Хирургическая индукция нестабильности поясничного отдела позвоночника на мышиной модели: хирургическая процедура резекции поясничных остистых отростков и соединенных связок на мышиной модели

Аннотация

Источник: Liu, S. et al. Мышиная модель нестабильности поясничного отдела позвоночника. J. Vis. Exp. (2021)

В этом видео мы описываем хирургическую процедуру для индуцирования нестабильности поясничного отдела позвоночника на мышиной модели путем резекции поясничного отростка L3 до L5 вместе с надостными и межостистыми связками.

Протокол

Все процедуры, связанные с животными, были проверены местным институциональным комитетом по уходу за животными и ветеринарным наблюдательным советом JoVE.

1. Предоперационная подготовка

1. Стерилизация инструментов: Перед операцией хирургические инструменты стерилизуются паром в автоклаве (121 °C в течение 15 минут). Упакуйте инструменты в металлический контейнер и храните их до тех пор, пока они не будут использованы в операции.
2. Установка операционной платформы: Назначьте для операции зону скамьи размером не менее 60 см x 60 см. Очистите поверхность участка 75% спиртом и накройте одноразовым медицинским полотенцем. Положите стерильный пакет с хирургическими инструментами, реактивы, хирургические предметы на одноразовое медицинское полотенце в пределах верхней 1/3 площади. Оставьте оставшиеся 2/3 участка чистыми для хирургической операции. Добавьте подставку под хирургическую прокладку для тепловой поддержки.
3. Подготовка животных
   1. Поместите животное (мышь C57BL/6J, самец, 8-недельный возраст) в индукционную камеру. Включите вапорайзер на уровне индукции 4% для изофлурана и 4 л/мин для кислорода. После того, как животное будет полностью обезболито, поддерживайте подачу анестетика с носовым конусом и подачу анестетика на уровне 1,5% для изофлурана и 0,4 л/мин для кислорода во время операции. Следите за дыханием животного.
   2. Нанесите глазную мазь хлортетрациклина гидрохлорида для предотвращения сухости роговицы во время операции.
   3. Выбрейте операционную область на тыльной поверхности от нижней части грудной клетки до верхней части крестцовой области с помощью триммера для мелких животных. Удалите сбритый мех тканевыми салфетками.
   4. Нанесите крем для депиляции на выбритый участок и оставьте его там не более чем на 3 мин. Удалите крем марлей и промойте 2 мл 0,9% стерильного физиологического раствора.
   5. Поместите изготовленную на заказ хирургическую цилиндрическую подушечку (рис. 1A) под брюшную полость мыши, чтобы поднять поясничный отдел позвоночника и облегчить хирургическую операцию.

2. Обнажение поясничного третьего и поясничного пятого (L₃–L₅) остистых отростков

1. Указательным пальцем дотроньтесь до подкожных остистых отростков поясничных позвонков, которые расположены более наружу, и сравните с грудными и крестцовыми позвонками, чтобы определить поясничный отдел.
2. Промойте кожу с использованием 75% спирта. Выполните разрез кожи по средней линии на 3–4 см в области поясницы от средней части грудной клетки до бедра с помощью лезвия скальпеля, чтобы обнажить фасцию.
3. Определите поясничный отдел позвоночника по морфологии задней фасции, прикрепленной к кончикам остистых отростков. В частности, от третьей поясничной (L₃) до первой крестцовой (S₁) фасции отличаются от других фасций своей V-образной формой. Последний V-образный кончик соединяется с первой крестцовой (S₁) фасцией, а первый V-образный кончик соответствует остистому отростку L₃ (рис. 1B).
4. Сделайте задние разрезы параостистых мышц вдоль остистых отростков от L₃ до L₅ с обеих сторон латерально лезвием скальпеля (рисунок 1C). Контролируйте глубину разреза по направлению к фасеткам, чтобы уменьшить кровоизлияние.
5. Разделите мышечные слои с помощью двух офтальмологических щипцов, чтобы обнажить остистые отростки и надостистые связки от L₃ до L₅.

3. Резекция остистых отростков L ₃–_{L 5} вместе со связками

1. Отделите отдельные остистые отростки, отрезав межостистые связки с помощью венеринических ножниц (рисунок 1D).
2. Резецировать остистые отростки L₃–_{L 5} вместе с межостистыми связками с помощью ножниц Венеры (рис. 1E).
3. Сшить разрез кожи стерильной шелковой тесьмой (размер шва 5,0) без повторного прикрепления паравертебральных мышц.
4. Нанесите глазную мазь хлортетрациклина гидрохлорида на область операции.

Результаты

Рисунок 1: Обнажение остистых отростков L3–L5 и работа с БИС. (A) Изготовленная на заказ цилиндрическая подушечка помещается под брюшную полость мыши. (B) Обнажение поясничных фасций и идентификация остистых отростков от L3 до S1 по форме буквы «V». (C) Боковые разрезы параостистых мышц с обеих сторон остистых отростков от L3 до L5. ...

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье

Имя	Компания	Каталожный номер	Комментарии
Хлортетрациклина гидрохлорид глазная мазь	Шанхайская генеральная фармацевтическая компания, Лтд.	H31021931	Предотвращает сухость глаз, Предотвращает инфицирование раны
Самцы мышей C57BL/6J	Фармацевтическая компания Тянь-цзян (Цзянсу, Китай)	SCXK2018-0004	Животная модель
Одноразовое медицинское полотенце	Хэнань Хуаюй Медикал Девайс Ко., Лтд.	20160090	Платформа для хирургической операции
Оборудование для ингаляционной анестезии	МИДМАРК	Матркс 3000	анестезия
Изофлуран	Шэньчжэнь RWD Life Technology Co., Ltd.	1903715	анестезия
Лидокаина гидрохлорид	Шаньдун Хуалу Фармасьютикал Ко., Лтд.	H37022839	Боли
Игла для медицинских швов	Шанхай Пудун Цзиньхуань Медикал Продактс Ко., Лтд.	20С0401Дж	Наложение швов на кожу
Офтальмологические щипцы	Завод хирургических инструментов Shanghai Medical Devices (Group) Co., Ltd.	ЮД1050	Обрежьте кожу
Офтальмологические ножницы (10см)	Завод хирургических инструментов Shanghai Medical Devices (Group) Co., Ltd.	У00030	Разрез кожи
Шелковые плетеные	Шанхай Пудун Цзиньхуань Медикал Продактс Ко., Лтд.	11В0820	Наложение швов на кожу
Триммер для мелких животных	Шанхай Фейке Электрик Ко., Лтд.	ФК5910	Эпиляция
Стерильные хирургические лезвия(12#)	Шанхай Пудун Цзиньхуань Медикал Продактс Ко., Лтд.	35Т0707	Разрез мышцы
Крем для эпиляции Veet	RECKITT BENCKISER (India) Ltd	NA	Эпиляция
Венерины ножницы	Медицинское оборудование Mingren	Длина:12,5 см	Обрезка мышечного и остистого отростка