$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Все процедуры, связанные с животными, были проверены местным институциональным комитетом по уходу за животными и ветеринарным наблюдательным советом JoVE.
1. Процедура визуализации
- Поместите мышь в индукционную камеру для газовой анестезии и подайте 3% изофлуран в чистом кислороде до полного обезболивания животного. Проверяют глубину анестезии по отсутствию реакции на защемление лапы.
- Переложите животное на подогреваемую доску - составную часть станции визуализации UHFUS - удерживая животное в лежачем положении. С помощью ректального зонда, смазанного вазелином, измерьте температуру тела. Отрегулируйте температуру платы так, чтобы поддерживать температуру тела мыши в физиологическом диапазоне (36 ± 1°C).
- Смочите глаза мыши ветеринарной мазью, чтобы предотвратить сухость во время анестезии. Подайте наркотический газ (1,5% изофлурана в чистом кислороде) через маску для носа мыши. Отрегулируйте процентное содержание изофлурана для поддержания правильной глубины анестезии.
- Смажьте переднюю и заднюю лапы проводящей пастой и прикрепите их скотчем к электродам пластины ЭКГ, встроенным в доску. Убедитесь, что физиологические параметры (частота сердечных сокращений, сигнал дыхания и температура тела) правильно регистрируются и отображаются.
- Удалите волосы с обеих паховых областей с помощью средства для депиляции и покройте их средой для акустической связи.
- Зажмите линейный датчик UHFUS (центральная частота 40 МГц) в специализированный 3D-двигатель, встроенный в станцию формирования изображений UHFUS, что обеспечивает автоматическое и ступенчатое перемещение датчика.
- Правильно сориентируйте и отрегулируйте положение ультразвукового датчика для получения изображений пахового лимфатического узла по короткой оси (слева/справа) и поместите интересующую область в фокальную зону.
- Отсканируйте весь объем пахового лимфатического узла в виде последовательности изображений 2D B-режима, как описано ранее. Получение изображений на нескольких уровнях лимфатического узла путем линейного движения датчика с шагом в микрометровом масштабе для создания 3D-данных в виде автоматически респираторных и кардиозависимых кинопетель.
- Установите для записи изображения следующие параметры: расстояние сканирования в диапазоне от 2 до 5 мм (в зависимости от размера лимфатических узлов); размер шага 44 мкм, с результатом 46-114 шагов сканирования/срезов лимфатических узлов и временем регистрации 1-3 минуты на животное. Сохраняйте полученные изображения в цифровом формате в формате RAW (DICOM) для дальнейшего анализа в автономном режиме.