор камеры EZ | |
| Сигма-Олдрич | 34998-4Л | Растворитель для напыляемой матрицы | |
| Эппендорф | 5810 Р | Чтобы собрать ячейки и удалить всплывающий | |
| Брукер Далтоник | 8201344 | Матрица распыляется на высохшее предметное стекло | |
| Брукер Далтоник | 8201346 | Матрица распыляется на высохшее предметное стекло | |
| Gibco | 11995-065 (Английский) | Среда смешанная с агарозой | |
| Дженеси Сайентиал | 22-282 | Для агарозных аликвот | |
| Брукер | 8237001 | Платформа для инкубации сокультур | |
| Сигма-Олдрич | А9414-10Г | Смешивается с материалами для гальванического покрытия | |
| Корнинг | No 4870 | Используется для резки пластиковых разделителей для<бр /> Разделенные камеры | |
| Брукер Далтоник | 8206195 | Калибр для среднего массового диапазона | |
| Сигма-Олдрич | 343-242-5Г | Калибр для малого диапазона масс | |
| Симга-Олдрич | Е2758 | Пищевая добавка для клеточных культур | |
| Пепротех Инк. | 100-15 | Пищевая добавка для клеточных культур | |
| Селлгро | 30-005-ЧР | Пищевая добавка для клеточных культур | |
| Сигма-Олдрич | 11074547001 | Пищевая добавка для клеточных культур | |
| Gibco | No 25030-081 | Пищевая добавка для клеточных культур | |
| Gibco | 15140-122 | Пищевая добавка для клеточных культур | |
| Технологии Фишера | А116-50 | Добавлено в матричное решение | |
| Технологии HTX | Для нанесения матрицы |
