Мозг фрагмент Стимуляция Использование микрожидкостных сети и стандартные палаты перфузии

Summary

Мы показываем, изготовление простой микрожидкостных устройство, которое может быть интегрировано со стандартными установками электрофизиологии подвергать микромасштабной поверхности мозга срез в хорошо контролируемым образом, чтобы различные нейромедиаторы.

Abstract

Мы показали, изготовление двухуровневой микрожидкостных устройство, которое может быть легко интегрирована с существующими установками электрофизиологии. Двухуровневая микрожидкостных устройства изготовлены с использованием двухступенчатой ​​стандартные отрицательные сопротивляться процесса литографии ^1. Первый уровень содержит микроканалов с впускные и выпускные отверстия на каждом конце. Второй уровень содержит микромасштабной круглые отверстия расположен на полпути от длины канала и по центру, а также ширины канала. Пассивный насосных метод используется для перекачки жидкостей из входного отверстия к выходному порту ^2. Микрожидкостных устройство интегрирован с вне готовых камер перфузии и позволяет полную интеграцию с установки электрофизиологии. Жидкости представлен на входе потока через порты микроканалов к розетке порты, а также выходить через круглые отверстия расположены на верхней части микроканалов в ванну перфузии. Таким образом, нижней поверхности мозга срез помещают в ванну камеры перфузии и выше микрожидкостных устройство может подвергаться воздействию различных нейромедиаторов. Микромасштабной толщина микрожидкостных устройств и прозрачным характером материалов [покровное стекло и PDMS (полидиметилсилоксан)] используется, чтобы сделать микрожидкостных устройств позволяют микроскопии мозга срез. Микрожидкостных устройство позволяет модуляции (как пространственные, так и временных) на химические раздражители представлен микросреды мозга срез.

Protocol

SU-8 плесень изготовления

Мастер подготовки

1. SU-8 мастер на подложке пластины кремния подготовлен с использованием двухступенчатой ​​стандартные отрицательные сопротивляться процесса литографии.
2. Знаков совмещения на пластине кремния удаляют с помощью лезвия бритвы, как высота этих структур (расположены вдоль внешней периферии пластины) больше, чем фактическая приборных структур.
3. Кремниевой пластины, затем очистить с помощью изопропилового спирта и сушат в потоке N _2. Поддержка столбы, изготовленные из ленты толщиной менее высоким структуру устройства заменить знаков совмещения с четырех сторон пластин....

Discussion

Существующие макромасштабе или микромасштабной мозга камер ломтик перфузии ограничены с точки зрения пространственного разрешения, которые они предоставляют подвергать мозг ломтики нейромедиаторов. Микрожидкостных технологии устройства продемонстрировали здесь преодолевает это ограничение, используя простые методы bioMEMS. Ожидается, что простота в изготовлении микрожидкостных устройства и простоту в интеграции с существующими установками электрофизиологии позволит широкому применению продемонстрировал устройство технологий. Интересные эксп.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
RC-26GPL	Tool	Warner Instruments	W2-64-0236	Низкопрофильная большая ванна RC-26GLP Записывающая камера
SHD-26GH/10	Tool	Warner Instruments	W2-64-0253	Прижим среза нержавеющей стали для RC-26G, расстояние между резьбой 1,0 мм
PDMS (полидиметилсилоксан)	Реагент	Dow Corning	Sylgard 184	Набор силиконовых эластомеров Plasma
Preen-II 862	Инструмент	Plasmatic Systems, Inc.		Микроволновая плазменная система
Модель P-1	Tool	Warner Instruments	W2-64-0277	Серия 20 Плоская платформа, Модель P-1
SA-NIK	Tool	Warner Instruments	W2-64-0291	Адаптер для Nikon Diaphot/TE200/TE2000, SA-NIK
Оксигенированный, подогреваемый ACSF (Искусственная спинномозговая жидкость)	Точный состав реагента			будет варьироваться в зависимости от применения