$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
1. Расщепление сфероидов SBNET
ПРИМЕЧАНИЕ: Это сделано для расширения и обмена с другими исследователями.
- С помощью пипетки P1000 механически разорвите ЭКМ и отсасывайте ЭКМ со сфероидами SBNET в стерильную пробирку объемом 1,5 мл.
- Центрифугируйте при давлении 1 000 x g при 4 °C, удалите всю надосадочную жидкость и поместите пробирку на лед.
- Добавьте в гранулу в 2-4 раза больше объема нового ECM. Смешайте новый ЭБУ со старыми сфероидами ЭБУ и SBNET, пипетируя вверх и вниз 10 раз, избегая образования пузырьков воздуха.
- Перенесите 5-20 мкл смеси сфероидов ECM и SBNET на новую пластину и дайте ECM застыть.
- Накройте новой средой SBNET и переложите в инкубатор. Коэффициент восстановления составляет примерно от 95% до 100%.
- Для транспортировки сфероидов SBNET в другую лабораторию перенесите сфероиды SBNET с новым ECM в колбу T25 и дайте ECM застыть.
- Наполните колбу T25 сфероидом SBNET, плотно закрутите крышку и подготовьте посылку для отправки.
- После получения культуры сфероида SBNET удалите питательную среду и выполните шаги с 1.1 по 1.5, чтобы вернуть сфероиды SBNET в культуру.