Методическая статья

Прерывистая фотостимуляция на модели кролика: методика индуцирования эпилептических припадков и одновременной регистрации мультисистемных параметров

8 июля 2025 г.

В этой статье

Аннотация

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Источник: Bosinski, C., et al. Мультисистемный мониторинг для идентификации судорог, аритмий и апноэ у кроликов, находящихся в сознании. J. vis. Exp. (2021).

В этом видео мы показываем процедуру одновременной записи видео-ЭЭГ-ЭКГ-капнографии-оксиметрии, полученных при индуцировании судорог в модели кролика.

Протокол

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Все процедуры, связанные с животными, были проверены местным институциональным комитетом по уходу за животными и ветеринарным наблюдательным советом JoVE.

1. Эксперимент с фотостимуляцией

  1. Поместите источник света с круглым отражателем на расстоянии 30 см перед кроликом на уровне глаз, при этом интенсивность вспышки установлена на максимум (16 кандел). Источник света обозначен белой точкой на рисунке 1E.
    заметка: Слабо освещенная комната должна использоваться для того, чтобы вызвать светочувствительную реакцию.
  2. Поскольку глаза кролика находятся по бокам головы, а не на передней части головы (как у людей), поместите 2 зеркала по обе стороны от кролика и 1 за кроликом, чтобы свет попадал в глаза кролика><. заметка: Плоское зеркало высотой ≥ 20 см и длиной ≥ 120 см создает треугольный вольер вокруг кролика, чтобы гарантировать, что мигающий свет попадает в глаза кролика, как показано на рисунке 1E.
  3. Подключите источник света к контроллеру с регулируемой скоростью, интенсивностью и продолжительностью.
  4. Записывайте видео с помощью камеры с красным светом и возможностью записи в инфракрасном диапазоне.
  5. Подвергайте кроликов воздействию каждой частоты в течение 30 с с открытыми глазами, а затем еще 30 с с хирургической маской, закрывающей их лицо><, чтобы имитировать или вызвать закрытие глаз на каждой частоте. заметка: Предыдущие исследования показали, что закрытие глаз является наиболее провокационным маневром для вызова светочувствительности к судорогам. Кроме того, у 10% светочувствительных пациентов электроэнцефалографические признаки проявляются только при закрытых глазах. Припадок может быть идентифицирован клинически по наблюдению за наличием миоклонических подергиваний головы и всего тела, клонуса или тонического состояния. Запись ЭЭГ более тщательно анализируется на предмет электроэнцефалографической корреляции (например, спайков, полиспайков и ритмичных разрядов) с двигательными проявлениями для окончательного диагноза судорожной активности. Движения, при которых ЭЭГ затемнена мышечным артефактом или волнами неопределенной эпилептогенности, должны быть рассмотрены эпилептологом для подтверждения.
  6. Увеличивайте частоту фотостимулятора с 1 Гц до 25 Гц с шагом 2 Гц. Затем выполните тот же протокол фотостимуляции, но на этот раз уменьшите частоту с 60 Гц до 25 Гц с шагом 5 Гц.
    заметка: Если у кролика случился припадок, эксперимент следует прекратить. Продолжайте наблюдать за кроликом в течение 30 минут. Затем верните кролика в помещение для содержания и наблюдайте каждые 1 ч в течение 3 ч для полного выздоровления. Однако, если фотостимуляция вызывает фотопароксизмальную реакцию, то остальные восходящие частоты пропускаются, и серия начинается снова, опускаясь с 60 Гц до тех пор, пока не произойдет другая фотопароксизмальная реакция. Это позволит определить верхний и нижний пороги фотостимуляции. Задержка не требуется, так как фотопароксизмальная реакция прекратится после прекращения фотостимуляции. Если неясно, произошла ли фотопароксизмальная реакция, частоту повторяют с задержкой в 10 секунд.
  7. После завершения эксперимента удалите отведения ЭЭГ и ЭКГ у кролика и верните его в домашнюю клетку для планового ухода со стороны персонала животноводческого хозяйства.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

figure-results-1
Рисунок 1: Кролик подключен к оборудованию. (A) Расположение электродов ЭКГ, левая рука обозначена желтой точкой. Правая рука обозначена белой точкой. Левая нога обозначена красной точкой. Земля спереди от правой ноги обозначена зеленой точкой. (Б) Кролик в удерживающем устройстве с прикрепленными электродами ЭКГ и ЭЭГ. (C) Молодой кролик в удерживаю...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
Конфликт интересов не декларируется.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
компьютерлощинаОпиплекс 5040Компьютер сбора данных
Электрод для ЭКГРитмЛинкRLSND116-2,513 мм, изогнутые под углом 35 градусов (диаметр 0,4 мм) подкожные штифтовые электроды
Электрод ЭЭГРитмЛинкRLSP5135-поворотные прямые 13 мм (диаметр 0,4 мм) подкожные штифтовые электроды
ЭГЕЛАБ (2020)Центр вычислительной нейробиологии им. ШварцаОткрытый доступМожет выполнять спектральный анализ ЭЭГ
Адаптер Ethernet-to-EthernetЛинксисUSB3G16Адаптер для подключения фотоаппарата к компьютеру
Поролоновая прокладкародовойН/ДСнижает давление, оказываемое на шею маленьких кроликов ограничителем, чтобы предотвратить неблагоприятные кардиореспираторные эффекты компрессии шеи
ИК-подсветкаБошEX12LED-3BD-8WОблегчает запись в темноте
LabChart Pro (2019, версия 8.1.16)ПриложенияН/ДАнализ ЭКГ
MATLAB (R2019b, обновление 5)Математические работыН/ДТребуется для запуска EEGLAB
микрофонСтереосистема SonyЭСМ-Д570ПЗапись слышимых проявлений припадков
Микропористая медицинская лента, Бумага, Белая3 МИН.1530-1Используется для фиксации проводов и создания ушной шины
Natus NeuroWorksНатусЛК101-8Программное обеспечение для сбора и анализа
ФотостимулятортраваPS22Стимулятор для контроля частоты, задержки, длительности, интенсивности световых импульсов
Пластиковый органайзер для проводов / бандлер12Vwire.comЛМ-12-100-БЛКПучок проводов для снижения уровня шума
PS 22 ФотостимуляторИнструменты для травыBZA641035Стробоскоп с регулируемой частотой вспышки, задержкой и интенсивностью
Труба ПВХродовойН/ДПредотвращает удары задних лап маленькими кроликами и травму позвоночника
Квантовый усилительНатусNo 13926Усилитель / дигитайзер
Усилитель Quantum HeadBoxНатусNo 2213464-контактная коммутационная коробка
Ограничитель для кроликовПлас-Лабс501-ТСДоступны ограничители для кроликов различных размеров. 6" x 18" x 6" в этом исследовании.
Резиновая прокладка (бустер)родовойН/ДПоднимает маленьких кроликов вверх в удерживающем устройстве, чтобы предотвратить сдавливание шеи
Зажим для ушей SpO2НОНИН61000Технология PureSAT/SpO2
Адаптер для датчика SpO2НОНИН13931XPOD PureSAT/SpO2
PTZ-камера SRG-X120 с разрешением 1080p и выходами HDMI, IP и 3G-SDIсониСРГ-Х120Камера Impela
гг. г.

Перепечатки и разрешения

Запросить разрешение на повторное использование текста или иллюстраций этой статьи JoVE

Запросить разрешение

Теги

Похожие статьи