Источник: Xuan Ngo, Y. et al. Выделение и культивирование первичных оральных кератиноцитов из неба взрослой мыши. J. Vis. Exp.(2021)
Это видео демонстрирует хирургическую процедуру по рассечению ткани нёба на мышиной модели.
Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.
Методическая статья
Рассечение ткани нёба у взрослой мышиной модели: хирургическая процедура по забору твердого нёба и мягкого нёба из полости рта взрослой мыши
5K просмотров
⸱
8 июля 2025 г.
В этой статье
Аннотация
Протокол
Все процедуры, связанные с животными, были проверены местным институциональным комитетом по уходу за животными и ветеринарным наблюдательным советом JoVE.
1. Рассечение ткани нёба у взрослой мыши
- Принесите в жертву взрослую мышь C57BL/6J (самца или самку) в результате вывиха шейки матки в соответствии с правилами учреждения, касающимися благополучия животных.
- Удалите волосы вокруг рта с помощью бритвы. С помощью ножниц режьте от щеки к челюсти, с обеих сторон. <бр/> заметка: Мышь нуждается в обезболивании перед жертвоприношением. Используется обезболивающая смесь медетомидина, мидазолама и буторфанола (см. Таблицу материалов).
- Используйте щипцы, чтобы широко открыть рот и впитать любую кровь с помощью ватного тампона. Чтобы продезинфицировать нёбо, протрите внутреннюю часть рта ватным тампоном, содержащим 10% повидон-йода.
- Чтобы собрать небо мыши, сначала используйте лезвие хирургического скальпеля, чтобы сделать краевой разрез на всю толщину вдоль нёбной стороны верхнечелюстных зубов. Затем тщательно рассеките все нёбо с помощью распатория.
заметка: Распаторий — это инструмент, используемый для поднятия слизисто-надкостничного лоскута (см. Таблицу материалов) (Рисунок 1B). - Быстро перенесите ткани нёба в пробирку объемом 15 мл, содержащую 4 мл готовой среды + раствор антибиотика-антимикотика. Держите ткани на льду до тех пор, пока они не будут готовы к инкубации.
заметка: При сборе у нескольких мышей ткани нёба можно держать на льду до 4 часов.
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Результаты
Рисунок 1: Обзор процедуры диссекции и выделения оральных кератиноцитов мыши. (A) Схематическое изображение ротовой полости мыши. (B) Инструменты, используемые для рассечения нёба и выделения оральных кератиноцитов мыши. (C) Светлое изображение нёба мыши. Масштабная линейка: 100 мкм. (D) Краткое изложение протокола.
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Раскрытие информации
Конфликт интересов не декларируется.
Материалы
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| Ножницы с радужной оболочкой | Муромати Кикай | 14090-09 | |
| Медетомидин | Ниппон Дзэньяку Когё | Домитор | |
| Мидазолам | Астеллас Фарма | Дормикум | |
| No15 Одноразовый скальпель | перо | 219AABZX00136000 | |
| Буторфанол | Мэйдзи Сэйка Фарма | Веторфале | |
| Полуизогнутые щипцы | Биоисследовательский центр BRC | PRI13-3376 | |
| Повидон-йод | Квадрат Y | 872612 | |
| Распаторий #14 | КАК ЕДИНОЕ ЦЕЛОЕ | 8-4599-01 | |
| Тонкие щипцы | Биоисследовательский центр BRC | PRI13-3374 | |
| Антибиотик-антимикотик 100x | Gibco | 15240062 | |
| 15 мл стерильная коническая пробирка | сокол | 352096 | |
| хлопок | КАК ЕДИНОЕ ЦЕЛОЕ | No 63-1452-97 | |
| Определенная добавка для роста EpiLife (EDGS) | Gibco | С0120 |
