Моделирование рака на основе хориоаллантоисной мембраны у курицы: модель in ovo для изучения опухолегенеза и метастазирования раковых клеток

Аннотация

Источник: Sharrow, A. C. et al. Использование модели хориоаллантоисной мембраны курицы in vivo для изучения гинекологических и урологических раковых заболеваний. J. Vis. Exp.(2020)

В этом видео мы описываем имплантацию раковых клеток на хориоаллантоисную мембрану курицы для создания модели in ovo. Модель успешно приживляет клетки рака яичников для изучения прогрессирования гинекологического рака.

Протокол

Все процедуры, связанные с животными, были проверены местным институциональным комитетом по уходу за животными и ветеринарным наблюдательным советом JoVE.

1. Подготовка суспензии раковых клеток к трансплантации (вариант 1)

ПРИМЕЧАНИЕ: Это должно быть завершено непосредственно перед имплантацией, которая в идеале должна состояться между 7 и 10 днями. Пожалуйста, ознакомьтесь с примечаниями в начале шага 3 или 4 для получения дополнительной информации о дате имплантации. Этот подход был использован для всех клеточных линий и культуральных расщеплений опухолей рака почки.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье

Имя	Компания	Каталожный номер	Комментарии
010 Тефлон (ПТФЭ) Белый 55 Duro Shore D Уплотнительные кольца	Магазин уплотнительных колец	ТЭФ010	Антипригарное кольцо для посева клеток. 1/4"ID X 3/8"OD X 1/16"CS Политетрафторэтилен (ПТФЭ).
Деликатные ножницы для работы; Изогнутый; Шарп-Шарп; длина лезвия 30 мм; 4-3/4 дюйма. Общая длина	Робоз Хирургический	РС6703	Это приведено в качестве примера. Любые подобные изогнутые ножницы также подойдут.
Dremel 8050-N/18 Micro 8V Max Набор инструментов	Dremel	8050-Н/18	Этот набор содержит все необходимые инструменты
Оплодотворенные куриные яйца (Род-Айленд Ред - Браун, Лабораторный сорт)	АА Лаб Эггс Инк.	Н/Д	Необходимо будет определить местного поставщика яиц, так как этот поставщик осуществляет поставки только на региональном уровне.
Hovabator Genesis 1588 Deluxe Инкубатор для яиц Комбинированный набор	Инкубаторный склад	HB1588D-NONE-1102-1588-1357	Можно использовать и другие инкубаторы для яиц, но их надежность необходимо проверить. После имплантации также можно использовать клеточный инкубатор с отключенным CO2.
Incu-Bright Cool Light Свеч для яиц	Инкубаторный склад	1102	Можно использовать и другие свечи, однако этот предпочтительнее среди тех, которые мы тестировали. Этот свечник входит в вышеупомянутый набор инкубатора.
Матригель Мембранная Матрица HC; Без LDEV	Корнинг	354248	Решение для внеклеточного матрикса
СКОВ3	АТКС	ХТБ-77	Клеточная линия рака яичников человека.
Мешалки с резиновым полицейским; диаметр 5 мм, длина 6 дюймов	Объединенные научные поставки	ГРПЛ06	Это приведено в качестве примера. Любые подобные стеклянные стержни для перемешивания также подойдут.
Щипцы для образцов	Науки электронной микроскопии	72914	Это приведено в качестве примера. Щипцы, используемые для оттягивания оболочки для биолюминесцентной визуализации, имеют длину около 12,8 см с наконечниками шириной 3 мм.

г.