Экстракция отдельных долей предстательной железы: метод забора отдельных долей предстательной железы из простаты мышей

Аннотация

Источник: Nath, D. et al. Идентификация, гистологическая характеристика и вскрытие долей предстательной железы мыши для 3D-моделей сфероидальных культур in vitro. J. Vis. Exp. (2018)

В этом видео описывается техника забора отдельных долей из предстательной железы модели мыши. Отдельные доли затем могут быть использованы для гистологического анализа и исследования рака.

Протокол

Все процедуры, связанные с животными, были рассмотрены местным комитетом по уходу за животными и ветеринарным советом JoVE.

1. Общая анатомия простаты и микродиссекция отдельных долей

ПРИМЕЧАНИЕ: Это изображено на рисунках 1(i-n) и рисунке 2

1. Переверните ткань с помощью пары тупых щипцов так, чтобы спинная сторона была обращена вверх, обнажая дорсальные доли, которые напоминают крылья бабочки.
2. Соберите дорсальные доли, удерживая долю щипцами и обрезая ножницами у основания (Рисунок 1j).
3. Переверните оставшуюся ткань в брюшную сторону.
4. Соберите боковые доли, которые имеют небольшие размеры и обычно оборачивают мочеиспускательный канал сбоку, который вклинивается между передней, вентральной и дорсальной долями (рисунок 1k).
5. Далее соберите вентральные доли, которые больше латеральных долей и лежат на уретре вентрально (рисунок 1l).
6. Наконец, соберите передние доли, самые большие из четырех, разрезав и выбросив мочеиспускательный канал (Рисунок 1m).
7. Обработайте кусочки ткани в соответствии с экспериментальными потребностями.

Результаты

Рисунок 1: Рассечение предстательной железы мыши. Пошаговые снимки для вскрытия предстательной железы мыши из UGS: (а) удаление жира, (б) удаление мочевого пузыря, (в) удаление семявыносящих протоков, (г) вентральный вид простаты с уретрой, (д) дорсальный вид простаты с уретрой, (f-h) удаление семенн...

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье

Имя	Компания	Каталожный номер	Комментарии
Хирургические инструменты для мышей (набор для препарирования мышей)	Мировые прецизионные приборы	МЫШИНЫЙ НАБОР
Диссекционный микроскоп
RPMI средний	Thermofisher Scientific	11875093
Среда для рассечения (DMEM + 10% FBS)	Thermofisher Scientific	11965-084
Фетальная бычья сыворотка	Thermofisher Scientific	10438018
PBS (фосфатно-солевой буфер)	Thermofisher Scientific	10010031
Коллагеназа	Thermofisher Scientific	17018029	Сделайте 10-кратный бульон (10 мг/мл) в RPMI, отфильтруйте, стерилизуйте, и храните при -20 °C
Шприцы и иглы	Научный центр Фишера