Все процедуры, связанные с животными, были проверены местным институциональным комитетом по уходу за животными и ветеринарным наблюдательным советом JoVE.
1. Хирургическое удаление сердечно-легочной блокады.
- анестезия:
- Используйте комбинацию седативного средства (ксилазин) и барбитурата (пентобарбитала).
заметка: Можно использовать различные анестетические коктейли без влияния на результаты эксперимента.
- Во-первых, успокойте здоровых новозеландских кроликов однократной внутримышечной инъекцией ксилазина гидрохлорида (3-5 мг/кг). Следите за тем, чтобы кролики оставались спокойными и расслабленными, чтобы через несколько минут после инъекции можно было провести дальнейшие манипуляции.
- После седации используйте краевые (боковые) ушные вены в качестве доступа для обезболивания кроликов с помощью внутривенной инъекции пентобарбитала натрия (28 мг/кг).
- контроль:
- Чтобы избежать недостаточной анестезии или чрезмерного угнетения сердечной и дыхательной функций, контролируйте следующие параметры. Чтобы оценить глубину анестезии, проведите тест с щипцом ноги.
- Следите за тем, чтобы слизистая оболочка была розового цвета. Синие или серые оттенки указывают на гипоксию.
- Следите за тем, чтобы частота сердечных сокращений находилась в пределах 120-135 уд/мин, а температура тела не опускалась ниже 36,5 °C.
- Размещение животных:
- Обрийте туловище кролика и уложите животное на операционный стол в лежачее положение. Разместите вентиляционную систему рядом со столом, за головой кролика, чтобы можно было быстро подключить канюлю после трахеотомии и избежать повреждения тящей кости.
- Разрез и трахеотомия:
- Рассекайте кожу вентральным разрезом срединной линии в 3-5 см от диафрагмы вверх до шеи.
- Операционными ножницами разрежьте передние 2/3 трахеи между двумя хрящевыми кольцами, чтобы ввести трахеальную канюлю через фиброзную оболочку трахеи.
- Вставьте 5 мм (внешний диаметр; OD) канюлю трахеи через фиброзную оболочку трахеи и с помощью шелкового шва 4-0 для ее тщательной фиксации.
- Поместите щипцы или пинцет под трахею, чтобы канюля не согнулась с трахеей.